人β-防御素DEFB113的重组表达及活性鉴定

DEFB113为人β-防御素家族新成员,其生物学功能尚不清楚。为了探索一种可以较低成本和较高产量表达活性DEFB113多肽的方法,将编码DEFB113成熟肽的序列克隆到载体pTWIN1上,并转化至E.coliBL21(DE3)中进行表达。结果表明融合蛋白主要以可溶形式存在;重组载体中融合标签的几丁质结合域(CBD)和内含肽(intein)分别使亲和层析纯化和融合标签自剪切一步完成。最终得到DEFB113多肽的产率为6～7 mg/LLB。经活性鉴定,该重组DEFB113多肽对于S.aureus,E.coli K12D31和C.albicans均表现出较强的抑制作用;另外DEFB113无明显的溶血活性,是一种较理想的多肽抗生素。该研究为进一步研究DEFB113的生理功能以及其它人β-防御素结构与功能奠定了基础。     

重庆市中学生传统欺凌、网络欺凌与自杀相关心理行为关系

目的 了解重庆市中学生欺凌行为及自杀相关心理行为流行现状,探索不同受欺凌行为与自杀的关联性.方法 于2019年11-12月采用分层整群随机抽样方法,在重庆市4个区县抽得8276名初、高中生进行问卷调查.结果 重庆市中学生受欺凌总发生率为9.63％,遭受言语欺凌、躯体欺凌、关系欺凌、性欺凌与网络欺凌的发生率分别为5.10...     

重庆青少年青春期身心健康知信行与生活质量的关系

探讨青春期知信行在青春期阶段影响青少年生活质量过程中的调节作用,为制定改善青少年生活质量的措施提供依据.方法 采用分层整群抽样,抽取重庆市2个区县6 746名中小学生,采用青春期发育量表(PDS)和基本情况调查表、青少年生活质量量表进行调查.结果 青春期早期、中期和后期的青少年生理、心理维度及总生活质量得分低于青春期前青少年(P值均<0.05);青春期中期(B=-1.10)和后期(B=-2.88)的青少年社会维度得分低于青春期前青少年;但青春期阶段对青少年青春期维度生活质量的影响无统计学意义(P>0.05).青春期知信行与青少年心理、社会、青春期维度和总生活质量呈正相关(B值分别为0.02,0.04,0.04,0.09,P值均<0.01),但对生理维度的影响无统计学意义(P=0.06).交互作用分析显示,青春期知信行在青春期阶段对社会维度(B=0.03)和总生活质量(B=0.06)影响过程中起调节作用(P值均<0.05),但对心理维度无调节作用(P>0.05).结论 加强青少年青春期健康教育是提高和改善青少年生活质量的关键.     

重庆沙坪坝中小学生睡眠时间与超重肥胖的相关性分析

目的 探讨中小学生睡眠时间与超重肥胖的关系,为制定干预措施提供依据。方法 利用多阶段整群抽样方法,于2018年12月至2019年1月,对重庆沙坪坝8所中小学,共5306名在校学生,进行睡眠时间与超重肥胖的调查分析。结果 该区中小学生平均睡眠时间为9.21h,不同性别、学段和区域的学生,睡眠时间差异均有统计学意义;学生睡眠时间在<8h,8~8.9h,9~9.9h和≥10h的构成,分别为13.47%,25.63%,29.95%和30.95%,差异有统计学意义。工作日平均入睡时间为21:00,周末节假日为22:00;工作日平均睡眠时间为8.87h小时,周末为10.05h,差异均有统计学意义。中小学生超重与肥胖检出率分别为15.49%和9.18%,超重肥胖检出率随睡眠时间的缩短而升高,差异有统计学意义。调整了性别、学段和区域等因素后,以睡眠时间≥10h作参照,发现周末节假日睡眠不足是肥胖的危险因素,睡眠时间<8h的OR值为1.81（1.09~2.86）,<9h的OR值为1.58（1.12~2.19）。结论 周末节假日睡眠不足是肥胖的危险因素,应重点改善学生周末节假日的睡眠状况,保证充足的睡眠时间。     

留守儿童青春期知信行与心理弹性的关系

探讨重庆市某区留守儿童青春期知信行与心理弹性的关系,为开展留守儿童青春期健康教育提供依据.方法 采用分层整取抽样方法,抽取重庆市某区1 244名四至九年级留守儿童,采用青少年心理韧性量表和自编青春期知信行进行问卷调查.结果 留守女生的心理弹性水平高于留守男生,初中留守儿童高于小学留守儿童(t值分别为4.70,4.27,P值均<0.01).与父母联系频率越高、父母关系越好、家庭经济状况越好、接受民主型教养方式的留守儿童心理弹性的水平越高(F值分别为35.86,31.66,3.25,57.23,P值均<0.05).多重线性回归分析显示,青春期知信行对留守儿童目标专注(B=0.11)、情绪控制(B=0.07)、积极认知(B=0.09)、家庭支持(B=0.05)、人际协助(B=0.09)及总心理弹性(B=0.41)有正向预测作用(P值均<0.01).结论 留守儿童青春期知信行与心理弹性存在正相关,应该重视青春期健康教育.     

青春期同伴教育对青少年心理弹性干预效果分析

  目的  考察青春期同伴教育对儿童青少年心理弹性的干预效果分析,为预防儿童青少年青春期生理和心理问题提供科学依据。  方法  采用非等同比较组设计方法抽取重庆市綦江区2个乡镇,随机分为干预组(732名)和对照组(881名),干预组接受1年同伴教育干预,对照组不采取任何干预措施;利用心理韧性量表及基本信息问卷收集数据。  结果  干预后,对照组目标专注、情绪控制、家庭支持、人际协助和心理弹性总分分别降低了0.96,0.72,0.63,1.16和3.31分(t值分别为5.75,3.91,3.52,5.86,6.29,P值均 < 0.05),干预组情绪控制、人际协助和总心理弹性总分分别提高了1.05,0.54和1.72分(t值分别为-4.89,-2.46,-2.76,P值均 < 0.05);多重线性回归分析结果显示,与对照组相比,干预组的目标专注(B=0.38)、情绪控制(B=0.85)、家庭支持(B=0.29)、人际协助(B=0.83)和总心理弹性(B=2.40)增长更显著(P值均＜0.05)。  结论  基于青春期健康教育的同伴教育对提高青少年的目标专注、情绪控制、家庭支持、人际协助和总心理弹性是有效的。     

色瑞替尼对精子制动作用和质膜损伤的体外研究

 目的  研究前期筛选到的精子功能调节候选化合物色瑞替尼的体外精子制动作用和机制。方法  计算机辅助精液分析(computer assistant sperm analysis, CASA)系统测定色瑞替尼对人和小鼠高活力精子20 s内的制动效果;低渗膨胀(hypo-osmotic swelling, HOS)实验、SYBR-14/PI染色探究精子质膜的完整性;用电镜观察色瑞替尼处理后精子质膜的变化;用色瑞替尼处理VK2/E6E7、End1/E6E7、Ect1/E6E7细胞,CCK-8及荧光染色法检测细胞活性。结果  色瑞替尼对于(5～10)×106/mL人精子的20 s瞬间杀精最小有效浓度(minimal effective concentration, MEC)为(74.87±31.46)μmol/L,而相同条件下测到的杀精药物壬苯醇醚(nonoxynol-9, N-9)的MEC为(219.75±20.89) μmol/L。CASA系统分析表明,色瑞替尼对精子的制动作用有时间-浓度依赖关系。HOS实验及SYBR-14/PI染色法验证色瑞替尼对精子质膜有一定的损伤,并可致精子死亡。电镜显示色瑞替尼处理后的精子质膜破裂,头尾分离较多。色瑞替尼对上皮细胞有一定损伤。结论  色瑞替尼对精子有快速的制动作用,具有潜在的避孕药效。     

昆虫细胞杆状病毒表达系统表达重组人类ZP3蛋白的研究

目的:探讨利用重组表达系统制备重组人类ZP3(h ZP3)蛋白的方法和技术难点,为h ZP3蛋白的制备和应用打下技术基础。方法:构建h ZP3的载体质粒p FASTBAC HTa-h ZP3,在大肠杆菌宿主细胞中利用杆状病毒Bac-to-Bac系统同源重组构建重组的杆状病毒穿梭载体Bacmid,用重组的Bacmid转染Sf9细胞制备重组杆状病毒,分别表达带HIS标签的h ZP3全长蛋白(氨基酸1~424)和截短的h ZP3蛋白(氨基酸23~348)。摸索重组h ZP3蛋白的表达时间和纯化制备方法。结果:成功制备了表达重组人h ZP3全长蛋白和截短体蛋白的Bacmid和杆状病毒颗粒,Western印迹检测表明,在Sf9细胞中较好的表达时间段为感染后72~96 h。重组表达的h ZP3蛋白可以部分被钴柱亲和纯化,大量的重组h ZP3蛋白不能结合到亲和介质而流穿,但确切的原因还未知。纯化得到的h ZP3经荧光素Dylight Dye488标记,能与人精子结合。结论:利用昆虫细胞杆状病毒表达系统表达h ZP3蛋白是可行的,可以进一步优化,但h ZP3蛋白的有效富集和纯化方法是最大的瓶颈,还需要进一步摸索。     

黄桷兰乙醇溶液对小鼠止痒作用的初步研究

目的探讨黄桷兰乙醇溶液是否对蚊痒小鼠有治疗作用。方法选择健康成年昆明小鼠60只,雌雄各半,在其耳后注射磷酸组胺建立瘙痒模型。根据体质量随机分组,每组10只,将不同浓度组(高、中、低)的黄桷兰乙醇溶液和其他处理组的药物涂抹于小鼠耳后,观察并记录用药后30 min之内小鼠的搔抓次数和搔抓潜伏期;断头取血,用ELISA法检测血清中IL-6的浓度;取耳后皮肤制作病理切片观察炎症细胞浸润、增生程度;用SPSS 20.0对数据进行统计学分析。结果低浓度(0.02 g/mL)的黄桷兰乙醇溶液可以明显减少搔抓次数(P0.05),高浓度(0.5 g/mL)的黄桷兰乙醇溶液对炎症细胞的浸润、增生有显著的抑制作用,各组间血清IL-6浓度差异无统计学意义(P0.05)。结论黄桷兰乙醇溶液对小鼠瘙痒有一定的抑制作用,且低剂量溶液止痒效果好,但尚需在以后的研究中扩大样本量进行进一步研究,进而探讨黄桷兰乙醇溶液的作用机制。