人resistin基因原核表达载体构建和表达

[目的]构建人resistin基因原核表达载体并观察其表达,为开展对resistin的研究打下实验基础.[方法]酚氯仿一步法从一位2型糖尿病合并胆管癌患者腹壁皮下脂肪组织抽取总RNA,RT-PCR法扩增出re-sistin基因cDNA,经测序后,PCR产物亚克隆入T载体,用EcoRI和KpnI分别酶切重组T质粒和原核表达载体pGENKS,然后resistin基因片段和表达载体通过T4DNA连接酶进行定向连接,用核酸内切酶EcoRI、KpnI酶切和测序方法鉴定出重组表达质粒.重组表达质粒转化大肠杆菌JM109,经1 mmol/LIPTG在32℃诱导表达2 h,裂解细菌,进行PAGE凝胶电泳鉴定融合蛋白的表达.[结果]RT-PCR扩增产物分子大小为327 bp,序列分析表明为人resistin基因完整编码区.PCR产物与T载体连接、转化大肠杆菌后,从细菌质粒中酶切回收了目的片段.重组表达质粒经EcoRI和KpnI双酶切后能产生出327 bp、4 980 bp大小的两个片段,序列分析表明重组表达质粒包含人resistin基因完整编码区,基因编码无移位,PAGE凝胶电泳表明在细菌裂解上清有分子质量为39.5 kD的融合蛋白.[结论]成功构建了人resistin基因原核表达载体,且构建的载体能表达出含目的蛋白的融合蛋白,为下一步研究打下了实验基础.     

广州社区居民骨质疏松危险因素分析

目的：了解广州社区居民骨质疏松的危险因素。方法：研究对象选自2015年收集的2498名广州社区人群。使用标准问卷收集有关生活方式、病史、社会人口学特征和家族史信息。使用临床超声骨密度仪测量其根骨的骨矿物质密度。应用多元逻辑回归分析计算优势比（OR）和95%置信区间（CI）。结果：骨质疏松与年龄、教育水平、维生素D摄入量、体力活动水平、体重、颈围、腰围和总胆固醇水平有关。其中体重增加与骨质疏松风险呈负相关。男性人群勃起功能障碍者骨密度更低。更年期是女性人群发生骨质疏松的独立危险因素。结论：不同性别人群的骨质疏松危险因素不同。高体重状态是骨质疏松的保护因素。男性勃起功能障碍及更年期女性伴随骨质疏松高发。     

BED捕获酶联免疫法检测广西某吸毒监测哨点HIV新近感染率

目的 了解广西某吸毒监测哨点注射吸毒人群(injection drug users,IDU)的HIV新近感染情况,估算HIV新近感染率.方法 对广西某吸毒监测哨点2005-2007年787份血清样本进行监测,以酶联免疫吸附试验(ELISA)筛检出168份HIV-1阳性样本,再经BED捕获酶联免疫法(BED capture enzyme immunoassay,BED-CEIA)检测出其中新近感染的样本共17份,获得该人群HIV-1的新近感染率.结果 787份监测样本中共筛检出HIV-1确认阳性样本168份,新近感染样本17份.该哨点2005-2007年HIV感染率分别为23.06%(92/399)、21.90%(46/210)、16.85%(30/178),新近感染率分别为7.41%、6.94%、3.12%.结论 在广西某吸毒监测哨点IDU中,2005-2007年HIV新近感染率绝对数值有所降低,已发现的HIV感染者可能部分为既往感染者.     

两种方法测定尿游离皮质醇的结果分析

目的 比较分析化学发光免疫测定法(CLIA)和酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定尿游离皮质醇(UFC)结果.方法 用上述两种方法分别测定68例住院病人(肾上腺疾病20例,非.净上腺疾病48例)2 4小时UFC,结果进行配对t检验和相关分析.结果 两种方法检测UFC的结果无统计学差异(t=0.023,P>0.05),两者具有良好的相关性(r=0.85),且与临床诊断符合率高.但在UFC浓度大于1000nmol/L时两结果有一定差别.结论 两种方法均可用于检测UFC,CLIA实现了自动化,具有方便、快速、无毒等优点.     

自身免疫性甲状腺疾病患者血清C1q抗体的变化

[目的]了解自身免疫性甲状腺疾病患者血清C1q抗体水平,探讨血清C1q抗体水平与甲状腺功能、甲状腺自身抗体的关系.[方法]采用ELISA方法测定28例Graves病患者(GD组)、34例慢性淋巴细胞性甲状腺炎患者(CLT组)和27例正常对照(CON组)血清C1q抗体水平.[结果]CON组、GD组和CLT组血清C1q抗体水平分别为:3.130(2.773～3.833) U/mL、4.625(2.888～11.798)U/mL和3.125 (2.750～4.625) U/mL.GD组的C1q抗体水平显著高于CON组(P＜0.05),阳性率也显著高于CON组(46.4％ vs 7.4％,P＜ 0.05);C1q抗体水平与TRAb水平呈正相关(r=0.436,P=0.029).CLT组C1q抗体与TT4水平呈负相关(r=-0.351,P=0.045).[结论]本研究Graves病患者血清C1q抗体水平显著升高,与TRAb呈正相关;慢性淋巴细胞性甲状腺炎患者血清C1q抗体水平与血清甲状腺素水平呈负相关.     

不同糖耐量者血清游离脂肪酸与胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能的关系

比较不同糖耐量者空腹、糖负荷后30min及120min血清游离脂肪酸水平、各时间点游离脂肪酸与胰岛素抵抗以及胰岛β细胞功能的相关性。结果显示3组间空腹及糖负荷后游离脂肪酸水平差异有统计学意义，空腹、糖负荷后30min及120min游离脂肪酸水平与胰岛素分泌功能以及胰岛素敏感性指数呈负相关。提示游离脂肪酸对胰岛β细胞功能和胰岛素敏感性存在负面、毒性作用。     

代谢综合征患者血清和尿皮质醇水平与心血管危险因素的关系

目的 初步探讨代谢综合征患者血清和尿皮质醇水平与心血管危险因素的关系。方法对78例代谢综合征患者进行回顾性研究。结果晨8：00时血清皮质醇水平与BMI、腰围、臀围、腰臀比、收缩压、舒张压、空腹和OCTT2h血糖、空腹和OGTT2h胰岛素、胰岛素抵抗稳态模型评估（HOMA-IR）、空腹血清胆固醇、HDL-C、LDL-C、TG、Apo-A1、Apo-B、血清尿酸和尿白蛋白排泄率均不相关,而24h尿游离皮质醇水平则与BMI、腰围、臀围、收缩压、空腹胰岛素、HOMA-IR和TG呈正相关。结论代谢综合征患者24h尿游离皮质醇水平与心血管危险因素相关。     

原发性醛固酮增多症患者钙磷代谢情况及其与成纤维生长因子23相关性分析

目的比较原发性醛固酮增多症(PA)和原发性高血压(EH)患者钙磷代谢和成纤维生长因子23(FGF23)水平的差异,探讨二者的相关性。方法选择因"高血压查因"住院确诊的资料完整的病例,按性别、年龄、高血压水平及其病程等匹配原则纳入123例PA患者和123例EH患者,比较两组患者的钙磷代谢指标的差异并分析其与FGF23的关系。结果 (1)PA组的FGF23、PTH水平高于EH组,分别是271.31 pg/m L(173.91,504.34)vs 160.41 pg/m L(118.08,235.60)和74.5 pg/m L(46.5,91.0)vs.43.60 pg/m L(33.75,60.25),其差异具有统计学意义(P0.001),但血钙、血磷水平低于EH组(2.18±0.17 mmol/L vs.2.33±0.17 mmol/L和1.013±0.204 mmol/L vs.1.127±0.190 mmol/L,P0.001)。(2)PA组中FGF23与与血磷水平呈负相关(r=-0.502,P=0.001),与PTH水平呈正相关(r=0.349,P=0.030)。(3)PA组中随着醛固酮水平的递增,FGF23呈上升趋势(P0.05)。结论 PA患者FGF23水平显著上升,FGF23水平与血磷和PTH水平相关,且FGF23与高醛固酮水平相关。     

2型糖尿病一级亲属正常糖耐量者胰岛β细胞功能的变化

胰岛素抵抗(IR)和胰岛素分泌缺陷是2型糖尿病(DM)发病机制的两个主要环节，但两者对糖耐量的影响，可因遗传及环境等因素而不同，关于IR与胰岛素分泌缺陷各自在2型DM发病机制中的地位长期以来一直争执不休。本研究探讨了2型DM一级亲属糖耐量正常(NGT)者与无DM家族史的NGT者的胰岛素分泌功能及胰岛素敏感性的变化，以了解它们在2型DM发病机制的作用。     

妊娠期糖代谢异常与血糖正常孕妇胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能的比较

目的 观察正常孕妇及糖代谢异常孕妇在妊娠早、中、晚期胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能的变化规律,比较不同糖代谢状态相应孕期胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能的差别,探讨妊娠期糖尿病(GDM)早期诊断的可行性.方法 2009年2月至2010年3月在中山大学孙逸仙纪念医院进行早孕安胎、优生咨询及定期产检的507例孕妇,排除妊娠前患有糖尿病、甲状腺功能亢进症等内分泌疾病者,进行前瞻性研究.对受试者给予75 g口服葡萄糖耐量试验(OGTF)及胰岛素释放试验,根据血糖是否异常分为GDM早孕组(58例),早孕对照组(72例),GDM中孕组(81例),中孕对照组(164例),GDM晚孕组(66例),晚孕对照组(66例).分别比较各组稳态模型评估的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、稳态模型评估的胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、血糖曲线下面积(AUCG)、胰岛素曲线下面积(AUCI)、早期胰岛素分泌指数( △I30/△G30)、混合胰岛素敏感度(ISIcomp).结果 (1)GDM早孕组AUCG、AUCI均高于早孕对照组,AI30/△G30及ISIcomp低于早孕对照组(P＜0.05),而HOMA-IR差异无统计学意义(P＞0.05);GDM中孕组及GDM晚孕组HOMA-IR、AUCG均高于相应对照组,△I30/△G30及ISIcomp均低于相应对照组(P＜0.05),各组的HOMA-β差异均无统计学意义(P＞0.05).(2)血糖及胰岛素释放曲线显示,早、中、晚孕正常对照组服糖后0.5h血糖水平达峰值,服糖后0.5～1h胰岛素水平达峰值,而GDM早、中、晚孕组服糖后1h血糖水平达峰值,服糖后2h血胰岛素水平达到峰值.结论早期妊娠与中、晚期妊娠诊断的GDM患者胰岛素抵抗均较相应孕期正常妇女增高,且OGTT后血糖及胰岛素峰值延迟,GDM患者妊娠早期即出现了胰岛素早期分泌功能受损.对高危人群在早期妊娠行OGTT可及早发现糖代谢异常.