肿瘤相关成纤维细胞促进肺癌细胞表达PD-L1

背景与目的 肿瘤相关成纤维细胞(tumor-associated fibroblasts,TAF)是肿瘤微环境的重要组成部分,可抑制免疫细胞的功能.在肿瘤免疫中CD8+T细胞发挥重要的作用,T细胞膜表面程序性死亡因子1(programmed death factor 1,PD-1),与其配体PD-L1(programmed death factor ligand 1,PD-L1)结合对T细胞的激活起负调节作用.本研究旨在探讨TAF对肺癌细胞PD-L1表达的影响.方法 我们以肺癌细胞株H1975、H520和TAF细胞进行Transwell非接触式共培养48 h的H1975、H520细胞为实验组,单独培养的H1975、H520细胞为对照组,两组培养条件一致.倒置显微镜计数实验组和对照组H1975、H520细胞数、流式细胞仪分别检测实验组和对照组肺癌细胞PD-L1的蛋白表达率、RT-PCR分别检测实验组和对照组肺癌细胞PD-L1 mRNA的表达.结果 每100μm2细胞计数,H1975细胞实验组为(46±21)个,对照组为(16±5)个(P<0.05);H520细胞实验组为(38±10)个,对照组为(12±5)个(P<0.05).PD-L1蛋白表达率,H1975细胞实验组为(20.93%±3.54%),对照组为(12.58%±2.52%)(P<0.05);H520细胞实验组(19.26%±3.04%),对照组为(11.60%±2.65%)(P<0.05).mRNA表达水平,H1975细胞实验组为(16.45±1.25)pg/mL,对照组为(7.78±1.27)pg/mL(P<0.05);H520细胞实验组为(15.38±2.02)pg/mL,对照组为(7.20±1.58)pg/mL(P<0.05).结论 TAF促进肺癌细胞株H1975、H520的生长,增强细胞株PD-L1表达.     

积雪草甙、羟基积雪草甙对体外培养人胚胎成纤维细胞的影响

目的研究积雪草甙（asiaticoside,Ad）和羟基积雪草甙（madecassoside,Md）对体外培养人胚胎成纤维细胞（Human embryonic skin fibroblasts,HESFb）增殖过程的影响。方法在不同浓度（0μg/ml、10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml）Ad和Md的环境下对人胚胎细胞进行体外培养,用CCK-8试剂盒通过酶标仪检测不同培养时间（0、1、2、3、4、5d）HESFb的OD值,用SPSS13.0统计软件进行统计分析。结果在实验时间内Ad和Md在10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml浓度时均对人胚胎成纤维细胞的增殖有促进作用,200μg/ml浓度时最明显,且Ad比Md作用强。两组在400μg/ml浓度时均有抑制作用。结论在一定浓度和培养时间内一定剂量的Ad和Md对体外培养的HESFb增殖有促进作用,同剂量相比Ad比Md明显。而较高剂量的时候均可出现抑制作用。     

阻断EGFR影响肺鳞癌肿瘤微环境Treg细胞及IL-1A表达

背景与目的 精确靶向表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的治疗在肺鳞癌、口腔和肠胃癌中取得了一定疗效,但会引发系统性炎症.本实验旨在探究EGFR抑制剂治疗癌引发的肿瘤内部免疫变化.方法 我们通过含H-ras基因逆转录病毒转染EGFR基因缺失或野生型小鼠角质细胞,将改造的细胞同源移植至小鼠以成瘤,吉非替尼治疗荷瘤小鼠,流式细胞仪检测T细胞比例与程序性死亡受体1(programmed death 1,PD-1)表达,RT-PCR检测细胞因子与趋化因子的表达.结果 敲除EGFR基因形成的肿瘤较野生型小,并且肿瘤微环境中浸润FoxP3+调节性T细胞(regulatory cells,Treg)细胞较少,FoxP3 RNA较少,程序性死亡受体1(programmed death 1,PD-1)阳性CD4+细胞比例降低.表明肿瘤细胞可以自主调节肿瘤微环境.野生型成瘤模型使用吉非替尼治疗1周显示,相对于对照组肿瘤较小;在这短期的药理模型中,同样观察到FoxP3+细胞、FoxP3 RNA减少的趋势,同时IL-1A/IL-1RA比例明显升高,表明相对短暂的系统性抑制EGFR信号通路可改变靶向肿瘤的免疫微环境.结论 肿瘤细胞自发(基因)或系统性(药理作用)的抑制EGFR信号通路可减少肿瘤的生长和肿瘤微环境中Treg的渗透.EGFR依赖性Treg细胞增强肺鳞癌的生长,是EGFR抑制剂治疗的靶标.