辐射对巨噬细胞系RAW264.7基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的观察不同剂量γ-射线(0、5、10、20 Gy)照射小鼠巨噬细胞系RAW264.7后对基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响。方法应用不同剂量γ-射线(0、5、10、20 Gy)照射体外培养的巨噬细胞系RAW264.7,照射6、12、24、48 h后,实时荧光定量聚合酶链反应法(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测MMP-9 mRNA表达,选择MMP-9 mRNA表达最强的照射剂量;在照射细胞6、12、24、48 h后采用免疫印迹法(Westernblotting)检测MMP-9蛋白表达,并于照射前1 h加入地塞米松1μmol,检测MMP-9蛋白表达。结果60Coγ-射线(5、10、20 Gy)照射RAW264.7细胞系6、12、24、48 h后MMP-9 mRNA表达均明显增强(P<0.05),24 h达高峰,10 Gy增强最明显。与对照组相比,10 Gy照射细胞6、24、48 h后MMP-9蛋白表达明显增强(P<0.05),以24 h最明显(P<0.01);照射前1 h加入1μmol的地塞米松,10 Gy照射24 h后检测MMP-9蛋白表达,与未加地塞米松组相比,MMP-9蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。结论γ-射线照射巨噬细胞系RAW264.7,可显著增强MMP-9 mRNA及其蛋白表达;地塞米松可有效抑制电离辐射诱导的MMP-9蛋白表达,MMP-9可能参与了放射性肺损伤的发展。     

UBE2D3基因过表达对食管癌细胞迁移增殖及顺铂敏感性的影响

目的 构建过表达人泛素交联酶UBE2D3基因的稳定转染食管癌EC109细胞株,并观察过表达后迁移增殖能力及对顺铂化疗敏感性的改变.方法 食管癌EC109细胞株分别转染pEGFP-C1和pEGFP-UBE2D3质粒后,分为阴性对照组(NC组)和过表达组(OE组),并用G418进行筛选构建稳定转染细胞株.通过实时定量PCR(RT-PCR)法及Western blotting验证过表达效率,用划痕试验检测迁移能力,并用CCK-8法检测细胞增殖,半抑制浓度(IC50)法评价对顺铂的敏感性.结果 相对于亲本细胞,NC组UBE2D3 mRNA表达量为1.010±0.590,OE组为2.026±0.898;NC组UBE2D3蛋白表达量为0.923 ±0.237,OE组为1.520±0.487;NC组UBE2D3 mRNA及蛋白表达水平与空白对照组亲本细胞EC109相近(t=1.005,P＞0.05;t=1.492,P＞0.05),OE组较亲本细胞组表达高(t=6.682,P＜0.05;t=9.150,P＜0.05).在12 h NC组的迁移距离为(0.161±0.062) mm,OE组为(0.052±0.007) mm(=4.370,P＜0.05);在24 h NC组的迁移距离为(0.309 ±0.071) mm,OE组为(0.074 ±0.012) mm(=3.644,P＜0.05);在12 h和24 h时OE组相对于NC组的迁移率分别为0.236±0.051和0.241±0.037,OE组迁移能力明显较NC组降低;在第1天时OE组相对于NC组的增殖率为0.713±0.220(t=13.466,P＜0.05),第2天为0.848±0.241(t =27.241,P＜0.05),第3天为0.742 ±0.233(t=15.107,P＜0.05).使用顺铂处理后,在第1天时OE组的IC50值相对于NC组为0.356±0.154(t =4.326,P＜0.05),第2天为0.445±0.098(t =5.870,P＜0.05),第3天为0.481±0.096(=5.009,P＜0.05),OE组IC50值明显低于NC组;给予5μg/ml顺铂处理后,在第1、2、3天时OE和NC组相对于未使用顺铂处理时的增殖效率均减慢,其中OE组相对于NC组的增殖率分别为0.606±0.283(t=8.872,P＜0.05)、0.759±0.089(t=16.771,P＜0.05)和0.569±0.574(t =7.885,P＜0.05),然而在第1、2、3天时OE组的存活率相对于NC组分别为0.831 ±0.323(t=24.226,P＜0.05)、0.875±0.102(t=33.541,P＜0.05)和0.853±0.359(t=28.187,P＜0.05),顺铂对OE组抑制效率较NC组增加.结论 食管癌细胞EC109中过表达UBE2D3基因,能够抑制其迁移、增殖,增强其对顺铂的敏感性.     

儿童肝未分化胚胎性肉瘤临床特点及诊疗分析

目的:探讨儿童肝未分化胚胎性肉瘤(undifferentiated embryonal sarcoma of liver,UESL)的临床特点和治疗经验,并综述国内外研究进展,旨在提高对这一罕见且易误诊肝恶性肿瘤的诊疗水平.方法:回顾性分析2017年1月至2020年6月收治的UESL患儿的发病年龄、肿瘤大小及分期、有无...     

吸烟饮酒作为低发区鼻咽癌致病因素的分析

目的研究我国鼻咽癌低发地区吸烟、饮酒与鼻咽癌致病的关系。方法使用标准化的调查表收集2005年1月～2008年10月湖北省内的245例鼻咽癌及245名与之性别、年龄（±5岁）配对的健康人群的相关信息,并比较他们的吸烟及饮酒习惯。结果本研究发现吸烟可增加鼻咽癌的致病危险性（OR调整=2.22;95%CI：1.42～3.49）。吸烟累积量与鼻咽癌致病危险性有剂量效应关系。吸烟累积量（每天吸烟的支数×烟龄）为300～600支的人患病的危险性是300支以下的人的7.19倍（OR调整=7.19;95%CI：3.02～17.11）,而当吸烟累积量达600支以上,患病危险性则提高到11.89倍（OR调整=11.89;95%CI：4.14～34.13）。重度饮酒能够导致鼻咽癌致病危险性提高,且结果有统计学意义。结论吸烟是鼻咽癌致病的危险因素,吸烟的累积量与鼻咽癌致病风险有剂量效应关系;重度饮酒可导致鼻咽癌发病危险性提高。     

p53介导的铁死亡在调控人结直肠癌顺铂耐药中的作用及机制

目的：探究p53介导的铁死亡在调控人结直肠癌顺铂耐药中的作用及机制。方法：采用人结肠腺癌细胞株LOVO反复短期暴露于顺铂并逐渐增加顺铂浓度的方法建立耐顺铂细胞株LOVO/DDP。顺铂单独及联合铁死亡激活剂erastin/铁死亡抑制剂liproxstatin-1处理LOVO和LOVO/DDP细胞。CCK-8法测定不同处理组的细胞活力，计算顺铂的IC50值；RT-qPCR检测铁死亡相关基因的mRNA表达水平；采用活性氧（reactive oxygen species,ROS）绿色荧光探针2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯（2’,7’-dichlorodihydrofluorescein diacetate, DCFH-DA）、线粒体红色荧光探针MitoTracker Red CMXRos及线粒体JC-1检测试剂盒测定不同处理组中细胞内ROS和线粒体功能；采用亚铁离子荧光探针FerrOrange检测细胞内亚铁离子含量；Western blot检测不同处理组中溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11, SLC7A11)重组蛋白、谷胱甘肽过氧化物...