支气管肺泡灌洗液中α_1-抗胰蛋白酶测定结果分析

<正> 1 研究对象及方法 病人组41例,男29例,女12例。年龄27岁～72岁,平均49.5岁,均为1989～1990年本院门诊或住院患者。其中肺癌11例,均经病理检查证实,肺部急性感染11例,慢性阻塞性肺疾病19例。正常肺组12例.男7例,女5例,年龄22岁～66岁,平均45.5岁. 检查时将纤维光束支气管镜远端置于病灶所在肺段的段级支气管开口.用无菌生理盐水20ml注入,随即吸出,收集于特殊容器内,回收量平均5～     

柯萨奇病毒B组IgM抗体检测抗原片的研制,优化及应用价值的研究

正柯萨奇病毒B组(CoxB)是单股正链小RNA病毒,是呼吸道感染的主要病原体之一。根据血清型,该B组病毒可分为B1、B2、B3、B4、B5、B6六种类型,主要侵犯免疫力底下的围生儿,可引起脑膜炎,中枢神经系统感染等多种疾病,亦是引起病毒性心肌炎的主要病原体之一,占病毒性心肌炎诱因的20%-25%,病情严重者可导致死亡。CoxB传染源为病人及隐性感染者,可经口、呼吸道、肠道传播或胎儿宫内传染。     

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白—新型急性肾损伤的早期诊断标志物

<正>中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(Neutrophil gelatinase associated lipocalin,NGAL)属于脂质运载蛋白家族(lipocalin)的一员,作为新型急性肾损伤的早期诊断标志物与临床常用的肌酐、尿量等传统检测指标相比,更能迅速、灵敏地反映肾脏的损伤及恢复过程,用于早期急性肾损伤(acute kidney injure,AKI)的诊断更具有特异性和敏感性。     

风疹病毒E1蛋白克隆表达及应用

目的 构建表达风疹病毒蛋白抗原的重组质粒及工程菌,获得纯化的E1蛋白抗原,用于检测风疹病毒特异性抗体IgM.方法 克隆表达风疹病毒E1重组蛋白,利用产物建立IgM捕获ELISA方法鉴定其抗原性及实用性.结果 表达纯化的E1蛋白经酶标记建立IgM捕获ELISA方法,检测53份抗风疹病毒IgM阳性血清和67份阴性血清,用酶标记E1蛋白建立的捕获ELISA法阳性检出率98.1%,阴性检出率100%,与意大利SORIN公司试剂盒检测结果比较,无统计学意义(P＞0.05);其中1份风疹病毒(IgM)阳性血清1∶16稀释后仍能与抗原反应,初步表明E1蛋白抗原表位有较好的抗原特异性.结论 高效表达纯化的E1蛋白抗原性强,利用其建立的IgM捕获ELISA方法,可用于检测风疹病毒抗体.     

益肾兴阳胶囊质量标准的研究

本制剂已收载于部颁标准中[1] ,原标准鉴别项下有黄芪、人参、菟丝子、蚕蛾等药材的显微鉴别及淫羊藿苷的鉴别。为进一步提高制剂质量,本文在原有基础上又增加了人参和黄芪的薄层鉴别法,并采用高效液相色谱法测定制剂中有效成分淫羊藿苷的含量,经对同仁堂提供的3批样品的质量检查,结果均可检出上述成分,而淫羊藿苷含量分别为0 .93,0 .6 8,0 .6 2mg/粒。通过研究证明本法准确、灵敏、专属性强,可作为质控内容,补充于原标准中,从     

精浆中延胡索酸酶活力的测定及临床意义

精子活动率是男性授孕的一项最重要的因素,为精子尾部运动提供主要能量的是通过果糖分解和三羧酸循环合成的ATP。与ATP合成有关的酶及底物的报道已有许多,但对于精浆中延胡索酸酶(E、C、4、2、1、2)的报道却很少。笔者收集了男性不孕患者的精液,测定分析精浆中延胡索酸酶的活力及与精子质量的关系。 材料和方法 收集了64例年龄在25～34岁之间,禁欲4天以上的男性不孕患者的精液,按操作规程测定了每份精液的体积,精子数量及活动度,然后用1200g离心20分钟,将精子与精浆分离,分离后     

MMP-2和MMP-9在胃癌患者组织和血清中的表达及临床意义

目的研究胃癌患者血清及其癌组织中基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）水平,探讨与胃癌临床病理参数的关系。方法收集38例胃癌患者的癌组织和术前血清标本,用免疫组织化学PV-9000通用型二步法和ELSIA法对胃癌患者组织及血清中MMP-2和MMP-9的含量与表达检测。结果MMP-2和MMP-9在胃癌组织中的阳性表达率分别为94．7％和86．8％,与淋巴结转移、肿瘤分期显著相关（P〈0．05）;胃癌患者血清中MMP-2水平与正常对照组比较无显著差异（P〉0．05）;胃癌患者血清中MMP-9的含量明显高于正常对照组,差异有显著性（P〈0．05）,且其含量与淋巴结转移、肿瘤分期显著相关（P〈0．05）。结论MMP-2和MMP-9在胃癌组织中高表达,并与淋巴结转移、肿瘤分期显著相关;胃癌患者血清中MMP-2的含量与组织中MMP-2的表达没有相关性,血清中MMP-9的含量与组织中MMP-9的表达具有相关性,且与淋巴结转移、肿瘤分期显著相关。     

RNAi沉默HMGN5基因对肺癌A549细胞增殖的影响

目的构建HMGN5基因的shRNA慢病毒载体,并在肺癌A549细胞上鉴定其沉默效率,观察其对细胞增殖能力的影响。方法筛选HMGN5基因特异性siRNA靶点,合成短发卡结构shRNA,与LentiLox3.7慢病毒载体重组形成shRNA表达载体,包装shRNA慢病毒颗粒,感染肺癌A549细胞,设阴性组及干涉组,应用Real-time PCR和Western印迹的方法检测HMGN5在mRNA和蛋白水平的沉默效率,MTT和克隆形成实验观察HMGN5基因沉默对A549细胞增殖的影响。结果构建的shRNA慢病毒颗粒感染A549细胞后,干涉组HMGN5基因的mRNA表达量较阴性对照载体慢病毒感染组下降了71.7%,显著抑制其蛋白表达;MTT结果表明细胞增殖能力明显降低,干涉组克隆形成能力较阴性组明显减弱。结论成功构建了HMGN5基因的shRNA慢病毒表达载体,其能够在肺癌A549细胞上有效沉默靶基因。HMGN5基因具有影响肺癌细胞恶性增殖的能力,为肺癌的基因治疗奠定了实验基础。     

SLC34A2在钙、磷代谢中的研究进展

SLC34A2是编码磷酸钠协同转运蛋白的基因,在人体的多种组织中表达,以肺组织表达最高。该基因主要参与无机磷代谢,与肺泡微石症(PAM)、睾丸微石症等多种代谢性疾病发病相关。已经成为国外研究钙、磷代谢的热点。本文仅就SLC34A2在钙、磷代谢中的研究进展做以综述。1 SLC34A2基因     

人卵GST-ZP3融合蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及其免疫原性的检测

目的:在大肠杆菌中表达人卵透明带3(Human zona pellucida3,HuZP3)蛋白并对其进行纯化。方法:将HuZP3基因的核心片段克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,经过酶切和序列分析后,用重组质粒转化E.coli BL21,经IPTG诱导产生GST-HuZP3融合蛋白并通过Glutathione Sepharose 4B纯化。以纯化的融合蛋白免疫纯系Balb/C小鼠制备抗血清。抗血清的效价采用ELISA检测。结果:成功地构建GST-HuZP3融合蛋白表达载体,并在大肠杆菌中高效表达特异性的GST-HuZP3融合蛋白。以该融合蛋白免疫小鼠获得高效价抗GST-HuZP3抗血清,且该抗血清可识别大肠杆菌表达的重组ZP3。结论:获得高表达的GST-HuZP3融合蛋白并证实其具有良好的免疫原性,可作为抗原研制开发检测不孕妇女体内是否存在抗自身ZP3抗体的诊断试剂盒。