Survivin在膀胱癌组织中的表达及其临床意义

Survivin高表达于绝大多数恶性肿瘤，研究结果显示其通过抗凋亡、调节细胞周期、促进血管形成等途径参与肿瘤的发生和发展。我们通过运用实时定量RT-PCR法检测膀胱癌组织中Sur-vivinmRNA的表达，探讨其与病理分级、临床分期及预后之间的关系。[第一段]     

腺病毒介导的HSV-tk基因治疗人膀胱癌的动物实验研究

目的　探讨带有HSV -tk基因的重组腺病毒 (Ad -tk)结合GCV对人膀胱癌的治疗作用。方法　建立人膀胱癌裸鼠移植瘤模型 2 1只 ,采用肿瘤原位注射Ad -tk结合GCV治疗。结果　 5× 10 8PFU的Ad -tk肿瘤原位注射结合GCV治疗 ,能明显抑制肿瘤生长 ,肿瘤平均重量为 0 .2 1g ,病理检查表明肿瘤组织坏死、出血伴纤维组织增生 ;而 3个对照组Ad -tk/PBS组、PBS/GCV组、PBS组肿瘤平均重量分别为 1.6 0、1.5 2、1.71g。与对照组比较 ,肿瘤生长抑制率分别为 86 .9%、86 .2 %、87.7% ,有显著性差异 (均P <0 .0 1)。结论　Ad -tk/GCV系统对人膀胱癌的敏感性较高 ,疗效显著。     

survivin的siRNA靶向干扰膀胱癌的实验研究

目的实验研究靶向转染survivin的小分子干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）对膀胱癌生物学行为的影响。方法设计1对survivin编码基因序列特异的siRNA，用脂质体转染T24膀胱癌细胞株。采用流式细胞术检测转染效率和细胞凋亡；荧光实时定量PCR检测干扰前后survivin的mRNA表达；用survivin的siRNA片段插入空载体后建立重组载体pRNAT-U6、1／Neo-survivin。结果脂质体转染T24细胞后的转染效率为92．3％；survivin编码基因序列特异的siRNA能有效下调survivin基因的表达，呈时间和剂量依赖性，最大效应浓度为100nmol／L，此时survivin表达水平下调了75．91％，并显著地抑制了细胞生长，抑制率达55．29％，差异有统计学意义（P〈0．01）；细胞凋亡率亦增至45．70％，与对照相比差异有统计学意义（P〈0．01）。用限制性内切酶将空载体线性化，T4DNA连接酶将siRNA片段插入空载体中，对该重组表达载体进行鉴定，获得RNA干扰质粒载体pRNAT-U6．1／Neo-survivin。结论siRNA．survivin能显著下调膀胱癌细胞survivin基因表达水平，促进细胞凋亡，抑制肿瘤细胞增殖，可能成为膀胱癌基因治疗的新工具。成功构建的靶向survivin基因表达的RNA干扰质粒载体为进一步应用RNA干扰技术进行survivin基因功能研究奠定了基础。     

膀胱全切术后尿道癌11例分析

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，但累及尿道并不多见，行膀胱全切术后发生尿道癌的病例更为少见。我院自1985年以来共收治11例，报告如下。     

MNU诱导的大白鼠膀胱肿瘤模型的建立及病理学动态观察

目的观察N-甲基亚硝基脲（MNU）诱发SD大鼠膀胱癌模型的建立及病理学动态过程。方法MNU大鼠膀胱灌注每2周1次，每次2mg，共4次。随机观察实验第3、6、9、12、14周膀胱黏膜的改变，并在9、12和10周膀胱灌注^125I-UdR后行SPECT平面显像。结果膀胱灌注3周出现不典型增生，6周有原位癌改变，9周膀胱内有明显癌性肿块，12～14周膀胱内均出现乳头状癌或浸润性癌，9周的致癌率100．0％，组织学改变及病理学特征与人膀胱癌十分相似。SPECT显像见^125I-UdR膀胱灌注3d后诱癌组大鼠膀胱区放射性浓集。结论MNU灌注诱导大鼠膀胱癌模型为一理想的动物模型。致癌过程经历不典型增生、乳头状瘤形成和癌变动态过程。     

梗阻性肾病中肾小管周围毛细血管损伤的实验研究

目的 观察梗阻性肾病模型中肾小管周围毛细血管(PTC)损伤与肾小管上皮细胞凋亡的关系,并探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)对PTC的调节作用.方法 建立SD大鼠单侧输尿管完全梗阻(CUUO)模型,用免疫组化方法检测PTC的密度和VEGF的表达水平,TUNEL法对PTC和肾小管上皮细胞进行原位凋亡测定,透射电镜观察超微结构变化.结果 第7天VEGF染色局部增强,PTC数量变化不显著,肾小管上皮细胞凋亡很少见.第14～28天,VEGF表达逐渐下降,直至完全消失.PTC数量减少,肾小管扩张或萎缩明显.电镜显示肾小管上皮细胞、PTC内皮细胞死亡的主要形式为凋亡;TUNEL显示肾小管上皮细胞凋亡在第14天达到高峰,然后迅速下降.结论 PTC减少是肾小管上皮细胞内VEGF表达不足引起的,在肾小管上皮细胞凋亡的过程中发挥了重要作用.     

输尿管结石多次体外震波碎石治疗无效的原因分析

目的 探讨输尿管结石多次体外震波碎石治疗无效的原因.方法 输尿管结石经多次震波后无效患者121例,观察其治疗全过程,分析影响疗效的因素.结果 121例经多次震波碎石后只有少量碎石或无碎石排出,经后续泌尿外科腔镜或开放手术治疗,术中发现结石嵌顿息肉包裹89例,结石远端梗阻扭曲23例.结石成分分析显示为硬度较高的草酸钙、磷酸钙76例.结论 多次震波无效的原因有:结石嵌顿息肉、结石较大及较多、远端梗阻、对焦困难、结石密度高等,同时存在2个以上因素者尤其明显,临床上这类患者宜早期采用其他治疗方法.     

前列腺液Gal-3浓度对前列腺癌诊断的临床价值

目的 探讨前列腺液半乳凝素3(Gal-3)浓度对诊断前列腺癌的临床价值.方法 采用人Gal-3抗体免疫组化法对31例中老年男性前列腺穿刺组织进行染色,并按病理诊断分为前列腺癌组(A组,12例)和前列腺增生组(B组,19例).应用多克隆抗体ELISA法检测前列腺液Gal-3浓度,分析两组Gal-3的表达差异.结果 A组前列腺液Gal-3浓度3703.3 μg/ml,高于B组的1028.4μ.g/ml(P＜0.01);A组前列腺组织Gal-3表达量亦大于B组(P＜0.01).4例前列腺癌患者合并转移性骨损害;其前列腺液Gal-3浓度高于8例非转移前列腺癌患者[(5265.6±345.2) μg/ml vs.(2292.1±1325.4) μg/ml](P＜0.05).取前列腺液Gal-3浓度为4167 μg/ml时,其诊断前列腺癌的敏感度为100％,特异度为80％.结论 前列腺液Gal-3检测可用于前列腺癌的诊断和是否发生骨转移的评估.     

髂内动脉钙化对肾移植受者移植物功能延迟恢复和近期预后的影响

目的  分析髂内动脉钙化与肾移植受者移植物功能延迟恢复（DGF）及近期预后的相关性。方法  回顾性分析222例肾移植受者的临床资料。依据肾功能恢复情况分为DGF组（50例）和移植物功能正常恢复（IGF）组（172例）,根据是否合并髂内动脉重度钙化将DGF组和IGF组分为DGF高危组（22例）、DGF低危组（28例）、IGF高危组（41例）以及IGF低危组（131例）。比较两组供受者临床资料,总结肾移植术后DGF及髂内动脉钙化发生情况,分析肾移植术后发生DGF的危险因素、髂内动脉钙化与临床指标的相关性以及DGF合并髂内动脉重度钙化受者近期预后。结果  本研究中DGF发生率为22.5%（50/222）。肾移植受者中28.4%（63/222）合并髂内动脉重度钙化,DGF组中44%（22/50）合并髂内动脉重度钙化,高于IGF组中的23.8%（41/172）（P < 0.05）。单因素分析结果显示供者终末血清肌酐（Scr）高、男性供者,受者甘油三酯水平高和髂内动脉重度钙化是肾移植术后发生DGF的危险因素（均为P < 0.05）。多因素logistic回归分析显示供者Scr≥143 μmol/L及受者髂内动脉重度钙化是肾移植术后发生DGF的独立危险因素（均为P < 0.05）。相关性分析结果显示髂内动脉钙化与受者年龄和肾动脉吻合方式均呈弱相关（均为P < 0.05）。DGF组受者术后1个月的Scr高于IGF组,估算肾小球滤过率（eGFR）低于IGF组（均为P < 0.05）;DGF高危组受者术后12个月的eGFR低于DGF低危组、IGF高危组以及IGF低危组（均为P < 0.05）。结论  髂内动脉钙化不仅是影响移植肾功能恢复的危险因素,也对移植肾功能的近期预后造成不良影响。     

Survivin及其异构体survivin-2B和survivin-△Ex3在膀胱癌中的表达及临床意义

背景与目的：研究发现survivin基因参与了包括膀胱癌在内的人类多种肿瘤的发生。近期研究表明smwivin的异构体同样具有独特的亚分子定位和功能。本研究通过检测survivin及其异构体smwivin-2B和survivin-△Ex3 mRNA在膀胱癌组织中的表达,探讨这两个异构体潜存的临床意义。方法：选取手术切除的原发膀胱移行细胞癌（bladder transitional cell carcinoma,BTCC）新鲜标本60例,膀胱良性疾病患者病变膀胱组织标本12例作为对照。应用实时定量PCR方法检测survivin、survivin-2B和survivin-△Ex3 mRNA的表达量,分析其表达与不同病理分级和临床分期膀胱癌的关系。结果：Survivin、Survivin-2B和sunivin—△Ex3 mRNA在BTCC组织中均存在表达,表达量分别为0．333±0．163、0．056±0．017、0．124±0．096;对照组12例均表达survivin-2B mRNA,其中分别有3例千兀4例标本存在suwivin和survivin—△Ex3 mRNA的微量表达。survivin和survivin-△Ex3 mRNA的表达与病理分级和临床分期呈正相关（0〈r＇s〈1,P〈0．05）,survivin-2B呈负相关（-1〈r＇s〈0,P〈0．05）。3例复发患者原膀胱肿瘤组织中survivin mRNA的表达较相同病理级别者明显高,而survivin-2B却低。结论：检测survivin及其异构体survivin-2B和survivin-△Ex3 mRNA在BTCC组织中的表达,对判断膀胱肿瘤的恶性程度以及术后复发具有潜在的临床应用价值。