小柴胡片抗乙型肝炎病毒的初步实验研究

东汉名医张仲景所创的“小柴胡汤”方剂 ,自古以来就用以治疗肝病。现代医学研究证明小柴胡制剂具有免疫调节、抗炎、抗纤维化及保护肝细胞等作用。临床实践还观察到血清 HBe Ag转换现象 ,提示小柴胡还有抗 HBV的作用 ,学者们认为小柴胡可能是通过诱生干扰素、增加抗体产生、作用于枯否氏细胞等 ,达到抑制 HBV复制的目的。研究已证实小柴胡中的柴胡、甘草、黄芩在体外有抗病毒作用 ,但有关其抗HBV的研究 ,目前报道罕见。为探讨小柴胡的直接抗 HBV作用 ,我们以转染有 HBV全基因组的肝癌细胞系 2 .2 .15细胞为实验模型 (美国西奈山医…     

载体法筛选乙型肝炎病毒S基因小干扰RNA靶位体系的建立

目的 构建4个针对乙型肝炎病毒(HBV)S基因序列的小发央RNA(shRNA)表达载体，作用于增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和HBV S基因融合表达载体，观察shRNA对融合蛋白的抑制作用，筛选出有效靶位。方法 利用pAVU6 27质粒，设计并掏建4个shRNA表达载体，与融合表达载体共转染AD293细胞，荧光显做镜下观察融合蛋白的荧光表达情况并通过流式细胞仪分析shRNA对融合蛋白的抑制作用。同时，逆转录聚合酶链反应法验证其筛选的有效性。结果 成功掏建shRNA表达载体和HBs-EGFP融合表达载体；4组shRNA表达载体均可不同程度抑制融合基因的表达，其中以579位点最有效，荧光表达抑制率为69．8％，RNA水平抑制率为74．6％。结论 筛选出有效抑制HBV S基因的siRNA靶位。     

HBx-siRNA快速筛选体系的建立和应用

目的:建立针对HBx的小干扰RNA(siRNA)快速筛选体系.方法:①构建HBx与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)N端融合表达质粒;②用一步PCR法,制备针对HBx mRNA的RNA多聚酶启动子-siRNA表达框(SEC);③将SEC转染HBx-EGFP瞬时表达的AD293细胞,通过荧光显微镜和流式细胞仪观察分析SEC对HBx-EGFP荧光表达的抑制效果,从而确定有效siRNA.结果:①成功构建HBx-EGFP融合表达质粒pHBx-EGFP,在瞬时表达细胞中,HBx-EGFP绿色荧光主要呈颗粒状,聚集在核膜与核膜外周或细胞浆;②共转染SEC能有效抑制HBx-EGFP的瞬时表达.与siHBx271相比,siHBx388是一高效siRNA位点,并且该位点与tRNAVal和H1启动子搭配更有效.结论:成功建立表达HBx的荧光蛋白报告体系,结合快速制备SEC的方法,可用于进行HBx有效siRNA及其最适搭配启动子的快速筛选.     

ORS治疗小儿急性腹泻480例疗效观察

自1985年10月份以来,我院门诊应用世界卫生组织推荐的口服补液盐(ORS)治疗小儿急性腹泻(包括秋季腹泻)伴脱水,均取得了明显疗效。一般资料 480例患者中,年龄最大14岁,最小一个月;男性296例,女性183例;发病时间最长15天,最短1天。     

乙型肝炎病毒转录后调节元件功能及作用机制

乙型肝炎病毒(HBV)转录体上存在与相应的细胞核蛋白结合的特殊序列,参与转录体稳定性和核浆转运等转录后调节过程。更为重要的是,细胞因子介导非细胞损伤抗HBV的主要作用环节也是在转录后水平。因此,对HBV转录后调节机制的研究不仅能加深对HBV生活周期的认识,而且还将为抗HBV治疗提供新的设计思路。     

乙型肝炎病毒转录后调节元件功能及作用机制

乙型肝炎病毒（HBV）转录体上存在与相应的细胞核蛋白结合的特殊序列，参与转录体稳定性和核浆转运等转录后调节过程。更为重要的是，细胞因子介导非细胞损伤抗HBV的主要作用环节也是在转录后水平。因此，对HBV转录后调节机制的研究不仅能加深对HBV生活周期的认识，而且还将为抗HBV治疗提供新的设计思路。     

RNA干扰技术防治病毒性肝炎的研究

RNA干扰技术作为继反义和核酶之后新的强有力的快速基因阻断技术,迅速在基因功能、抗肿瘤和抗病毒的研究领域中掀起热潮。应用RNA干扰技术进行高效抗HCV和HBV的实验研究,以及体内诱导干扰Fas基因表达对小鼠肝损伤的治疗保护作用,显示了该技术在清除慢性感染状态的肝炎病毒和防治肝炎中具有巨大的应用潜力。     

HER-2基因Ile655Val多态性与结直肠癌易感性分析

目的 探讨HER-2原癌基因Ile655Val多态性与结直肠癌易感性的相关性,及其在自然人群中的分布频率.方法 应用病例对照研究,对浙江省嘉善县292例结直肠癌患者和842名健康对照者采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测HER-2基因密码子655基因型.结果 结直肠癌组HER-2基因Ile/Val+Val/Val基因型频率(25.34%)和Val等位基因频率(13.36%)均显著高于对照组(18.41%和9.74%)(P<0.05).与Ile/lie基因型携带者相比,Ile/Val+Val/Val基因型携带者患结直肠癌的风险增加(OR=1.54,95%CI:1.11～2.14).HER-2基因多态性与吸烟、饮酒的交互作用OR值分别为1.43(95%CI:0.88～2.30)和1.29(95%CI:0.73～2.29).结论 HER-2基因Ile655Val多态性与结直肠癌易感性相关,但是这种多态性与吸烟、饮酒在结直肠癌发生中不存在交互作用.     

HER-2基因Ile655Val多态性与结直肠癌易感性分析

目的 探讨HER-2原癌基因Ile655Val多态性与结直肠癌易感性的相关性,及其在自然人群中的分布频率.方法 应用病例对照研究,对浙江省嘉善县292例结直肠癌患者和842名健康对照者采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测HER-2基因密码子655基因型.结果 结直肠癌组HER-2基因Ile/Val+Val/Val基因型频率(25.34%)和Val等位基因频率(13.36%)均显著高于对照组(18.41%和9.74%)(P<0.05).与Ile/lie基因型携带者相比,Ile/Val+Val/Val基因型携带者患结直肠癌的风险增加(OR=1.54,95%CI:1.11～2.14).HER-2基因多态性与吸烟、饮酒的交互作用OR值分别为1.43(95%CI:0.88～2.30)和1.29(95%CI:0.73～2.29).结论 HER-2基因Ile655Val多态性与结直肠癌易感性相关,但是这种多态性与吸烟、饮酒在结直肠癌发生中不存在交互作用.     

HER-2基因Ile655Val多态性与结直肠癌易感性分析

目的 探讨HER-2原癌基因Ile655Val多态性与结直肠癌易感性的相关性,及其在自然人群中的分布频率.方法 应用病例对照研究,对浙江省嘉善县292例结直肠癌患者和842名健康对照者采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测HER-2基因密码子655基因型.结果 结直肠癌组HER-2基因Ile/Val+Val/Val基因型频率(25.34%)和Val等位基因频率(13.36%)均显著高于对照组(18.41%和9.74%)(P<0.05).与Ile/lie基因型携带者相比,Ile/Val+Val/Val基因型携带者患结直肠癌的风险增加(OR=1.54,95%CI:1.11～2.14).HER-2基因多态性与吸烟、饮酒的交互作用OR值分别为1.43(95%CI:0.88～2.30)和1.29(95%CI:0.73～2.29).结论 HER-2基因Ile655Val多态性与结直肠癌易感性相关,但是这种多态性与吸烟、饮酒在结直肠癌发生中不存在交互作用.