尿路致病性大肠杆菌溶血素A基因的序列分析

目的分离尿路致病性大肠杆菌(UPEC)临床流行株,并进行序列分析。了解其基因变异情况。方法自临床尿路感染标本中分离溶血性大肠杆菌10株。按GenBank中的溶血素A(hlya)基因保守序列设计合成引物。以获得的UPEC基因组DNA为模板,用PCR方法扩增其hlya基因片段。对扩增的片段测序并进行同源性分析。结果扩增的hlya目的基因大小744bp。经PCR鉴定表明获得正确的片段。测序结果显示,10个分离株DNA序列同源性高于99.7%,其与GenBank中的hlya基因序列的同源性为99%以上。10个序列中共发生13处碱基的替代,但均属于同义突变,没有碱基的插入与缺失。结论UPEChlya基因高度保守。本研究在国内首次成功地扩增了UP-EC基因。为进一步研究hlya的结构、阐明UPEC的致病机制、探讨hlya作为特异性诊断靶点及保护性疫苗的研究奠定了基础。     

hTERT表达水平对乳腺癌干细胞体外生物学行为的影响

目的观察人端粒酶反转录酶反义寡核苷酸(h TERT ASODN)对乳腺癌干细胞生物学行为的影响。方法合成针对人端粒酶反转录酶(h TERT)的反义寡核苷酸,以脂质体转染的方法将其转染入乳腺癌干细胞,设为ASODN组,以正义序列转染作为阴性对照组,并设未处理对照组。RT-PCR和Western blot分别检测各组h TERT基因和蛋白表达。应用CCK8法检测转染对乳腺癌干细胞增殖的影响,Transwell小室法检测干细胞侵袭、迁移能力。结果 RT-PCR和Western blot检测结果显示,ASODN组h TERT基因相对表达量为0.40±0.03,低于阴性对照组(0.81±0.05)和未处理对照组(0.79±0.04),F=137.33,P<0.001;h TERT基因蛋白相对表达量为0.39±0.06,低于阴性对照组(0.87±0.04)和未处理对照组(0.90±0.02),F=59.29,P<0.001。CCK8结果显示,乳腺癌干细胞培养12、24、36、48和60 h,ASODN组细胞增殖能力明显低于阴性对照组和未处理对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell侵袭实验,ASODN组穿越Transwell小室的细胞数为8.40±0.36,低于阴性对照组(15.64±0.13)和未处理对照组(14.31±1.12),F=94.56,P<0.001。Transwell迁移实验,ASODN组穿越Transwell小室的细胞数为30.6±8.03,低于阴性对照组(51.40±5.66)和未处理对照组(53.11±6.34),F=20.11,P=0.002。结论 h TERT ASODN可显著抑制乳腺癌干细胞体外增殖、侵袭和迁移能力。     

血浆置换辅助治疗系统性红斑狼疮的疗效与安全性观察

目的探讨血浆置换（plasma exchange,PE）辅助治疗系统性红斑狼疮的疗效与安全性。方法对56例系统性红斑狼疮患者进行血浆置换治疗,检测治疗前后患者相关血液指标（RBC、WBC、Hb、Plt、ESR、CRP、C3、C4、ds-DNA）。观察PE过程中患者不良反应及临床症状改善情况。结果 56例患者进行血浆置换前后血液指标检测有显著变化（P〈0.05）;临床症状明显改善;8例出现轻微不良反应,对症处理后均有好转。结论血浆置换辅助治疗系统性红斑狼疮疗效肯定,起效快,缩短了病程,且副作用小,安全性好。     

炎性乳癌患者血浆D-二聚体含量与新辅助化疗疗效的关系

目的探讨炎性乳癌患者新辅助化疗前、后血浆中D-二聚体指标变化的临床意义。方法采用胶乳增强免疫比浊法检测18例炎性乳腺癌患者化疗前、后血浆D-二聚体含量。结果炎性乳癌患者新辅助化疗前血浆中D-二聚体比正常对照组高(P<0.01),化疗后D-二聚体含量显著低于化疗前(P<0.01)。结论血浆D-二聚体水平的高低可作为炎性乳癌疗效观察、判断预后的一个指标。     

D-二聚体与CEA、CA15-3在乳腺癌新辅助化疗中的临床检测分析

目的探讨肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA15-3)与D-二聚体联合检测对乳腺癌新辅助化疗疗效判断的临床意义。方法采集75例乳腺癌患者新辅助化疗前、后血浆,采用胶乳增强免疫比浊法检测D-二聚体含量;用电化学发光法检测血清中CEA、CA15-3含量。结果新辅助化疗后各临床疗效组D-二聚体、CEA、CA15-3含量变化并不与临床效果完全一致。结论联合检测D-二聚体与肿瘤标志物能更好地提高乳腺癌术前化疗监测效果、并对判断预后及术后化疗药物的选择提供有力证据。     

尿路致病性大肠杆菌溶血素A基因的克隆和序列分析

目的构建尿路致病性大肠杆菌（Uropathogenic Escherichia coli,UPEC）溶血素A（hemolysin A,HLYA）hlya基因重组质粒。方法根据已知GenBank中的hlya基因序列,设计合成一对引物,用PCR方法从尿路致病性大肠杆菌溶血素A基因组DNA中扩增编码hlya的基因片段,克隆至pUC18质粒,转化大肠杆菌DH5aЭ感受态细胞,经酶切及PCR鉴定,而后进行测序。结果hlya基因体外扩增产物大小约744bp,重组质粒经酶切及PCR鉴定表明获得正确重组子,测序结果与己知序列基本吻合。结论在国内首次克隆了尿路致病性大肠杆菌hlya基因,为研究hlya的功能和探讨hlya作为特异性诊断靶抗原的研究奠定了基础。     

血浆D-二聚体定量检测在临床常见疾病诊断中的应用价值

目的探讨D-二聚体定量检测在临床常见疾病应用中的临床价值。方法对40例健康体检者(对照组)和690例患者(病例组)采用免疫比浊法进行D-二聚体检测。结果大部分病例组D-二聚体水平显著高于对照组(P<0.01)。结论 D-二聚体检测对弥漫性血管内凝血(DIC)、白血病、心肌梗死、主动脉夹层、脑梗死、深静脉血栓、肺栓塞、肝脏疾病、恶性肿瘤、糖尿病、妊娠高血压、新生儿窒息、肾病综合征等疾病的诊断治疗及疗效观察和鉴别诊断具有很高的应用价值。     

吡柔比星在乳腺癌患者手术中冲洗创腔的临床价值

目的探讨乳腺癌手术创面冲洗液脱落癌细胞阳性率与临床因素的关系,为术中应用吡柔比星杀灭脱落癌细胞的临床价值提供理论依据。方法将2012年6月—2014年1月期间119例行乳腺癌改良根治术的患者随机分为试验组(n=60)和对照组(n=59),对两组患者手术创面冲洗液分别进行脱落癌细胞检查,并将结果与临床因素对比分析;而后试验组应用吡柔比星冲洗,对照组仅用蒸馏水冲洗;之后,观察手术创面冲洗液中脱落癌细胞的阳性率,计数资料采用χ2检验,P0.05为差异有统计学意义。结果 119例患者脱落癌细胞阳性率为36.97%,试验组38.33%、对照组35.59%,差异无统计学意义(P0.05)。脱落癌细胞阳性率与病理分期、肿瘤大小、有无淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P0.05);试验组用吡柔比星再次冲洗后,脱落癌细胞阳性率为6.6%,对照组为20.3%,差异有统计学意义(P0.05)。结论乳腺癌手术结束前,应用吡柔比星冲洗手术创面,能有效杀灭术中脱落癌细胞,对病期晚、有淋巴结转移患者尤为必要。     

B淋巴细胞刺激因子（Baff）在结肠癌及转移淋巴结中的表达及其意义

目的探讨结肠癌原发灶及淋巴结转移灶中B淋巴细胞刺激因子（Baff）的表达特点及其与临床病理特征的关系。方法对50例行结肠癌根治术的结肠癌组织标本及34例淋巴结转移灶,结肠正常组织20例采用免疫组化法检测Baff表达。结果Baff在72%（36/50）结肠癌组织中呈阳性表达,34例结肠癌原发灶和淋巴结转移灶中Baff高表达的阳性率分别为88.2%（30/34）,85.3%（29/34）,两部位Baff表达具有较高的同源性。而在结肠正常组织中,Baff的表达阳性检出率分别为：15%（3/20）。Baff表达与分化程度（P〈0.01）密切相关,但与手术年龄,性别,肿瘤大小,淋巴结转移无关。结论结肠癌的发生与Baff表达密切相关,Baff在结肠癌原发灶及转移淋巴结中的表达具有较高的同源性,Baff表达对结肠癌手术方式的选择具有指导价值。     

丙型肝炎患者血清sTNFR水平及其临床意义的探讨

目的探讨丙型肝炎患者血清中sTNFR水平及其临床意义。方法用ELISA双抗体夹心法,检测68例丙型肝炎患者血清可溶性肿瘤坏死因子受体（sTNFR）。结果重型肝炎及慢性活动性肝炎与健康对照组有显著差异（P〈0.01）,sTNFR水平升高程度与病情呈正相关。结论测定丙型肝炎患者血清sTNFR水平,对判断病情及预测转归有一定参考价值。