电化学发光免疫法检测降钙素原的空白限、检出限和功能灵敏度的评价

目的对Roche Cobas E601全自动电化学发光免疫检测系统检测降钙素原(PCT)的检测限值和功能灵敏度(FS)进行评价。方法参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP-17A文件,将空白样品生理盐水及系列低浓度样品在Roche Cobas E601全自动电化学发光免疫检测系统进行检测,确定该方法的空白限(LoB),检出限(LoD)和FS。结果 PCT的LoB为0.029ng/mL,LoD为0.068ng/mL,FS为0.034ng/mL。结论建立了Roche Cobas E601全自动电化学发光仪PCT的LoB,LoD和FS,其分析灵敏度性能指标符合厂商提供的性能指标。为临床诊断和治疗提供了更有价值的信息。     

降钙素原、超敏C反应蛋白、白细胞介素6、白细胞联合检测在2型糖尿病血流感染诊断中的应用

目的通过分析2型糖尿病血流感染患者和非血流感染患者外周血降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞(WBC)水平,探讨4种炎症指标单一和联合检测在2型糖尿病血流感染诊断中的应用价值。方法回顾性分析2013年1月至2016年7月该院确诊为2型糖尿病血流感染患者85例(糖尿病血流感染组)和同期2型糖尿病非血流感染患者80例(糖尿病非血流感染组)临床资料,分析两组患者外周血各炎症指标水平,绘制各炎症指标受试者工作特征曲线(ROC曲线),计算出曲线下面积(AUC)和最佳临界值,检测方案分为单项目、2项目、3项目和4项目检测共24种方案。结果糖尿病血流感染组PCT、hs-CRP、IL-6和WBC水平均明显高于糖尿病非血流感染组,差异有统计学意义(P0.05)。PCT、hsCRP、IL-6和WBC的AUC分别为0.909、0.818、0.838、0.760,最佳临界值依次为0.493ng/mL、11.19ng/mL、40.95pg/mL、11.87×109/L。PCT检测的约登指数和IL-6的准确度在单项目中最高;方案PCT/hsCRP、PCT+hs-CRP+IL-6的约登指数和准确度在联合检测方案中最高。结论 PCT检测在辅助诊断中有突出的价值,联合检测方案中PCT/hs-CRP、PCT+hs-CRP+IL-6对2型糖尿病血流感染的辅助诊断最有价值。     

电化学发光免疫法检测NT-proBNP的分析测量范围和临床可报告范围研究

目的对Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的分析测量范围(AMR)进行验证性研究,并建立临床可报告范围(CRR)。方法参考美国临床与实验室标准化协会(CLSI)EP6-A文件,选用超出厂商声明的分析测量范围下限和上限浓度的样本,按比例精确配成等间距的不同浓度样本,每个浓度样本重复测定2次,用多项式回归评价并验证厂商声明的AMR;选用NT-proBNP浓度在分析测量范围内的高值样本5份,用稀释液作不同倍数稀释后测定,计算稀释回收率,确定最大允许稀释度,并结合功能灵敏度建立CRR。结果 NT-proBNP的分析测量范围:5~35 126 pg/mL,最大允许稀释度1∶2。根据其功能灵敏度,临床可报告范围:8.82~70 252 pg/mL。结论 Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP在厂商声明的分析测量范围内线性良好,所建立的临床可报告范围可以满足临床需要。     

PCT检测在全身和局部细菌感染诊断中的临床应用

目的评价血清降钙素原(PCT)定量检测在全身和局部细菌感染诊断中的临床应用价值。方法采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)颁布的EP15-A2文件验证罗氏Cobas E601电化学发光免疫检测系统(简称Cobas E601)检测PCT的精密度和准确度,保证仪器条件符合实验要求。收集全身和局部细菌感染住院患者697例,联合分析患者血培养、痰培养、中段尿培养和脑脊液培养数据及其血清PCT结果,比较全身感染和局部感染及不同部位感染患者血清PCT的变化趋势,并分析革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌感染机体PCT的表达差异情况。结果 Cobas E601检测PCT具有良好的重复性,总变异系数(CV)3.59%,与定值校准品的偏差5.0%,符合临床检测要求。血清PCT水平在全身和局部感染患者中均升高,且全身感染患者PCT水平明显高于局部感染患者(P0.05);在局部感染中,呼吸系统、泌尿系统和神经系统感染组间血清PCT水平差异无统计学意义(P0.05)。在全身感染中,革兰阴性杆菌感染患者血清PCT水平高于革兰阳性球菌感染患者(P0.05);在局部感染中,此2类细菌感染患者血清PCT水平差异无统计学意义(P0.05)。结论血清PCT水平在全身感染和局部感染患者样本中均升高,在局部感染中不能通过血清PCT水平鉴别革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌的感染。     

212～216年广东省中山社区鼠伤寒沙门菌同源性分析及对喹诺酮类药物耐药机制研究

目的 研究广东省中山社区鼠伤寒沙门菌(STM)的同源性及对喹诺酮类药物的耐药机制。方法 收集中山大学附属中山医院2012年3月～2016年12月临床分离鼠伤寒沙门菌78株(排除同一病人重复送检菌株)。通过琼脂稀释法检测鼠伤寒沙门菌对喹诺酮类药物的敏感度; 脉冲电场凝胶电泳(PFGE)方法分析耐药菌株的同源性; 使用PCR和DNA测序法分析gyrA,gyrB,parC和parE基因喹诺酮耐药决定区(QRDRs)的突变; PCR检测质粒介导喹诺酮类药物耐药基因qnr(qnrA,qnrB,qnrS,qnrD)和aac(6')-Ib-cr。结果 33株鼠伤寒沙门菌对环丙沙星产生耐药。33株鼠伤寒沙门菌共产生33种不同的PFGE图谱,相似度小于90%。29株耐药株gyrA位点发生单突变导致在第83或87位存在唯一氨基酸替代,其中第83位突变率占93.1%(27/29)。4株喹诺酮高耐药菌株的gyrA同时存在83和87号位双突变导致两个氨基酸发生替代,其中2株菌额外出现parC基因单碱基突变导致第80号位出现氨基酸替代。所有菌株中均未检测到qnr基因,但有15株鼠伤寒沙门菌检出aac-(6')-Ib-cr基因。结论 中山社区鼠伤寒沙门菌对喹诺酮类药物耐药性较高,主要机制是gyrA基因的单突变和携带aac-(6')-Ib-cr耐药基因。     

糖尿病患者感染产ESBLs肠杆菌科细菌的耐药性及危险因素分析

目的 了解中山市糖尿病患者感染产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-Lactamases,ESBLs)肠杆菌科细菌的耐药性及危险因素。方法 收集2014年1月～2016年6月中山大学附属中山医院120例确诊糖尿病并发感染产ESBLs肠杆菌科细菌患者的临床标本132例和临床资料。通过VTIEK 2 COMPCT全自动微生物鉴定系统进行菌种鉴定和药物敏感试验; 使用VITEK 2 COMPCT高级专家系统判定菌株的耐药表型和耐药模式,同时根据是否产ESBLs,把主要致病菌大肠埃希菌分为ESBLs-positive组和ESBLs-negative组,比较两组在耐药模式之间的区别。对患者的各项临床资料进行logistic回归分析糖尿病并发感染产ESBLs肠杆菌科细菌的危险因素。结果糖尿病患者感染产ESBLs肠杆菌科细菌主要是大肠埃希菌,其次是肺炎克雷伯菌,感染标本来源主要是中段尿。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对厄他培南和亚胺培南敏感度为100%,对头孢替坦和哌拉西林/他唑巴坦的敏感度大于98%。大肠埃希菌ESBLs-positive组和ESBLs-negative组在获得性青霉素酶、β-内酰胺类抗生素野生型、其他超广谱β-内酰胺酶和CTX-M型ESBLs四种耐药模式之间差异均有统计学意义(χ²=17.34,19.23,33.90,42.75,均P<0.05)。经logistic回归分析,年龄、住院次数、性别、糖尿病病程、收缩压、糖化血红蛋白水平、抗生素使用情况、感染前的治疗情况、类固醇药物应用、外科手术、侵入性操作、并发症等均不是产ESBLs肠杆菌科细菌感染的危险因素。结论 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是糖尿病患者感染产ESBLs肠杆菌科的主要致病菌,感染部分主要是泌尿系统。产ESBLs肠杆菌对厄他培南、亚胺培南、头孢替坦和哌拉西林/他唑巴坦敏感。大肠埃希菌ESBLs-positive组和ESBLs-negative组主要表现为四种耐药模式的差异。年龄、住院次数和性别等常见因素均不是糖尿病患者感染产ESBLs肠杆菌科细菌的危险因素。     

电化学发光免疫法检测NT-proBNP的分析性能评价

目的 评价电化学发光免疫法检测NT-proBNP的分析性能.方法 参考CLSI发布的方法学评价系列文件,对Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的精密度、正确度、空白限(LoB)和检出限(LoD)、功能灵敏度(FS)、分析测量范围(AMR)、最大稀释度、临床可报告范围(CRR)以及胆红素、血红蛋白和乳靡对分析的干扰进行评价,并与厂商声明的性能和有关的质量标准进行比较.根据CLSI C28-A2文件,选择18～74岁的健康体检者80名,按年龄分为4组,每组20名,以验证厂商声明的生物参考区间的适用性.结果 电化学发光免疫法检测NT-proBNP的批内CV和总CV分别为1.1％ ～2.2％和1.5％ ～2.9％,与卫生部临床检验中心室间质量评价调查品同方法组的均值和配套校准品标示值的偏差分别为2.7％ ～5.9％和2.7％～7.5％,LoB、LoD和FS分别为2.5、7.8和8.8 pg/ml,AMR为8～35 126 pg/ml,最大允许稀释度为1∶2,CRR为9～70 252 pg/ml,胆红素(428 μmol/L)、血红蛋白(2 g/L)和乳靡(2 200 FIU)对NT-proBNP测定无干扰.不同年龄组各20名健康参考个体NT-proBNP浓度除1个检测值(167 pg/ml)超出厂商提供的参考区间外,其余均在厂商提供的参考区间内.结论Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的主要分析性能达到了厂商声明的性能和有关的质量要求,建立的LoD、FS、最大稀释度和CRR可为临床提供更好的质量保证,厂商声明的生物参考区间可满足临床需要.     

中山地区1020例泌尿生殖道沙眼衣原体感染情况及耐药性分析

目的 探讨中山地区泌尿生殖道沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)感染情况及对常用抗菌药物的耐药性.方法 收集1 020例泌尿生殖道标本,核酸扩增法扩增沙眼衣原体MOMP基因进行电泳并测序鉴定;阳性临床菌株通过PCR产物电泳并测序检测四环素耐药质粒tetM基因、大环内酯类耐药相关23S rRNA基因、核糖体蛋白基因L4和L22以及喹诺酮类耐药基因gyrA.结果 1 020例泌尿生殖道标本检出沙眼衣原体感染者137例(感染率13.43%),其中女性126例(感染率17.00%),男性11例(感染率3.94%),女性检出率明显高于男性(P<0.0001),感染人群主要集中于21~30岁的年轻女性,以宫颈分泌物和阴道分泌物标本检出率最高.137株沙眼衣原体临床株中检出tetM基因18株,喹诺酮类gyrA-QRDR基因有83丝氨酸(AGT)-异亮氨酸(ATT)点突变耐药株10株.有4株同时存在四环素类和喹诺酮类耐药基因.结论 20~30岁女性人群为沙眼衣原体感染的高危人群.中山地区沙眼衣原体耐药菌株以四环素类和喹诺酮类为主,且出现多重耐药现象,未发现大环内酯类耐药菌.     

综合医院非伤寒沙门菌感染腹泻患者病原学分析

目的了解综合医院腹泻患者非伤寒沙门菌感染情况,分析非伤寒沙门菌的血清分型、耐药性和分子特征。方法对2009年9月-2011年6月腹泻病患者送检的767份粪便标本进行非伤寒沙门菌检测,对分离到的菌株进行血清分型、药物敏感性试验和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型。结果从767份腹泻粪便标本中分离到36株非伤寒沙门菌,阳性检出率为4.56%;以儿童为主,占65.71%;共分为10种血清型,主要以鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌为主,分别占37.14%和28.57%;10个血清型非伤寒沙门菌对头孢类和环丙沙星的敏感率>84.00%,除斯坦利沙门菌和山夫登宝沙门菌外,其他血清型均对多种抗菌药物产生不同程度的耐药或交叉耐药;将13株鼠伤寒沙门菌和10株肠炎沙门菌共分离出19个PFGE分型,其中2株肠炎沙门菌PFGE同型,3株鼠伤寒沙门菌PFGE同型,存在不同耐药谱。结论综合医院引起感染性腹泻的非伤寒沙门菌主要为鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌,儿童多见;非伤寒沙门菌多药耐药严重,临床在应用氟喹诺酮类治疗非肠外沙门菌属感染时,应根据药敏结果慎重选择。