市售大豆油中“地沟油”调查

目的:了解市售食用植物油是否掺入"地沟油"。方法:应用国标法对省内市场销售的68个大豆油的酸价、过氧化值、羰基价、冷冻试验、苯并芘和胆固醇等项目进行检测。结果:3个预包装样品酸价不符合GB 1535《大豆油》相应等级指标要求。4个散装样品酸价检出值较高,均超过1.0 mg/g。过氧化值在0.9 mmol/kg～4.1 mmol/kg范围间,羰基价检测值在1 meq/kg～13 meq/kg之间,8个一级大豆油冷冻试验结果为"澄清、透明",均符合GB 1535要求。25个预包装样品和有产品等级标识的17个散装样品苯并芘检测结果在1μg/kg～7μg/kg之间,符合GB 2716限量要求。胆固醇均未检出。结论:抽查的68个大豆油样品大部分检测值符合相关标准要求,但有部分样品检测值超标或检测值较高,尤其是散装样品和无企业标识样品需要进一步关注。     

不同生姜提取物对小鼠精子畸形的影响

生姜为姜科植物姜的新鲜根茎,多年生草本宿根植物,属于药食两用的生物资源.生姜所含的成分复杂,目前已经发现的就有100多种,其中有姜精油、姜辣素、黄酮和姜酚等,还含有氨基酸、维生素及铁、铜、锰、锌、铬、镍、钴和锗等多种微量元素[1].     

以冷水溶性凝胶为载体的细菌快速检测纸片的凝胶剂优化

目的对几种常用的冷水溶性凝胶剂进行筛选及优化,得到一种适合作为快速检测纸片载体的凝胶剂混合物。方法对黄原胶、卡拉胶、瓜尔胶、聚丙烯酸钠、羟丙基甲基纤维素的凝胶性质进行筛选。选取两种适宜的凝胶进行粒径、比例的优化,确定纸片的大小,对细菌在凝胶剂载体和琼脂平板上的生长效果进行对比。结果黄原胶和聚丙烯酸钠的粒径均为0.125mm,比例为1∶5时凝胶剂具有最佳的检测效果。凝胶剂用量为0.18g,纸片的大小应为7.5cm×8cm。结论该凝胶剂混合物可以用于细菌快速检测纸片的制作。     

产气荚膜梭菌选择性显色培养基的研制

目的通过筛选各种选择性成分添加至培养基中以快速筛选产气荚膜梭菌,研制产气荚膜梭菌选择性显色培养基。方法通过单因素试验评价促生长因子甘露醇、丙酮酸钠、硫酸镁对目标菌生长的促进作用,比较抗生素环丝氨酸、新霉素、多粘菌素和磺胺嘧啶对目标菌和非目标菌的抑制作用,比较显色剂5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸二钠盐(BCIP)、对硝基苯磷酸二钠(PNPP)、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷(X-Gal)、4-甲基伞形酮酰-β-D-吡喃糖苷(Mu-Gal)、邻硝基苯β-D-半乳吡喃糖苷(ONPG)对目标菌的显色效果,将酶促因子硫酸镁、硫酸钙、硫酸锰、硫酸锌与目标菌反应筛选最佳成分并确定其用量,制成产气荚膜梭菌选择性显色培养基。结果筛选出的培养基最佳成分促生长因子为丙酮酸钠,用量200mg,抗生素环丝氨酸0.5mg,显色剂为BCIP和Mu-Gal,用量均为6mg,酶促因子硫酸镁72mg,以上成分加入到100ml营养肉汤基础培养基中,制备的选择性培养基培养效果与TSC培养基、SPS培养基无差异。结论本实验所研制的选择性培养基可以用于产气荚膜梭菌的检测。     

出血性大肠杆菌O157主要毒力因子单克隆抗体的制备

目的利用两种抗原制备针对出血性大肠杆菌EHECO157主要毒力因子的特异性单克隆抗体。方法分别用纯化融合蛋白Eae-Stx1/2B和EHECO157Δler/stx(pBR322::stx1/2B::eae)全菌免疫BALB/C小鼠,通过细胞融合和EHECO157标准株EDL933间接ELISA筛选稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株,纯化抗体并鉴定。结果纯化融合蛋白免疫获得了2株单抗2H9和3B4,EHECO157Δler/stx(pBR322::stx1/2B::eae)免疫获得了1株单抗4H7。2H9、3B4和4H7亚类鉴定分别为lgG2b、lgM和lgM;纯化腹水ELISA效价分别为1∶1.28×105、1∶3.2×104、1∶6.4×104,亲和力常数分别为2.9×106、1.4×106、2.6×105。结论3株单克隆抗体均具有较高特异性,2H9效价和亲和力最高,可作为产志贺毒素EHECO157的检测抗体。     

多重荧光定量PCR检测沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌

目的基于SYBR Green I染料建立沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌的多重荧光定量PCR检测方法。方法针对沙门菌invA基因、志贺菌ipaH基因和virA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因和femA基因片段设计引物,根据Tm值的差异分析确定荧光定量PCR扩增的靶基因和特异性引物,通过优化PCR反应体系,建立了用SYBR GreenⅠ多重荧光定量PCR熔解曲线来检测多种致病菌的方法。结果该方法检测的菌液灵敏度分别是沙门菌168 CFU/ml,志贺菌136CFU/ml,金黄色葡萄球菌1240CFU/ml,特异性强,整个过程只需要2h。结论该方法能快速、灵敏、特异检出沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌。