显微成像分析技术在中性粒细胞运动及吞噬功能研究中的应用

目的:使用转盘式激光共聚焦显微镜及显微图像处理软件对中性粒细胞的运动及吞噬功能进行分析与评估。方法:使用Percoll分离液分离小鼠骨髓中性粒细胞,用PE荧光标记后与FITC标记的酵母聚糖颗粒(Zymosan)混匀,置于转盘式激光共聚焦显微镜下进行多通道时间序列成像。使用Volocity和Image J分析中性粒细胞的运动及吞噬相关参数,包括形态变化、运动轨迹、伪足振荡、结合吞噬指数,得出时间序列下各项参数的变化趋势。结果:中性粒细胞在受到Zymosan诱导后趋化作用明显,大部分细胞在短时间内发生极性化,在40分钟内能快速结合Zymosan,行使吞噬功能。结论:使用显微成像技术结合图像处理分析技术可准确、定量地分析中性粒细胞运动及吞噬功能,直观快速地对中性粒细胞的生理学状态进行初步评估。通过这项技术,得到正常生理状态下中性粒细胞对Zymosan的快速响应情况,为今后中性粒细胞相关功能学研究提供了参考依据。     

仪器维护与技术培训一体化在流式细胞仪管理中的应用

以BD CantoⅡ流式细胞仪为例,介绍了检测正常人外周血na觙ve细胞和静息态T细胞的标准方法,重点演示了仪器校准、电压调节、补偿调节等实验模板的建立流程;以BD Influx流式细胞仪为例,介绍了流式细胞仪的结构与功能特点以及平台多色流式细胞术技术培训中的相关内容;列举了BD Influx流式细胞仪的常见故障、引起...     

光路系统的优化配置在多色流式细胞术实验方案设计中的应用

目的:基于流式细胞仪光路系统的硬件配置情况,探讨多色流式细胞术实验方案的优化设计.方法:选用6～8周B6小鼠的骨髓细胞作为实验材料,在已有流式抗体的基础上,通过变更BD AriaⅢ流式细胞仪中的滤光片,分别检测各荧光通道信号的相对变异系数％rCV和荧光强度中位值(median of fluorescence inten...