RNA干扰技术及其在胰腺癌研究中的应用

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指一些小的双链RNA(double stranded RNA,dsRNA)通过特异性降解与其同源的RNA而高效地阻断体内特定基因表达的现象.到目前为止,RNAi现象已经被发现广泛存在于植物、线虫、果蝇、哺乳动物等多种生物体细胞中,使这些生物能够抵御病毒的感染、阻断转座子的作用等.     

应用表达载体介导siRNA抑制胰腺癌skp2基因表达的研究

目的探讨表达载体介导小干扰RNA(siRNA)对人胰腺癌细胞系Capan-2skp2基因表达的抑制作用。方法构建靶向SKP2的siRNA质粒表达载体,采用LipofectamineTM2000转染Capan-2细胞,实时定量PCR和Western blot观察Capan-2细胞转染后SKP2mRNA和蛋白表达的改变。结果PCR和DNA测序证实SKP2siRNA表达载体构建成功,分别转染Capan-2细胞后,skp2基因的mRNA和蛋白表达量与对照组相比均明显下降(P<0.05)。结论所构建的靶向SKP2的siRNA质粒表达载体可以有效地阻断Capan-2细胞SKP2的mRNA和蛋白表达,为下一步以SKP2为靶点的胰腺癌的基因治疗实验研究奠定基础。     

携带SKP2基因的shRNA表达质粒的构建与鉴定

目的:构建含人SKP2基因不同位点的一系列shRNA真核表达质粒，并进行酶切鉴定、测序。方法:设计合成3对SKP2基因干扰寡核苷酸序列，形成双链后将其依次连入带有U6启动子的pSIREN-RetroQ载体，构建成能产生SKP2短发卡RNA的质粒。结果:构建的核苷酸序列经鉴定构建成功，能成功的克隆入带有pSIKEN RetroQ的载体中。结论:成功构建并鉴定了针对人SKP2基因3个不同位点的shRNA的真核表达质粒，为SKP2为靶点的肿瘤基因治疗研究奠定了基础。     

RNA干扰技术及其在胰腺癌研究中的应用

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是指一些小的双链RNA（double stranded RNA，dsRNA）通过特异性降解与其同源的RNA而高效地阻断体内特定基因表达的现象。到目前为止，RNAi现象已经被发现广泛存在于植物、线虫、果蝇、哺乳动物等多种生物体细胞中，使这些生物能够抵御病毒的感染、阻断转座子的作用等。由于RNAi能特异性地抑制某一基因的表达，目前已经广泛应用于抗肿瘤、抗病毒等的治疗研究以及一些基础研究领域。现主要就近年来RNAi技术在胰腺癌研究中的应用进行综述。     

TNF-α增强树突状细胞诱导的抗胰腺癌免疫应答的实验研究

目的探讨体外扩增树突状细胞（DC）的方法，体外研究DC介导的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）对小鼠胰腺癌的特异性杀伤作用。方法联合应用重组鼠源性粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）和IL-4体外诱导骨髓源性DC，与肿瘤细胞溶解物共培养制备DC疫苗；观察DC在负载抗原后体外诱导的主动特异性CTL对胰腺癌细胞的杀伤作用。结果用GM—CSF和IL-4成功地在体外扩增了骨髓源性DC。TNF—α可诱导骨髓源性DC成熟，使其表达的CD54、主要组织相溶性复合物-Ⅱ、CD86等表面分子明显升高，并增强自分泌IL-12和抗原的递呈能力，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0.05）。未负载肿瘤细胞抗原的DC所冲击的T淋巴细胞不能有效地识别特定的靶细胞并产生杀伤作用，DC通过捕获并递呈坏死肿瘤细胞抗原才能诱发显著的主动特异性CTL，体外对胰腺癌细胞的杀伤效果非常显著（P〈0.01）。结论TNF—α可诱导DC的成熟，使DC的抗原递呈和自分泌IL-12的能力显著提高，DC递呈抗原后能诱发显著的主动特异性CTL。     

HER-3在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究乳腺癌组织中人类表皮生长因子受体-3(HER-3)的表达,并分析其表达与乳腺癌临床病理及预后的关系。方法收集2006年1～10月期间大连医科大学附属第二医院行手术、术前未经放化疗、术后行内分泌治疗且资料完整的女性乳腺癌患者139例。采用免疫组织化学法检测乳腺癌组织中HER-3的表达,并从病历资料中获得组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移、联系方式等资料,分析HER-3表达与乳腺癌患者的临床病理特征及预后的关系。结果①HER-3在乳腺癌组织中的表达阳性率为30.2%(42/139);②HER-3表达与患者年龄无关(r=0.030,P=0.721);③HER-3表达与肿瘤的大小(r=0.176,P=0.038)、淋巴结转移(r=0.205,P=0.016)及组织学分级(r=0.197,P=0.020)呈正相关,与5年生存率呈负相关(r=-0.254,P=0.003)。结论 HER-3的检测对乳腺癌的早诊断、早治疗、用药、预后有指导意义,并有可能指导新抗肿瘤药物的研发方向。     

膝关节骨性关节炎的康复治疗

膝关节骨性关节炎（osteoarthritis，OA）是一种中老年常见的慢性进行性骨关节疾病，其病理特点是膝关节骨及软骨的退行性变和继发性骨质增生。病因尚不清楚，目前除对症康复治疗外，尚缺乏有效的治疗来阻止软骨破坏的病理过程。因此，膝关节骨性关节炎的康复治疗就显的至关重要。     

亚健康状态及其预防保健

随着经济的发展，生活节奏的加快和社会压力的增大，越来越多的人处于亚健康状态。据中国国际亚健康学术成果研讨会公布的数据显示，目前中国人70％属于亚健康人群，而其中的70％左右都是知识分子。     

基层军官高脂血症的现状调查与预防指导

基层军官由于工作环境艰苦、压力大及不良饮食习惯等因素影响,高脂血症发病率有增高趋势。只有通过提高基层军官的自我保健意识,帮助其建立良好的生活习惯,提倡科学合理的膳食结构,适当的体育运动等有效的防治措施才能降低高脂血症的发病率。     

腔内激光治疗下肢静脉曲张218例临床分析

目的 探讨腔内激光治疗下肢静脉曲张的疗效.方法 回顾性分析2003年7月至2006年7月采用腔内激光治疗联合大隐静脉高位结扎术治疗218例(266条患肢)大隐静脉曲张患者的临床资料,并对手术前后的临床资料进行分析.结果 手术切口全部一期愈合,下肢静脉曲张程度明显减轻.所有病例均得到随访,随访时间为6～18个月.全部病例患肢胀痛症状明显缓解或消失,皮肤色素沉着明显好转.合并肢体溃疡患者于术后2～6个月溃疡基本愈合.1例静脉曲张消除不完全.无下肢深静脉血栓形成发生.结论 腔内激光治疗下肢静脉曲张损伤小,术后恢复快,近期疗效满意.