基于PI3K/AKT信号通路探讨琥珀散对子宫内膜异位症小鼠的影响及作用机制研究

目的 探讨琥珀散干预磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidy linositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路对子宫内膜异位症发生发展的影响及机制。方法 选用BALB/c小鼠,随机分为正常组、疾病模型组、琥珀散组、西药组,每组10只。造模后琥珀散组按成人临床用药量等效量的2倍给予14.3 g/kg灌胃,连续给药4周;西药组将LY294002溶于二甲基亚砜后腹腔注射,以0.04 g/kg进行计算,每周腹腔注射一次,给药4周;正常组、疾病模型组给予相同体积的生理盐水灌胃,连续给药4周。给药结束后,采用ELISA法检测各组小鼠血清内TP53、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶B1(serine/threonine protein kinase 1,AKT1)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)和丝裂原激活蛋白激酶3(mitogen-activated protein kinase 3,MAPK3)的含量,采用免疫组化法检测各组小鼠内膜组织中PI3K、AKT的表达。结果 ...     

王克穷教授参合腹诊应用大陷胸汤临证经验

《伤寒论》乃经方之祖,而其中关于腹诊论述的条文达1/4以上,是临床选方用药的重要依据,临床实践中对于经方的使用,更应该注重腹诊。大陷胸汤出自《伤寒论》,乃峻下之剂,然今之医者,恐其太过峻猛,鲜有人使用此方,近年来相关报道也较少,但若处方用药恰当,则可取得事半功倍的效果,为指导经方临床应用开阔了思路。     

基于队列研究及双层频权剪叉算法的乙肝肝硬化/肝细胞癌肝郁脾虚证特征证候和客观指标相关性研究

目的 探索乙肝肝硬化代偿期、失代偿期及肝细胞癌患者肝郁脾虚证的特征证候和客观指标相关性,为临床相关辨证论治提供参考。方法 选取2013年1月-2020年12月来自不同地区医院的乙肝肝硬化/肝细胞癌患者1263例,采用双层频权剪叉算法构建乙肝肝硬化/肝细胞癌肝郁脾虚证辨证标准,在此基础上以肝郁脾虚证为因变量,采用Logistic回归分析计算特征证候及相关实验室指标。结果 饮酒史患者更偏向肝郁脾虚证(P<0.05);乙肝肝硬化代偿期、失代偿期及肝细胞癌肝郁脾虚证共有特征证候为烦躁易怒、脘闷善太息、口干,疾病后期脾虚证愈发明显。乙肝肝硬化不同阶段丙氨酸氨基转移酶、血红蛋白、红细胞、活化部分凝血活酶时间、D-二聚体等生化指标差异无统计学意义(P>0.05),但有进展为肝细胞癌的可能;代偿期患者甲胎蛋白水平升高(P<0.05),进展为肝细胞癌的概率增大。结论 将队列研究、双层频权剪叉算法运用到乙肝肝硬化/肝细胞癌中医辨证中,可提高辨证准确率、指导用药及积极判断预后。     

琥珀散对人MenSCs植入式子宫内膜异位症裸鼠异位病灶及Beclin1、ZEB1表达的影响

目的 探究琥珀散对人经血源间充质干细胞(MenSCs)植入式子宫内膜异位症(EMT)裸鼠的异位病灶及 Bcl-2 同源结构域蛋白抗体(Beclin1)、锌指E盒同源结合蛋白1(ZEB1)表达的影响。方法 将裸鼠随机分为对照组、模型组、地诺孕素(0.001 g·kg^-1)组和琥珀散(29 g·kg^-1)组,每组 10 只。从 EMT 患者及健康女性的月经血中提取 MenSCs,并借助成脂、成骨诱导分化鉴定其干细胞属性。将EMT MenSCs注射至裸鼠腹部皮下,制备EMT裸鼠模型,对照组植入正常人MenSCs。至第7天每组随机抽取1只裸鼠,开腹观察异位病灶生长情况,并借助HE染色和人类白细胞抗原A(HLAA)免疫荧光法评价模型。自造模成功连续给药21 d,末次给药后第2日取材,观测EMT异位病灶体积及血管分布;切取异位病灶组织,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting、免疫组织化学及免疫荧光技术分别测定组织中Beclin1与ZEB1在mRNA及蛋白水平的表达。结果 EMT源及正常MenSCs为长梭形,呈辐射状向周边集落扩散,且经成脂、成骨诱导分化后均有脂滴、钙结节形成。造模7 d后,对照组未见异位病灶形成,其余各组均有囊泡样病灶形成,且周围血管形成丰富,病理切片均可见子宫内膜腺体和间质,HLAA 均阳性表达。与模型组比较,琥珀散能显著缩小EMT裸鼠异位病灶体积(P<0.001),改善周围血管分布。在 mRNA水平, 与模型组比较,地诺孕素组和琥珀散组ZEB1表达显著降低(P<0.001),Beclin1 表达显著升高(P<0.001)。在蛋白水平,与模型组比较,Western blotting结果显示,地诺孕素组和琥珀散组ZEB1 表达显著降低 (P<0.05),Beclin1表达显著升高(P<0.01、0.001);免疫组化结果显示,琥珀散组 Beclin1 大量分布在异位内膜、腺腔以及腺上皮细胞与间质细胞的胞核及胞浆中,Beclin1 表达显著增加(P<0.01);免疫荧光结果显示,琥珀散组 ZEB1 蛋白在异位内膜、腺腔、腺上皮细胞及周围间质细胞的胞核与胞浆中的分布均明显减少,地诺孕素组、琥珀散组 ZEB1 蛋白表达阳性率显著降低(P<0.001)。结论 琥珀散可能通过上调 Beclin1、下调 ZEB1 表达,缩小 EMT 裸鼠异位病灶,改善周围血管分布。     

健脑丸对大鼠的重复给药毒性试验研究

目的：考察健脑丸重复给药对大鼠的毒性反应及恢复情况,评价药物安全性,为临床用药提供依据。方法：30只大鼠随机分为给药组和空白对照组,每组15只,雌雄各半,给药组每日以健脑丸临床剂量的50倍（2 mL/100 g,1.875 g·kg-1）灌胃1次,对照组每日以蒸馏水（2 mL/100g）灌胃1次,每周6天,连续26周。停药后每组处死2/3大鼠,分别观察各项指标及基本情况;剩余大鼠继续喂养4周后取材,并观察停药后动物各项指标及基本情况。结果：连续给药26周以及停药恢复4周各组大鼠的外观、行为活动等一般生命体征状况良好,极少数检测指标有统计学上的差异;两组病理检测个别大鼠个别脏器有轻微病变,但各组之间无明显差异,以上变化可能均为大鼠的自发病变,与药物无关。结论：健脑丸以相当于临床剂量的50倍对SD大鼠灌胃给药26周及停药恢复4周,均未出现明显的毒性反应,故该药物重复给药安全性良好。     

从腹证与本源剂量谈柴胡加龙骨牡蛎汤的临床运用

《伤寒论》被誉为"方书之祖",其中有关腹证的论述达110余条,是现代医家遣方用药的重要参考依据。柴胡加龙骨牡蛎汤出自《伤寒论》,参考日本汉方医家所著文献以及现代文献总结出其腹证为:胸胁苦满,脐上动悸。根据本源剂量的文献研究结合《伤寒论》原文换算出柴胡加龙骨牡蛎汤中各药物的本源剂量为:柴胡60 g,生龙骨25 g,黄芩25 g,人参25 g,桂枝25 g,茯苓25 g,生半夏32 g,大黄30 g(后下),大枣15 g,生牡蛎25 g,生姜25 g。临床常用于治疗心脑系统疾病,如卒中后抑郁、睡眠障碍、精神障碍等。临证结合腹证与本源剂量使用柴胡加龙骨牡蛎汤,可增加辨证的准确性,提高临床疗效。     

血样低温放置时间对黏多糖贮积症酶学检测的影响

目的探讨4 ℃条件下血样放置时间对黏多糖贮积症(MPS)酶学检测的影响。 方法选择2020年1月5日至9日，采集自5例健康志愿者(男性为2例，女性为3例，年龄为24~30岁)的血样各6管为研究对象。将其依次命名为血样1、2、3、4、5(研究组)。将采集的5×6管血样，置于4 ℃条件保存，于不同放置时间点(0、24、48、72、96、120 h)对其进行MPS酶学检测。同时收集本院医学遗传科20例健康受试者进行外周血细胞染色体检查后的剩余血样，将其混合与研究组同批次检测作为MPS酶活性正常值(对照组)。①观察研究组血样放置不同时间点，血浆颜色变化，并进行血浆游离血红蛋白(f-Hb)检测，评估血样溶血情况。②进行白细胞分离，并检测放置不同时间点白细胞中α-硫酸艾杜糖醛酸酶(IDUA)、α-N-乙酰葡萄糖胺酶(NAGLU)和β-葡萄糖醛酸酶(GUSB)活性水平，比较各种酶活性水平在不同检测时间点的差异。所有受试者均签署临床研究知情同意书，本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院伦理委员会制定的伦理学批准，并得到该委员会批准(审批文号：20180094)。 结果①血样在放置72 h时血浆颜色开始逐渐变红，放置时间越长，变红的程度越深；血浆f-Hb水平提示放置72 h呈增高趋势，并且随着放置时间延长，溶血程度也越来越严重。②血样1~5放置24、48、72、96、120 h时，IDUA、NAGLU活性水平分别与自身未放置血样比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。③血样1~5在放置24、48、72、96 h的GUSB活性水平分别与未放置血样比较，差异亦均无统计学意义(P>0.05)；但是，放置120 h时GUSB活性水平明显低于未放置血样，2组比较，差异有统计学意义(t＝4.601、P＝0.002)。 结论综合溶血情况和酶活性水平等多种因素，建议进行MPS酶学检测的外周血血样于采集后72 h(3 d)内送达检测实验室，72~120 h(3~5 d)送达实验室的血样，需取决于血样自身质量和待检测溶酶体酶类型，于120 h(5 d)时送达的检测失败可能性极大。     

从瘀论治慢性盆腔炎

慢性盆腔炎病机复杂,其核心在于瘀血阻滞。通过阐述血瘀与慢性盆腔炎的关系,认为慢性盆腔炎的病因病机和治疗用药可以从气滞血瘀、湿热瘀滞、气虚血瘀等几个方面展开分析。     

逍遥散合桃红四物汤加减对气滞血瘀型子宫肌瘤患者血清性激素水平的影响

目的：探究逍遥散合桃红四物汤加减对气滞血瘀型子宫肌瘤患者血清性激素水平的影响。方法：选取新密市中医院妇产科101例气滞血瘀型子宫肌瘤患者为研究对象，随机数字表法分为两组，对照组50例给予米非司酮治疗，研究组51例在对照组基础上给予逍遥散合桃红四物汤加减口服治疗，观察两组患者临床疗效、肌瘤体积及血清性激素水平。结果：研究组总有效率高于对照组；研究组黄体生成素(LH)、孕酮(P)、促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E₂)水平均低于对照组(P<0.05)。结论：逍遥散合桃红四物汤加减能够气滞血瘀型子宫肌瘤患者治疗效果，降低血清性激素水平。