Innate immunity of surfactant protein A and D in urinary tract infection with uropathogenic Escherichia coli

Objective To investigate the role of surfactant protein (SP) - A and SP - D in urinary tract infection mouse model, and evaluate the effects of SP-A and SP-D absence on urinary tract infection. Methods SP-A and SP-D double knockout (SP-A/D KO) mice were made. SP-A/D KO and wild-type (WT) C57BL/6 female mice were used for this study. The expression of SP-A and SP-D in kidney was detected by immunohistochemistry (IHC). The levels of p - p38 and p38 protein in kidneys were measured by Western blotting. Uropathogenic Escherichia coli or buffer was delivered into the bladder of female mice. At 24 and 48 h after inoculation, CFU of Escherichia coli in the kidney and urine of the treated and control mice were measured. Histological, cellular and molecular analysis were performed by several methods of H/E staining, IHC and Western blotting. The effects of SP-A and SP-D on bacterial growth were studied in vitro. Results SP-A and SP-D in kidney were located in the proximal tubules and collecting tubules. Compared with WT mice, infected SP - A/D KO mice with UPEC had higher CFU in kidneys and urine at 24 h and 48 h, increased inflammatory cells infiltration in kidneys（P＜0.05）. Compared with WT mice, SP - A/D KO mice had higher p38 MAPK phosphorylation levels in kidneys（P＜0.05）. Growth of Escherichia coli was greatly inhibited by both SP-A and SP-D（P＜0.05）. Conclusions Both SP-A and SP-D are expressed in kidney. SP-A and SP-D can attenuate UTI induced by UPEC which may be through inhibiting bacterial growth and modulating renal inflammation.     

Logistic回归分析食管静脉曲张破裂出血的危险因素*

目的 探讨与肝硬化食管静脉曲张破裂出血（EVB）相关的危险因素,寻找一种有效预测EVB发生的无创检测指标。方法 回顾性分析168例肝硬化患者的临床资料,其中出血85例,非出血83例,对可能影响EVB发生的临床指标进行分析,将有显著性差异的因素进行单因素Logistic回归分析,然后对两组中有统计学意义的因素进行多因素非条件Logistic回归分析。结果 两组患者性别、年龄、病因分布差异均无统计学意义（P＞0.05）;出血患者门静脉直径（DPV）、脾静脉直径（DSV）和脾脏指数（SI）分别为（1.48±0.28） cm、（1.08±0.19） cm和（72.54±16.69）cm2,显著高于非出血组[分别为（1.34±0.29） cm、（1.18±0.25） cm和（66.98±19.21） cm2,P＜0.05];出血患者血Na+和血小板/脾长径比值分别为（139.45±3.41） mmol/L和（5.05±2.07）×109/L?cm-1,显著低于非出血组[分别为（140.66±4.41） mmol/L和（8.99±4.36）×109/L?cm-1,P＜0.05];出血组Child-Pugh分级与非出血组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;单因素Logistic回归分析显示两组间DPV、DSV、血小板计数与脾脏长径比值和Child-Pugh分级差异均有统计学意义（OR值分别为6.832、7.283、0.655、2.129,P＜0.05）,多因素非条件Logistic回归分析显示血小板计数与脾脏长径比值（OR=0.685,P=0.000）是肝硬化患者发生EVB的独立危险因素。结论 血小板计数与脾脏长径比值可作为肝硬化患者发生EVB的无创预测指标。     

Ｔ１ρ－ＭＲＩ 技术评价腰椎不同内固定方式对相邻节段椎间盘退变的影响

【目的】应用Ｔ１ρ－ＭＲＩ技术定量评价后路腰椎椎间融合固定术（ＰＬＩＦ）与棘突间动态固定术（ｗａｌｌｉｓ）对相邻节段椎间盘退变的影响,并分析退变的相关因素。【方法】 通过前瞻性研究方法,选取Ｌ４／５退变性失稳患者４２例,按随机数字法将患者随机分为ＰＬＩＦ组和Ｗａｌｌｉｓ组,分别为２２例和２０例。通过Ｔ１ρ－ＭＲＩ技术以及拍摄Ｘ线片,测量固定节段上位相邻节段椎间盘髓核Ｔ１ρ值、椎间盘高度、椎间隙动态角度变化,并通过ＪＯＡ评分及腰功能障碍指数（ＯＤＩ）评价临床效果。终末评估时间设为术后２４个月。【结果】４２例患者均获得随访,Ｗａｌｌｉｓ组手术时间及出血量均少于ＰＬＩＦ组,且差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。末次随访,两组ＯＤＩ、ＪＯＡ评分改善率以及Ｌ３／４节段影像学退变率均无显著性差异（Ｐ＞ ０．０５）;但两组Ｌ３／４椎间盘Ｔ１ρ值末次随访均存在下降趋势,且ＰＬＩＦ变化值明显大于Ｗａｌｌｉｓ组,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 与ＰＬＩＦ术式相比,棘突间动态固定（Ｗａｌｌｉｓ）具有出血少、用时短等优点,且可显著延缓上位相邻节段椎间盘髓核中ＰＧ退变趋势,但两者临床效果无显著性差异。     

运用三色ＦＩＳＨ技术确定自然流产夫妇染色体微小区域倒位

摘要： 【目的】 对２例婚后妻子连续２次流产伴２１号染色体结构改变病例进行多探针荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）,探讨ＦＩＳＨ技术在临床诊断微小区域染色体结构异常的应用价值。【方法】通过染色体常规Ｇ 显带技术初步确定染色体结构异常类型及染色体断裂的区带位置,然后挑选位于２１号染色体长臂位点特异性ＢＡＣ克隆,缺口平移法将其标记为探针,与２１号染色体长臂末端的商品化探针混合,进行三色ＦＩＳＨ。【结果】ＦＩＳＨ结果排除了涉及其它染色体结构异常的可能,确定这２例均为２１号染色体长臂微小区段的臂内倒位,这是首次关于２１号染色体臂内倒位导致自发流产病例的报道。【结论】２１号染色体臂内倒位与自然流产相关;多色ＦＩＳＨ 技术在诊断和确定微小区域染色体结构异常中有非常重要的作用和应用价值。     

ＣＤ４５单抗介导的淋巴瘤荷瘤裸鼠三步法预定位放免显像

摘 要： 【目的】 评价生物素化ＣＤ４５单抗介导的９９ｍＴｃ－生物素在人Ｒａｊｉ细胞移植瘤裸鼠模型中三步法预定位放免显像的价值。【方法】 ＣＤ４５单抗及ＤＴＰＡ－生物素的９９ｍＴｃ标记采用直接标记法。取人Ｒａｊｉ细胞移植瘤裸鼠１８只,随机分为２组,每组９只。实验组为三步法预定位放免显像组,静注生物素化ＣＤ４５单抗１００ μｇ,４８ ｈ后静注亲和素２００ μｇ,再过４８ ｈ静注９９ｍＴｃ－生物素７．４ ＭＢｑ（２０ μｇ）;对照组为９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗放免显像组,静注９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗１００ μｇ。上述两组裸鼠分别于注药后３、６、１２ ｈ分别进行ＳＰＥＣＴ显像,每个时间点各取３只裸鼠断颈处死后,取脏器组织及肿瘤,称重后在γ计数仪中测量放射性计数,经放射性衰变校正后计算各脏器的％ＩＤ／ｇ及肿瘤／非肿瘤（Ｔ／ＮＴ）比值。【结果】平均每分子ＣＤ４５单抗约结合１２分子生物素,ＣＤ４５单抗及ＤＴＰＡ－生物素的９９ｍＴｃ标记率分别＞７０％和＞８０％。三步法给药后荷瘤裸鼠ＳＰＥＣＴ显像及生物分布示：整个显像期间血池内放射性均较低,肝脾见较多放射性浓聚;注射标记物后３－６ｈ,肿瘤显影清晰,并持续到１２ ｈ;注药后３、６和１２ ｈ肿瘤的％ＩＤ／ｇ分别为１．７３ ± ０．２２、１．２４ ± ０．０３和０．９４ ± ０．０７;肿瘤／血液比值分别为３．５、４．９和７．８;肿瘤／肌肉比值分别为８．２、８．９和１０．４。而静注９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗后则可见肝脾及肾脏明显放射性聚集,１２ｈ血池内见较多放射性分布,肿瘤部位见有少量放射性集聚,１２ ｈ肿瘤的％ＩＤ／ｇ为０．８９ ± ０．１３,肿瘤／血液及肿瘤／肌肉的比值分别为１．６和２．５。【结论】与９９ｍＴｃ－ＣＤ４５单抗相比较,９９ｍＴｃ－生物素三步法预定位放免显像明显改善肿瘤Ｔ／ＮＴ比值,标记物注射后３ ｈ即可使肿瘤显影。     

右旋美托咪啶对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制

【目的】 探讨右旋美托咪啶在脑缺血再灌注损伤中的保护作用和相关机制。【方法】 ４２只雄性ＳＤ大鼠随机分为３组,每组１４只：右旋美托咪啶组（Ｄｅｘ）采用右旋美托咪啶５ μｇ·ｋｇ－１·ｈ－１恒速输注２ ｈ;拮抗剂组（Ｄｅｘ＋Ｙｏｈ）于开启注射泵前１０ ｍｉｎ经尾静脉输注拮抗剂育亨宾１ ｍｇ／ｋｇ,余用法同上组;对照组（Ｃｏｎ）以同等速度输注生理盐水２ｈ。所有大鼠行大脑中动脉栓塞术,缺血９０ ｍｉｎ后再灌注。观察术后２４ ｈ神经功能评分、脑梗死体积、水肿指数以及脑组织白介素（ＩＬ）－１β、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）－α水平、核蛋白ＮＦ－κＢｐ６５表达量。 【结果】再灌注２４ｈ后,脑梗死体积的比较显示Ｄｅｘ组（１７ ± ２．８）％较Ｄｅｘ＋Ｙｏｈ组（３８ ± ４．９）％与Ｃｏｎ组（４２ ± ５．７）％明显减小（Ｐ ＜ ０．０５）,水肿指数比较显示Ｄｅｘ组（１．０２１ ± ０．０９８）较Ｄｅｘ＋Ｙｏｈ组（１．３４２ ± ０．１３７）与Ｃｏｎ组（１．４１７ ± ０．１０５）显著降低,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。脑组织ＩＬ－１β、ＴＮＦ－α及ＮＦ－κＢｐ６５蛋白表达量的比较均显示Ｄｅｘ组较Ｄｅｘ＋Ｙｏｈ组与Ｃｏｎ组明显下降（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 右旋美托咪啶通过抑制ＮＦ－κＢ通路的激活减少促炎因子的产生,对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

外源性硫化氢通过抗氧化应激逆转过氧化氢诱导的 人脐静脉内皮细胞衰老

摘 要： 【目的】探讨硫化氢（Ｈ２Ｓ）对过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导的人脐静脉内皮细胞衰老的影响及其抗氧化机制。【方法】建立Ｈ２Ｏ２诱导的人脐静脉内皮细胞衰老模型,采用不同浓度的硫氢化钠（ＮａＨＳ）预处理内皮细胞,观察其对衰老的作用。【结果】与对照组相比,６０ μｍｏｌ／Ｌ Ｈ２Ｏ２预处理后,能显著提高细胞ＳＡ β－ｇａｌ阳性率和血浆纤溶酶原激活物抑制剂－１（ＰＡＩ－１）的表达,同时增加丙二醛（ＭＤＡ）含量,但减少过氧化物歧化酶１（ＳＯＤ１）的表达。而ＮａＨＳ的预处理可以显著减少细胞ＳＡ β－ｇａｌ阳性率和ＰＡＩ－１的表达,减少ＭＤＡ的含量,增加ＳＯＤ１的表达。【结论】ＮａＨＳ可以逆转Ｈ２Ｏ２诱导的内皮细胞衰老,其机制与抗氧化应激有关。     

透明细胞性肾细胞癌在不同组织学分类中的比较研究

比较2004年WHO肾细胞癌组织学分类标准与1997年WHO及更早的分类标准的异同,总结常见的诊断差异及可能原因,纠正及更新对肾细胞癌的传统病理分类的观念。方法:收集天津医科大学肿瘤医院2004年2月至2008年2月间,根治性肾切除术后病理诊断为透明性肾细胞癌249例,按2004年WHO肾癌组织学分类标准重新分类,并收集相关临床资料进行分析。结果:原分类法的249例透明细胞癌,经重新分类后,发现透明细胞癌176例,乳头状肾细胞癌42例,嫌色细胞癌5例,多房性囊性肾细胞癌3例,混合型肾细胞癌23例（透明细胞癌+乳头状肾细胞癌21例,乳头状肾细胞癌+嫌色性肾细胞癌2例）。结论:部分乳头状肾细胞癌与嫌色肾细胞癌过去易被诊断为透明细胞癌,两者具有相似的胞浆特点,及对其组织学特点认识不清是其主要原因;中国人乳头状肾细胞癌的发病率与国外相近,且其亚型的分类及诊断有待进一步的研究。      

兔胸腔内注射滑石粉致肺及肺外全身系统性播散

【目的】 观察不同颗粒大小滑石粉胸膜固定术后肺及肺外器官的播散变化,以初步探讨滑石粉相关急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）的发生机制。【方法】 建立滑石粉胸膜固定术的实验动物模型,将３６只健康雄性清洁级新西兰白兔按随机数字表法分为３组：大滑石粉组（ｎ＝ １２）、小滑石粉组（ｎ ＝ １２）和多西环素（Ｄｏｘｙｃｙｃｌｉｎｅ）组（ｎ ＝ １２）。实验动物经胸腔导管各注入大、小滑石粉匀浆（４００ ｍｇ／ｋｇ）和多西环素（１０ｍｇ／ｋｇ）,引起兔子右侧胸膜炎症及粘连。分别于胸膜粘连术后２４ ｈ和第７天处死半数实验动物,解剖留取双肺、肝、肾等器官,评价大体胸膜粘连程度、镜下病理变化及滑石粉播散情况。【结果】胸膜内注射粘连剂７ ｄ后,在大、小滑石粉组和Ｄｏｘｙｃｙｃｌｉｎｅ组均可引起明显的脏层胸膜的纤维化。胸膜纤维化指数在大滑石粉组为２．５ ± ０．８,小滑石粉组为１．８ ± ０．８,Ｄｏｘｙｃｙｃｌｉｎｅ组为２．２ ± ０．４,三组之间没有统计学差异（Ｐ ＞ ０．０５）。滑石粉胸腔内注射后,在大、小滑石粉组均有双侧肺内滑石粉的播散,而Ｄｏｘｙｃｙｃｌｉｎｅ组没有观察到滑石粉颗粒的播散。小滑石粉组的肺及肺外器官滑石粉颗粒数明显多于大滑石粉组。大、小滑石粉组的肺及肺外器官播散滑石粉颗粒同样为小直径的滑石粉颗粒。部分小滑石粉组实验动物可观察到滑石粉肺内播散伴有周围肺泡及间质的炎症改变。 【结论】 胸腔内注射小滑石粉较大滑石粉导致更显著的包括双肺、肾脏、脾脏等全身器官的小直径滑石粉颗粒播散。肺内滑石粉颗粒的沉积,可导致周围肺泡的炎症。     

海洛因成瘾患者的大脑白质结构网络的拓扑特性

【目的】 探讨海洛因成瘾患者的大脑白质结构网络的拓扑特性。【方法】 采集２０例海洛因成瘾者及１７例健康对照组的扩散张量成像和大脑高分辨率解剖结构像,利用纤维追踪技术和图论模型,构建了每个被试的大脑白质结构网络,计算大脑网络的拓扑特性。【结果】 在全局参数上,海洛因成瘾者的大脑网络的最短路径长度显著低于健康对照组,全局效率高于健康对照组（Ｐ ＜ ０．０５）;在节点参数上,海洛因成瘾者的节点效率显著增加 （Ｐ ＜ ０．０５）,这些显著增加的脑区主要分布在控制系统和感觉运动系统。【结论】 海洛因成瘾患者的大脑结构网络的拓扑属性发生了显著改变。利用图论的方法可以便于我们探测海洛因成瘾所致的大脑结构网络变化,为探索成瘾所致的大脑连接的变化提供了一个有效的工具。