人血清载脂蛋白H的纯化与鉴定

为了研究载脂蛋白H（apoH)与疾病的关系，分别用HClO4,(NH4)2SO4沉淀、DEAE－纤维素离子交换层析，从人血清中纯化了载脂蛋白Ho用测定分子量，分析氨基酸组成和N－端氨基酸测序三个方面进行鉴定。用SDS－PAGE测得其相对分子量对54000。用高效液相色谱测定其中15种氨基酸的相对含量（mol/10^3mol残基）如下：Asp119.8,Glu108,Thr94.8,Ser78.6,Phe64.9,Gly1008,Ala57.2,Val57.2,Met10.6,Ile50.3,Leu77.1,Tyr31.9,His15.2,L-ys81.4,Arg39.4;d PE-ABI公司生产的475A型气相蛋白质测序仪上测得其N端10个氨基酸残基顺序如下：NH2－Gly-Arg-Cys-Pro-Asp-Asp-Leu。纯化得到的apoH与肝素有高的亲和性，还能与乙肝表面抗原结合。纯化apoH的方法相对比较简单，能达到测序的要求。     

老年性白内障与正常晶状体蛋白质双向电泳的差异

目的:应用双向电泳技术对比研究老年性白内障与正常晶状体,寻找差异表达的蛋白质。方法:分别收集老年性白内障和正常晶状体,采用固相pH梯度(IPG)等电聚焦双向电泳技术进行蛋白质分离,使用ImageMaster图像分析软件分析电泳图像,对比分析蛋白质表达的差异。结果:大部分晶状体蛋白质分布在Mr14000～97000,等电点(pI)5～9的范围内;高丰度蛋白质斑点分布在Mr20000～31000、等电点(pI)6～8的区域内。经软件分析正常组共识别出133±7个蛋白质斑点,白内障组共识别出136±8个斑点,两组之间的匹配率为87%(115个),其中有8个点蛋白质表达量增加了300%以上,其中44号增加了480%,有6个点蛋白质表达量减少了300%以上,其中125号减少了336%。结论:老年性白内障与正常晶状体存在差异表达的蛋白质。     

审计判断的透镜模型在公立医院内部控制评价中的运用

目的:探索公立医院内部控制评价的有效工具。方法:借鉴认知心理学在审计判断研究中使用的透镜模型理论框架,结合公立医院作为政府非营利组织的运行特点以及公立医院治理改革下的监管目标。结果:相较于其他评价方法,透镜模型在公立医院内部控制评价研究中更可行、有效。结论:使用透镜模型开展公立医院内部控制评价相关研究,能为医院治理层监管活动提供灵活、有效的评价技术工具。     

HMGB1基因SNP位点实时荧光PCR检测方法的建立

目的建立基于Taq Man探针实时荧光PCR技术的高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)检测方法。方法收集2014年4月在深圳口岸医院体检的健康人群样本20份,选择HMGB1基因上的2个SNP位点设计常规PCR和实时荧光PCR扩增引物和Taq Man探针,采用基因测序和实时荧光PCR方法对样本进行SNP分型。结果实时荧光PCR方法SNP分型结果显示,在20份样本中的HMGB1基因rs1412125位点检测到TT基因型11例,CC基因型1例,TC基因型8例;HMGB1基因rs3742305位点检测到GG基因型15例,GC基因型5例,未发现CC基因型。这一结果与基因测序方法结论完全一致。结论基于Taq Man探针技术的实时荧光PCR方法进行HMGB1基因SNP分型简单、快速、高效,可用于人群大规模样本的SNP筛查,具有广泛应用的价值。     

非霍奇金淋巴瘤患者血清IL-2R、IL-6、IL-8、 IL-10及TNF-α的表达变化及临床意义

目的:探究血清IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α在非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma, NHL)治疗中的表达变化及其临床意义。方法:收集解放军总医院第一医学中心收治的非霍奇金淋巴瘤患者63例,回顾性分析其治疗前后IL-2R、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α的含量变化。结果:IL-2R、IL-6及TNF-α含量在Ann Arbor分期Ⅲ-Ⅳ期、IPI评分≥3分的NHL患者中显著升高(P<0.05);IL-8含量在Hans分型non-GCB亚型和病期小于5年的患者中显著升高(P<0.05);IL-10含量在IPI评分≥3分的患者中显著升高(P<0.05)。NHL正规治疗过程中IL-2R、IL-10、TNF-α含量在CAR-T免疫疗法持续6个月完全缓解、化疗和靶向治疗的NHL患者中显著高于正常对照组(P<0.05)。与NHL标准经典一线治疗方案R-CHOP相比较,IL-2R、TNF-α含量在CDP和MOAP治疗方案中显著升高,IL-6、IL-8含量仅在CDP治疗中显著升高(P<0.05)。NHL患者CAR-...     

公众的关注

主管病人的顾问医生通常可以允许尸检。病理学家能够提供所需要的详细信息吗?     

尿路致病性大肠埃希菌1型菌毛黏附特性与分子流行病学分析

目的 了解尿路致病性大肠埃希菌(UPEC)1型菌毛黏附特性、耐药表型及分子流行病学特征,为临床诊疗提供理论基础。方法 收集2020年1-11月广东省中医院大学城医院临床分离的80株UPEC,利用VitekⅡ细菌鉴定药敏分析仪鉴定细菌并进行药敏实验。利用PCR方法检测UPEC的1型菌毛fimH基因的携带情况,酵母细胞黏附实验检测UPEC的黏附特性,比较黏附阳性UPEC和黏附阴性UPEC菌株间的抗生素耐药差异。通过随机扩增多态性DNA(RAPD)法分析黏附阳性UPEC间的亲缘关系。结果 80株UPEC中1型菌毛fimH基因阳性菌株为74株,占94.5%,其中黏附阳性菌株为37株,占50.0%。黏附阳性UPEC头孢呋辛耐药率(45.9%)和产超广谱β内酰胺酶(ESBL)阳性率(45.9%)均高于黏附阴性UPEC(21.6%、21.6%),差异均有统计学意义(P均<0.05)。37株黏附阳性UPEC可基因聚类,分为18个基因型,其中以R010基因型为主,包含11株UPEC,占29.7%;另外R006基因型包含4株UPEC,占10.8%;其余基因型均包含1～2株菌。结论 临床分离的UPEC...     

沙门菌显色培养基在食品检测中的应用

[目的]了解沙门菌显色培养基检测食品沙门菌分离和初步鉴定的作用。[方法]将100株实验室保存的沙门菌及非沙门菌接种CAS和DHL培养基平板进行对比。同时取178份食品样品增菌后接种CAS和DHL平板做比较试验。[结果]沙门菌在CAS平板上呈现特定而典型的紫红色菌落,非沙门菌呈蓝色或无色菌落,食品样品中沙门菌的检出率为3.37%(CAS)和1.69%(DHL)。[结论]采用CAS选择性平板分离沙门菌具有直观易鉴别、减轻工作量和检出率较高等优点,适用于暴发性沙门菌感染引起的食物中毒检测。     

大肠埃希菌中细胞分裂抑制子的潜在调控基因筛选

目的筛选大肠埃希菌中细胞分裂抑制子(Sdi A)的潜在调控基因。方法将大肠埃希菌E. coli SM10λpir野生株、E. coli SM10λpir Sdi A敲除株、E. coli SM10λpir Sdi A过表达回复株分别加入N-酰基-L-高丝氨酸内酯(AHLs)信号分子处理,记为AHLs处理组;对应三种菌株分别加入等量DMSO处理,记为非AHLs处理组。两组菌株基因转录组测序后,通过R语言edgeR软件包筛选差异表达基因。选取两组内E. coli SM10λpir Sdi A敲除株与E. coli SM10λpir野生株之间、E. coli SM10λpir Sdi A过表达回复株与E. coli SM10λpir Sdi A敲除株之间同时出现差异性表达的基因,即为有/无AHLs信号分子时Sdi A的潜在调控基因,并进行组间比对,观察有/无AHLs信号分子时Sdi A潜在调控基因的变化。结果非AHLs处理组中,E. coli SM10λpir Sdi A敲除株与E. coli SM10λpir野生株之间、E. coli SM10λpir Sdi A过表达回复株与E. col...     

NM-BAPTA法钙检测试剂盒的性能评价

目的 对NM-BAPTA法钙检测试剂盒进行性能评价.方法 根据美国临床与实验室协会(CLSI)指南文件EP15-A2、EP9-A2、EP6-A、C28-A2,验证日立7180生化分析仪上NM-BAPTA法钙检测试剂盒的精密度、准确度、线性范围、生物参考区间.结果 高低2个浓度的血钙质控品批内精密度标准差(SD)分别为0.03 mmol/L、0.02 mmol/L,批间精密度标准差分别为0.08 mmol/L、0.06 mmol/L;准确度验证其血钙结果与参比系统cobas 8000血钙结果呈良好的相关性,r2=0.954 8,相对偏差＜12.5％;线性范围验证斜率为0.971,r2=0.999,线性范围为1.00～4.70 mmol/L,线性理想;参考区间验证符合率100％.结论 NM-BAPTA法钙检测试剂盒在日立7180生化分析仪上的分析性能符合质量目标要求,可应用于临床检测.