腹泻型肠易激综合征大鼠SCF/C-kit信号的变化及其与免疫功能的关系

目的探索腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠干细胞因子/酪氨酸激酶受体(SCF/C-kit)系统的变化及其与IBS-D免疫功能紊乱的相关性。方法 12只新生大鼠分为正常组和模型组,每组6只。模型组大鼠采用母婴分离、醋酸刺激、束缚应激三因素法制备IBS-D模型。免疫组化法检测两组大鼠结肠组织中SCF和C-kit的蛋白表达;q PCR法检测SCF和C-kit的mRNA表达;统计学分析SCF和C-kit的表达与IBS-D脾系数、胸腺系数、TNF-α、IL-8、IL-10的相关性。结果与正常组相比,模型组的SCF和C-kit的蛋白表达阳性率减少,同时二者的mRNA表达降低。SCF的表达与脾系数、TNF-α、IL-8呈负相关,与IL-10呈正相关;C-kit的表达与胸腺系数、脾系数、TNF-α呈负相关。结论 IBS-D大鼠SCF/C-kit系统异常,可能与IBS-D免疫功能紊乱有关。     

健脾祛湿膏对脾虚腹泻大鼠结肠P38 MAPK信号通路相关蛋白及细胞因子的影响

目的:探究健脾祛湿膏对脾虚腹泻大鼠P38 MAPK通路的作用.方法:采用冰番泻叶水煎液结合过度游泳复制脾虚腹泻大鼠模型,造模后给药干预14 d,ELSIA法检测血清IL-1β、TNF-α、IFN-γ及结肠MDA、SOD 水平,Western blot检测结肠P38 MAPK、MSK1、CREB蛋白表达;HE染色观察十二...     

疏肝健脾法肠激安方对IBS-D大鼠免疫功能的影响

目的:考察疏肝健脾法肠激安方对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠免疫系统的影响,探讨其调控IBS-D脑-肠轴异常的免疫学机制。方法:取正常SD大鼠采用母子分离、乙酸刺激结合束缚应激的方法制造IBS-D模型,造模成功后将大鼠随机分为模型组,匹维溴铵组(0.018 g·kg~(-1)),疏肝健脾中药肠激安高、中、低剂量组(33.48,16.74,8.37 g·kg~(-1)),每组6只,连续ig 14 d,另取同批次正常大鼠6只作为正常组,同法给予生理盐水。给药结束后观察各组大鼠的日进食量、糖水偏好情况、自主活动3种行为学特征,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中炎症因子白细胞介素-8(IL-8)和IL~(-1)0的含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测结肠中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及IL~(-1)βmRNA的表达,并测定胸腺系数和脾系数的变化。结果:与正常组比较,IBS-D模型组大鼠的日均进食量、糖水偏好率及自主活动均减少,血清IL-8含量及结肠中TNF-α,IL~(-1)βmRNA表达量明显升高,血清IL~(-1)0含量明显降低,胸腺系数和脾系数明显增高(P0.05);与模型组比较,各给药组日均进食量、糖水偏好率及自主活动回升,结肠中TNF-αmRNA水平降低,血清IL~(-1)0含量升高(P0.05),匹维溴铵组和肠激安高、中剂量组IL-8含量和结肠中IL~(-1)βmRNA水平显著降低(P0.05),而低剂量无统计学差异,各组胸腺系数显著降低(P0.05),脾系数呈降低趋势,但无统计学差异。结论:疏肝健脾法能够改善IBS-D大鼠的肝郁脾虚状态,并能够调节炎症因子的表达和一定程度地改善免疫器官功能,这可能是其调控IBS-D脑-肠轴功能异常、治疗IBS-D的作用途径之一。     

腹泻型肠易激综合征模型大鼠海马与结肠组织中细胞因子的含量变化及mRNA的表达

目的:探讨腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠海马与结肠组织中细胞因子白细胞介素1β(IL-1β),白细胞介素2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量变化及其mRNA的表达,初步分析脑-肠轴中细胞因子在IBS-D中的发病机制。方法:取健康SD大鼠30只,分为正常组和模型组,正常组10只,模型组20只。模型组复制IBS-D模型,造模成功后取模型大鼠和正常大鼠的海马和结肠组织制成石蜡切片,采用免疫组化染色法分析组织中IL-1β,IL-2和TNF-α的表达,同时采用RTq PCR法检测其海马与结肠组织中IL-1β,IL-2和TNF-αmRNA的表达。结果:与正常组比较,IBS-D模型组海马和结肠组织中IL-1β,IL-2和TNF-α均明显增加,且海马与结肠组织中的IL-1β,IL-2和TNF-α呈一定程度的相关性;IL-1βmRNA在IBS-D组大鼠海马组织中表达量明显增加,TNF-αmRNA在海马和结肠组织中表达量均明显增加(P0.05),IL-2 mRNA的表达水平无显著变化。结论:IL-1β,IL-2和TNF-α作为致炎介质,在IBS-D脑海马和结肠组织均异常表达,提示其作用机制可能是通过影响神经-内分泌-免疫网络而实现脑-肠轴功能的结构基础改变,进而导致IBS-D的发生和发展。     

牵引并超声正弦调制中频电治疗腰椎间盘脱出症

腰椎间盘脱出症是因为多种因素引起纤维环损伤 ,髓核突出 ,压迫神经根而引起的一系列症状[1] 。其主要临床表现为腰痛及下肢放射性牵涉痛 ,好发于青壮年 ,男性多于女性。临床以第四和第五腰椎、第五腰椎和第一骶椎之间的椎间盘突出为多见[2 ] 。以往的保守治疗方法多采用针灸或推拿。效果虽比较明显 ,但易反复。自 2 0 0 1年 5月至2 0 0 2年 4月共收治腰椎间盘脱出症 80例。采用先牵引从而调整腰椎的排列结构 ,再用超声———正弦调制中频电治疗 ,通过其热作用和理化作用从而达到止痛和消炎的目的。使向外膨隆或脱出的髓核可以消散吸收 ,神…     

疏肝健脾法对腹泻型肠易激综合征大鼠焦虑抑郁样行为及BDNF表达的影响

目的:检测疏肝健脾法肠激安方对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠焦虑抑郁样行为及脑源性神经营养因子(BDNF)的影响,探讨其改善IBS-D的作用机制。方法:采用"三因素"法(母婴分离+醋酸刺激+束缚应激)制备肝郁脾虚型IBS-D大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、匹维溴铵组、肠激安方高、低剂量组,另设正常组,各6只,连续给药14 d,正常和模型组给予等体积生理盐水。观察IBS-D大鼠的焦虑抑郁样行为和海马神经元形态,检测海马、结肠中BDNF的基因、蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组糖水偏好值、旷场实验相关指标水平减少(P0.05),海马、结肠组织中BDNF mRNA及蛋白表达升高(P0.05)。与模型组比较,肠激安方高、低剂量组的糖水偏好值、旷场实验相关指标水平升高(P0.05),海马、结肠组织中BDNF mRNA及蛋白的表达下降(P0.05)。结论:疏肝健脾法可明显改善IBS-D焦虑抑郁样行为,下调结肠、海马中BDNF表达水平,这可能是其改善IBS-D的作用机制之一。     

UHPLC-MS/MS同时检测IBS-D模型大鼠血浆中痛泻要方6种成分的含量及其药动学

目的：建立超高效液相色谱-质谱法（UHPLC-MS/MS）同时测定腹泻型肠易激综合征（IBS-D）模型大鼠血浆中6种成分（芍药苷、橙皮苷、新橙皮苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、升麻素）的分析方法,并研究这6种成分的药动学特征。方法：采用Phenomenex-C₁₈色谱柱（4.6 mm×50 mm,5 μm）,乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速0.7 mL·min^-1,ESI离子源,柱温35 ℃,SRM检测模式。结果：各成分的线性关系良好（r>0.9974）;精密度RSD<13.89%;血浆中无内源性基质干扰,稳定性良好。6种成分的达峰时间（t_max）分别为（0.5±0）,（0.36±0.06）,（0.33±0）,（0.44±0.08）,（0.31±0.13）,（0.67±0.26） h,半衰期（t_1/2）分别为（6.63±1.60）,（4.31±1.14）,（5.43±0.88）,（5.98±1.91）,（7.80±4.39）,（4.33±0.40） h,药峰浓度（C_max）分别为（145.42±9.81）,（166.11±4.83）,（167.69±2.98）,（46.29±3.88）,（18.98±1.85）,（374.71±7.54） ng·mL^-1。结论：该方法简便、灵敏、准确,分析速度快,可用于痛泻要方的药代动力学研究。     

UHPLC-MS/MS法同时测定肠激安方冻干粉中10种成分

目的 建立UHPLC-MS/MS法同时测定肠激安方(白芍、白术、黄芪等)冻干粉中芍药苷、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、橙皮苷、柚皮苷、升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、延胡索乙素的含量.方法 该药物70％甲醇提取液的分析采用Phenomenex-C18色谱柱(50 mm×2 m...     

HPLC法测定羌活中紫花前胡苷的含量

目的:建立HPLC法测定羌活中紫花前胡苷含量的方法。方法:HPLC条件:色谱柱为Agilent HC-C18柱(5μm,4.6×250mm),流动相为甲醇-水(32∶68),流速为1.0ml.min-1,检测波长为335nm,柱温为35℃。结果紫花前胡苷范围为4.00μg.ml-1～100.00μg.ml-1,平均回收率为99.90%,RSD为1.50%。结论:该法操作简单,重现性好,结果准确,可作为羌活中紫花前胡苷的含量测定方法提供参考依据。