重组人体干细胞因子的表达、复性、纯化及其对脐带血干细胞体外扩增作用研究

目的对重组人体干细胞因子（rhSCF）蛋白在脐带血干细胞体外扩增中的作用进行研究。方法通过大肠杆菌表达系统,经IPTG诱导表达获取SCF包涵体,经透析复性、纯化后获得蛋白。从脐带血中提取单核细胞（MNC）,分选其中具有CD34＋抗原表位的细胞,使用一定浓度的血小板生成素（TPO）、FLT-3配体（FL）及rhSCF组合对脐带血干细胞进行7 d体外扩增以研究rhSCF的作用。结果成功使用IPTG在大肠杆菌BL21诱导表达rhSCF,包涵体经复性及CM-Sepharose纯化获得高纯度的rhSCF。干细胞体外扩增实验表明rhSCF、FL及TPO联用,具有协同刺激CD34＋细胞体外扩增的作用。结论成功建立rhSCF原核表达、复性和纯化体系,为造血干细胞体外扩增体系的优化研究奠定了基础,同时为干细胞因子的临床应用提供了有价值的参考。     

新一代重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSFa)的临床前急性毒性和亚急性毒性研究

 目的 研究新一代重组人粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-colony stimulating factor a,rhG-CSFa)在不同给药途径和时间下的急性和亚急性毒性。方法 6周龄雌雄各半昆明种小鼠80只,随机均分8组进行急性毒性实验:阴性对照组(2组）注射等量生理盐水,其余6组分别由皮下或静脉注射34、345、3 450 μg/kg的rhG-CSFa,连续观察生理状态10天。另取6周龄雌雄各半昆明种小鼠50只,随机均分5组进行亚急性毒性实验。对照组注射等量生理盐水,其余各组每次分别皮下注射1.1、11.5、115、1 150 μg/kg 的rhG-CSFa,连续3周每24 h给药一次并观察其生理状态。末次给药24 h后处死小鼠,进行解剖学检查,并分别作白细胞计数及制作血涂片和骨髓涂片镜检。结果 (1)急性毒性实验小鼠无明显毒性作用及不良反应。实验组与对照组相比无明显体重差异(P>0.05),个别组体重偏低但生理功能未现异常,10日内未见其死亡;(2)亚急性毒性实验小鼠无明显毒性作用及不良反应,实验组白细胞数量显著增加(P<0.01)。结论 rhG-CSFa对小鼠无明显急性和亚急性毒性作用。     

肿瘤坏死因子-α对牙周膜干细胞骨向分化及Notch信号通路的影响

目的 研究肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对牙周膜干细胞（PDLSCs）骨向分化及Notch信号通路的影响,初步探讨在TNF-α影响下Notch信号通路对PDLSCs成骨分化的调控作用。方法 采用酶消化结合组织块法获得PDLSCs,通过流式细胞仪检测间充质干细胞（MSCs）表面标记物CD105、CD90、CD146、CD45、CD31的表达,将PDLSCs分为实验组（10 ng·mL^-1 TNF-α）和对照组（不含TNF-α）,使用CCK-8法检测PDLSCs增殖能力;通过碱性磷酸酶（ALP）活性、茜素红染色、实时定量聚合酶链反应（PCR）检测TNF-α对PDLSCs成骨能力的影响;实时定量PCR 检测Notch信号通路受体Notch1、Notch2、Notch3,配体JAG1、JGA2、DLL1,细胞内效应分子Hes-1的表达。结果 流式细胞仪检测结果显示CD105、CD90及CD146表达阳性,CD45、CD31表达阴性;CCK-8法结果显示TNF-α能够促进PDLSCs增殖能力（P<0.05）;ALP活性检测结果显示,实验组与对照组相比,ALP活性降低（P<0.05）;茜素红染色结果显示,与对照组相比,实验组矿化结节减少;实时定量PCR结果显示,与对照组相比,成骨标志基因牙骨质附着蛋白（CAP）、骨桥蛋白（OPN）、Runt相关转录因子2（Runx2）表达量明显降低（P<0.05）;Notch信号通路相关分子中Notch1、Notch2、JAG1、JGA2、Hes-1的表达水平显著降低（P<0.05）,而Notch3、DLL1的表达水平增高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 TNF-α能够促进PDLSCs增殖而抑制其骨向分化,同时抑制Notch信号通路的表达,说明Notch信号通路对PDLSCs骨向分化具有一定的调控作用。     

全科医疗核心特征功能对糖尿病患者自我管理效能影响

目的探究全科医疗核心特征功能对签约家庭医生的糖尿病患者自我管理效能及其分维度的影响,为提升糖尿病患者自我管理效能提供针对性作用环节。方法采用便利抽样方法,于2019年8—9月在广州市沙园社区卫生服务中心对签约家庭医生的2型糖尿病患者进行面对面问卷调查,收集相关数据。采用多重线性回归方法分析全科医疗核心特征功能对糖尿病患者总体自我效能及分维度的影响。结果共收集224名2型糖尿病患者数据,其自我效能总分为(76.24±12.31)分,全科医疗核心特征功能总分为(72.95±11.40)分。多重线性回归分析结果显示,第一线照护能够提高糖尿病患者总体自我效能(β=0.081,P<0.1);第一线照护(β=0.088,P<0.1)、可及性(β=0.207,P<0.1)、连续性(β=0.133、P<0.1)、协调性(β=0.275,P<0.1)及以病人为中心(β=0.187,P<0.1)可提高患者药物治疗效能;未发现全科医疗核心特征功能与患者血糖与足检查、饮食管理及运动管理效能之间存在关系。结论全科医疗核心特征功能可在总体上提升糖尿病患者自我管理效能和药物治疗效能,但对患者血糖与足检查、饮食管理及运动管理自我效能的作用尚未发现,提升这三个方面的自我效能,还需借鉴健康教育和健康促进理论,提供促成因素和强化因素,例如资源支撑和环境支撑等。