腺病毒介导MDA-7/IL-24选择性杀伤肝癌 细胞HepG2的研究

目的 ：观察MDA-7/IL-24基因对肝癌的选择性杀伤作用，为肝癌的基因治疗提供理论基础。 方法 ：将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染人正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2;用RT-PCR法观察MDA-7/IL-24基因的表达;ELISA方法检测细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白的浓度;4甲基偶氮唑蓝染色法（MTT）及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞的生长抑制和杀伤作用;Annexin-V和PI双染后流式细胞仪检测2种细胞的凋亡;用流式细胞仪检测细胞周期。 结果 ：复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7/IL-24在肝癌细胞株HepG2和正常细胞L02中的高效表达;细胞培养上清液中有MDA-7/IL-24蛋白的表达; MDA-7/IL-24能明显抑制肝癌细胞生长并可促进肝癌细胞的凋亡;MDA-7/IL-24阻滞肝癌细胞于G2/M期，能选择性杀伤肝癌细胞而对正常的肝细胞无阻滞作用和毒性作用。结论 ：复制缺陷型重组腺病毒载体Ad.mda-7能介导MDA-7/IL-24基因在人肝癌细胞中高效表达，促使细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡，选择性地杀伤肝癌细胞HepG2，而对正常肝细胞L02无任何毒性作用。     

肺泡微结石症1例报告

1　病例介绍患者男性 ,13岁 ,以反复咳嗽 2年、活动后气促 2月为诉入院。入院前两年 ,不明原因咳嗽 ,为单声轻咳 ,清晨为著 ,伴咽部不适 ,痒感 ,痰少、白色 ,无咯血 ,与天气变化无关 ,无发热、畏冷、寒战 ,无盗汗、胸痛、消瘦 ,无心悸、胸闷等。曾就诊某医院 ,X线胸片示肺“粟粒状阴影”,诊为“粟粒型肺结核”。予以异烟肼、链霉素、利福平等抗结核治疗 1年 ,X线胸片复查与原来胸片无改善 ,放弃抗结核治疗。来我院就诊后予以对症、抗过敏等处理 ,咳嗽减轻。 2个月前稍剧烈运动、上楼梯时自觉气喘 ,家属发现其面色苍白 ,口周青紫 ,休息后上…     

人乳头瘤病毒16 E6转染冻融人外周血树突状细胞疫苗体外抗宫颈癌作用

目的：制备来源于人外周血并转染人乳头瘤病毒（HPV）16 E6基因的冻融树突状细胞（DC）疫苗，检测其细胞形态。转染情况及体外诱导的免疫效应。方法：细胞因子扩增人外周血DC，低温-70℃冻存；Lipofectamine转染HPV16 E6制备DC疫苗。动态形态学观察，免疫细胞化学检测E6分子表达，体外诱导并测定细胞毒性T淋巴细胞活性。结果：转染E6基因的人外周血冻融DC呈形态迥异的多突起状，免疫细胞化学染色显示E6蛋白表达阳性；MTT法检测人宫颈癌细胞株（CaSKIi细胞）的杀伤活性明显高于对照组（P〈0．01），与新鲜DC疫苗比无统计学意义（P〉0．05）。结论：转染历基因的人外周血冻融DC疫苗保持了功能成熟DC的形态特征，且内源性表达E6蛋白，并在体外诱导出高效特异性的抗宫颈癌免疫反应，为宫颈癌的主动特异性免疫治疗提供了理想的疫苗和实验依据。     

基于QbD理念的对乙酰氨基酚双释双层片制备工艺的设计及优化

目的：基于"质量源于设计"（QbD）理念设计并优化对乙酰氨基酚双释双层片（简称为"双层片"）的制备工艺。方法：采用Plackett-Burman考察法确定双层片制备工艺的关键工艺参数（CPPs）;采用Box-Behnken响应面设计,以缓释层的释放度、速释层的溶出度作为关键质量属性（CQAs）,优化双层片的最佳处方、工艺参数;在二次多项式回归模型的基础上建立双层片工艺设计空间,并加以验证。结果：对乙酰氨基酚双层片最佳工艺为：崩解剂量所占比例为9.5%,制粒目数为22目,缓材比例为5∶1;设计空间以Overlay plot方式展示,并加入95%置信区间,设计空间工艺稳定可靠。结论：所制定的工艺对乙酰氨基酚双释双层片制备工艺简单,制剂稳定,适合大工业生产。     

不同活度125I粒子植入抑制兔VX2肝癌机制研究

目的：探讨125I粒子组织间植入诱导肝癌细胞凋亡的机制。比较不同活度125I粒子组织间植入诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖的作用强度。方法将24只兔VX2肝癌模型随机分为3组,分别植入不同初始活度的125I粒子：0 mCi组（对照组,n=8）、0.7 mCi组（n=8）及1.0 mCi组（n=8）。5周后处死实验兔,取出肿瘤病灶,检测125I粒子对肿瘤细胞凋亡、肿瘤生长相关因子表达的影响及caspase-3活性改变。结果不同初始活度125I粒子均可使肿瘤细胞凋亡率上升, Bcl-2、VEGF表达下调,Bax表达上调,1.0 mCi 125I粒子组作用均更加明显（P＜0.05）。不同初始活度125I粒子可增加肿瘤组织中caspase-3活性,两治疗组间差异无明显统计学意义（P＞0.05）。结论125I粒子植入后不仅通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制肿瘤生长、增殖,还影响凋亡相关基因及编码蛋白表达,抑制肿瘤细胞新生血管生成。     

支气管动脉栓塞治疗支气管扩张大咯血28例

目的回顾性分析支气管动脉栓塞治疗支气管扩张大咯血。方法对28例支气管扩张大咯血患者进行选择性支气管动脉造影，用明胶海绵颗粒等材料进行栓塞。结果左支气管动脉栓塞10例，右支气管动脉栓塞12例，左右支气管动脉共干6例。确定出血血管栓塞后，28例患者咯血停止，27例3日内未再咯血，有1例仍有咯血，1周后再行栓塞术后，咯血停止。结论支气管扩张大咯血进行内科保守治疗效果不佳而又无法耐受外科手术者，应及时行支气管动脉造影并栓塞治疗。     

北方汉族人Tanaka-Johnston预测方程研究

目的分析北方汉族青少年下颌切牙总宽度与尖牙、双尖牙总宽度之间的相关性,探寻适合目标人群的Tanaka-Johnston预测方程。方法从就诊于首都医科大学口腔医学院正畸科的病例中选取记存模型127副。研究下颌切牙总宽度与尖牙、双尖牙总宽度之间的相关性,建立北方汉族人的Tanaka-Johnston预测方程,并评价不同预测方程的准确性。结果男性组下颌切牙总宽度与上、下颌尖牙双尖牙总宽度之间相关系数r为0.71、0.77,女性组r为0.50、0.56。除本研究得出的方程外,其他预测方程普遍存在低估倾向。男性组实测值与预测值之差小于1mm的以北方汉族人方程上颌84%、下颌88%为最高;女性组以成都汉族人方程上颌74%,下颌81%为最高。结论与女性相比,男性下颌切牙总宽度与尖牙、双尖牙总宽度存在较强的正相关关系。预测准确度最高的方程分别为:男性上颌Y=11.8+0.5X,下颌Y=10.9+0.5X;女性上颌Y=11.1+0.5X,下颌Y=10.0+0.5X。     

下颈椎前路椎弓根螺钉内固定技术的研究进展

与传统前路和后路手术相比,下颈椎前路椎弓根螺钉内固定技术（anterior transpedicular screw fixation．ATPS）具有较好的生物力学优势、相对安全等特点,仅通过一次前路手术可解决减压和重建两个问题。但是由于ATPS采用了较为特殊的解剖通道,临床上暂无专门用于前路椎弓根螺钉置钉的配套内固定系统,下颈椎ATPS技术的适应证相对较窄,尚不能替代传统前路和后路手术方法。如何精确置钉以及ATPS相关内固定器械的开发是目前研究的热点及未来发展方向。     

食管静脉曲张对原发性肝癌合并肝硬化根治性切除术预后的影响

目的探讨食管静脉曲张（EV）对原发性肝癌合并肝硬化患者根治性切除术预后的影响。方法回顾性分析2001年1月至2010年12月青岛大学医学院附属医院收治的455例原发性肝癌合并肝硬化患者的临床资料和随访结果。61例患者术前影像学检查出现EV为EV组,394例无EV表现的为无EV组,比较两组患者的手术情况及预后。所有患者术后3个月内每月复查1次,以后每3个月复查1次,随访时间截至2012年12月或患者死亡。计量资料或率的比较采用,检验;Kaplan—Meier法绘制生存曲线,生存率的比较采用Log—rank检验,多因素分析采用COX回归风险模型。结果患者均行根治性肝切除术,其中行肝切除＋贲门周围血管离断术4例,脾切除术18例（包括联合贲门周围血管离断术3例）。EV组患者手术切缘距肿瘤距离〈0．5cm、脾切除、术中出血量≥1000ml和术中输血患者比例显著多于无EV组,两组比较,差异有统计学意义（X2=7．113,18．209,5．527,14．298,P〈0．05）;而两组肝切除范围〉1段、解剖性肝切除、术中进行人肝血流阻断的患者比例比较,差异无统计学意义（X2=0．591,0．124,1．412,P〉0．05）。455例患者中8例发生上消化道出血,患者均无门静脉癌栓存在。EV组和无EV组患者上消化道出血发生率分别为9．84％（6／61）和0．51％（2／394）,两组比较,差异有统计学意义（X2=26．611,P〈0．05）。患者均获得随访,中位随访时间为39．0个月（3．0～136．3个月）。455例患者中共有218例死亡,其中Ev组死亡37例,无EV组死亡181例。EV组患者因肝癌、肝病和其他原因死亡者所占比例分别为67．57％（25／37）、29．73％（11／37）和2．70％（1／37）,而无EV组患者所占比例分别为86．19％（156／181）、6．63％（12／181）和7．18％（13／181）,两组比较,差异有统计学意义（X2=17．780,P〈0．05）。EV组患者根治性切除术后1、2、5、10年生存率分别为85．2％、65．6％、36．7％和15．7％,均低于无EV组患者的91．6％、79．9％、55．4％和35．7％,两组比较,差异有统计学意Y．（X2=12．517,P〈0．05）。EV组患者1、2、5、10年无瘤生存率分别为63．2％、45．9％、22．9％和15．3％,均低于无EV组患者的80．0％、59．5％、39．1％和31．3％,两组比较,差异有统计学意义（X2=8．900,P〈0．05）。单因素分析结果显示：伴有Ev、术前AFP≥20μ/L、肝切除范围〉1段、脾切除、术中输血、肿瘤直径〉5cm、非孤立型肝癌是影响原发性肝癌合并肝硬化患者根治性切除术后预后的危险因素（X2=12．517,5．370,12．711,4．430,7．148,29．616,47．111,P〈0．05）。多因素分析结果显示：肿瘤直径〉5cm和非孤立型肝癌是影响原发性肝癌合并肝硬化患者根治性切除术后的独立危险因素（RR=1．639,2．041,P〈0．05）。结论伴有EV的原发性肝癌合并肝硬化患者根治性切除术的生存时间显著低于无EV的患者,但伴有EV不是影响原发性肝癌合并肝硬化患者根治性切除术后长期生存的独立危险因素。     

农村地区培养卫生人才的国际经验与启示

目的:描述国外为农村地区培养卫生人才的政策和项目,分析增加农村地区卫生人力的做法和措施,为我国订单定向免费医学生培养政策提供参考和依据。方法:采用文献综述方法,搜索国内外为农村地区培养卫生人才相关文献48篇,对上述文献进行逻辑分析归纳,系统回顾分析国内外相关策略和做法,总结经验启示。结果:为农村地区培养卫生人才的常见措施包括:招收农村背景学生、导师制医学培养、农村卫生机构实习、经济激励措施、毕业后强制农村服务。对我国的启示包括:充足的财政资金是保证项目顺利实施的先决条件;做好项目管理和评价工作可以提高项目实施效果;选择合适的做法组合实施此类项目可以提高其效果。结论:订单定向免费医学生培养政策适合当前我国国情,同时不少国外经验值得我们借鉴:加大资金投入,加强管理和评价,加强部门合作,进一步完善订单定向医学生培养。