瑶族复方山茶油对变应性接触性皮炎小鼠的作用及机制研究

目的:探讨瑶族复方山茶油(SCY)对变应性接触性皮炎(ACD)小鼠的作用及其机制.方法:将60只3周龄BALB/c小鼠按随机数字表法分为6组,每组10只,分别为正常对照组,模型组,瑶族复方山茶油高、中、低剂量组(SCY-H、SCY-M、SCY-L)和氢化可的松阳性对照组.采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导小鼠ACD...     

荔枝核总黄酮对大鼠HSC-T6差异表达蛋白的筛选及生物信息学分析

目的 通过数据非依赖采集(DIA)技术筛选荔枝核总黄酮(TFL)对大鼠肝星形细胞T6细胞株(HSC-T6)的差异表达蛋白,并进行对差异蛋白进行鉴定和生物信息学分析.方法 大鼠随机分为模型对照组和TFL实验组,分别给予相应干预后取大鼠的血清.药物和含药血清干预肝星形细胞后,提取细胞蛋白,通过DDA谱图库结合DIA技术的方...     

中药治疗肝纤维化的用药规律研究

目的 探讨中药治疗肝纤维化的用药规律.方法 通过中国知网筛选以中药治疗肝纤维化的方剂,并应用中医传承辅助系统软件建立数据库并分析中药治疗肝纤维化的用药规律.结果 共筛选出133首方剂,193味中药.使用频次前10名的中药为丹参、黄芪、柴胡、赤芍、白术、白芍、鳖甲、当归、茯苓、甘草.药性以寒性、温性及平性为主,药味以苦味...     

基于网络药理学的荔枝核抗肝纤维化作用机制研究

目的 运用网络药理学探讨荔枝核抗肝纤维化的作用机制。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台检索荔枝核的有效活性成分,采用Perl软件对荔枝核有效成分的作用靶点进行预测。通过GeneCards?和OMIM?数据库获取肝纤维化相关靶点,将其与荔枝核有效成分的作用靶点取交集,得到荔枝核-肝纤维化靶点。利用CytoScape软件构建“中药-活性成分-基因靶点-疾病”网络。针对荔枝核-肝纤维化靶点,构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络并筛选核心基因,同时进行功能富集分析和通路富集分析。结果 (1)筛选得到8个荔枝核有效活性成分、87个有效活性成分的作用靶点、6 899个肝纤维化相关靶点,通过取交集得到79个荔枝核-肝纤维化靶点。(2)“中药-活性成分-基因靶点-疾病”网络提示荔枝核主要通过6种有效活性成分(甘露醇、β-谷甾醇、谷甾醇、豆甾醇、表儿茶素、槲皮素)作用于荔枝核-肝纤维化靶点发挥作用。(3)PPI网络共筛选出的30个核心基因。(4)荔枝核-肝纤维化靶点共参与101个生物学过程,涉及74条信号通路。结论 荔枝核可能通过甘露醇、β-谷甾醇、谷甾醇、豆甾醇、表儿茶素、槲皮素等有效活性成分,...     

基于数据挖掘的《济阴纲目》方剂用药特点研究

目的:探讨《济阴纲目》全书的用药组方规律,为传承其中学术思想提供参考。方法:录入《济阴纲目》中所载方剂,并运用SPSS18.0统计软件系对书中1130首方剂进行频数分析和聚类分析。结果:频数分析发现频数在50次以上的当归、川芎、人参等36味药为书中常用药物;对常用药进行聚类分析,发现高频药物可分为补益脾肺类、温中补血类、扶正驱邪类、清肝泻胆类共5类。结论:研究结果初步总结《济阴纲目》的用药特点及学术思想,为深入研究提供了数据支持。     

七方胃痛颗粒对人胃腺癌细胞的抑制作用及可能机制

目的 探讨七方胃痛颗粒对人胃腺癌细胞的抑制作用及可能机制。方法 用生理盐水将七方胃痛颗粒稀释并配制成浓度为2 g/mL的七方胃痛颗粒混悬溶液,对20只SD大鼠连续灌胃5 d后获取七方胃痛颗粒含药血清。将AGS细胞分为空白对照组、顺铂组、10%含药血清组、20%含药血清组、30%含药血清组,各组细胞给予相应药物干预48 h。采用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况,采用Western blot检测人表皮生长因子受体(HER)信号通路相关蛋白及其下游磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路相关蛋白的表达水平,采用实时荧光定量PCR检测上述蛋白对应基因的mRNA表达水平。结果 与空白对照组相比,20%含药血清组AGS细胞的中晚期凋亡率升高,30%含药血清组AGS细胞的中晚期凋亡率及总凋亡率升高,4个给药组AGS细胞的G₀/G₁期比例提高,S期比例降低(均P<0.05)。与空白对照组比较,10%含药血清组AGS细胞的HER4蛋白表达水平下降,20%含药血清组AGS细胞的表皮生长因子受体(EGFR)、HER4蛋白表达水平均下降,顺...     

基于JAK2/STAT3信号通路探讨荔枝核总黄酮对HepG2增殖、迁移与侵袭的影响

目的 观察荔枝核总黄酮（TFL）对人肝癌细胞HepG2株增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。方法 噻唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度TFL及顺铂对HepG2细胞增殖的影响；TdT介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测低、中、高质量浓度TFL（70、140、210 mg·L^-1）及顺铂（60 mg·L^-1）对HepG2细胞凋亡的影响，并选择TFL最优浓度进行后续实验。将细胞分为空白组、TFL组（140 mg·L^-1）、TFL+XL019组（140 mg·L^-1+0.5 μmol·L^-1）、TFL+TPI-1组（140 mg·L^-1+1 μmol·L^-1），进行细胞划痕实验和小室侵袭实验以验证TFL对HepG2迁移和侵袭的影响；使用细胞免疫荧光技术检测TFL对HepG2细胞上皮间充质转化（EMT）标记物表达的影响；使用蛋白免疫印迹法（Westem blot）对TFL干预后细胞内的酪氨酸蛋白激酶2（JAK2）/信号传导及转录激活因子3（STAT3）信号通路上关键蛋白的表达情况进行检测。结果 MTT比色法表明，与空白组比较，在24、48 h时，各质量浓度的TFL与顺铂均能显著抑制HepG2细胞增殖（P<0.01），24、48 h时TFL对HepG2的半抑制浓度（IC₅₀）分别为（136.7±2.40）、（106.8±1.11）mg·L^-1，24、48 h时顺铂对HepG2的IC₅₀分别为（58.48±2.04）、（5.15±0.56）mg·L^-1。TUNEL法发现各质量浓度TFL均可以诱导HepG2细胞凋亡，由此结果确定TFL 140 mg·L^-1为最佳质量浓度。细胞划痕实验表明，与空白组比较，TFL组、TFL+XL019组、TFL+TPI-1组均明显抑制HepG2细胞的迁移能力（P<0.05，P<0.01），与TFL组比较，TFL+XL019组的抑制作用明显增强（P<0.05），TFL+TPI-1组的抑制作用显著减弱（P<0.01）。小室侵袭实验表明，与空白组比较，TFL组、TFL+XL019组、TFL+TPI-1组干预都显著抑制了HepG2细胞的侵袭能力（P<0.01），与TFL组比较，TFL+XL019组的抑制作用明显增强（P<0.05），TFL+TPI-1组的抑制作用则显著减弱（P<0.01）。荧光免疫结果表明，TFL的干预上调HepG2细胞上皮-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达，同时下调波形蛋白（Vimentin）的表达，这种作用在TFL+XL019组中更强，在TFL+TPI-1组中则有所减弱；Western blot结果表明，与空白组比较，TFL组、TFL+XL019组、TFL+TPI-1组并未影响JAK2和STAT3蛋白的表达水平，但是明显降低磷酸化（p）-JAK2与p-STAT3表达水平（P<0.05，P<0.01），与TFL组比较，TFL+XL019组中的p-JAK2与p-STAT3的表达水平显著降低（P<0.01），TFL+TPI-1组中p-JAK2与p-STAT3的表达水平显著升高（P<0.01）。与空白组比较，TFL组显著增加了含sh2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶-1（SHP-1）表达水平（P<0.01）。结论 TFL可以抑制HepG2的增殖，促进其凋亡，还可以通过逆转HepG2细胞EMT的过程以减弱其迁移与侵袭的能力，这些作用可能与TFL激活SHP-1阻断JAK/STAT3信号通路相关。     

罗伟生教授从肝阳虚论治慢性乙型肝炎肝纤维化学术思想探微

<正>肝纤维化是多种慢性肝病向肝硬化发展的中间病理阶段,表现为肝组织细胞外基质(ECM)合成和沉积增加以及ECM降解减少或不平衡导致组织结构的异常改变,是慢性肝病过程中一种可逆的肝组织损伤过度修复反应^[1,2]。现代医学暂时缺乏治疗慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化的特效药物,主要以抗病毒治疗、护肝治疗以及定期复查为主,而中医药在抗肝纤维化方面具有着突出优势。罗伟生教授系全国名老中医,从事中医临床工作近四十余载,临床经验丰富,     

基于蛋白质组学的肝纤维化大鼠血清对肝星状细胞的作用靶点及信号通路研究

目的 研究体外的大鼠肝星状细胞(HSC)被纤维化大鼠血清激活的可能机制.方法 分别使用纤维化大鼠血清以及正常大鼠血清干预HSC 14 d后,提取两组HSC的全蛋白,使用label free的方法对其进行蛋白质组学分析,采用非数据依赖型的采集方法,比较得出差异蛋白,使用基因本体(gene ontology,GO)数据库、...     

基于网络药理学的鸡血藤抗肝纤维化机制研究

目的运用网络药理学探讨鸡血藤抗肝纤维化的分子生物学机制。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台检索鸡血藤的所有化学成分,并筛选鸡血藤中的活性成分。对筛选出的活性成分进行靶点预测、基因注释。采用GeneCards、OMIM数据库筛选肝纤维化相关的疾病靶点,通过取活性成分靶点和疾病靶点的交集获得鸡血藤抗肝纤维化的潜在靶点。针对鸡血藤抗肝纤维化潜在靶点,利用STRING数据库构建蛋白互作网络图,并进行基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。结果最终筛选出鸡血藤的活性成分24个及其对应靶点56个,肝纤维化的疾病靶点共6 899个。取交集后,获得鸡血藤抗肝纤维化的潜在靶点49个,其中度值排前5位的靶点依次为表皮生长因子受体、MYC、白细胞介素6、雌激素受体1和血管内皮生长因子。GO功能富集分析和KEGG通路分析结果显示,鸡血藤抗肝纤维化的潜在靶点参与了154个生物学过程、23个细胞成分和46个分子功能,涉及前列腺癌信号通路、人类巨细胞病毒感染信号通路、乙型肝炎信号通路、卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染信号通路、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路、EB病毒感染...