VE-statin/Egfl7-siRNA抑制恶性胶质瘤诱导内皮细胞血管生成能力的体外研究

目的通过细胞培养及RNA干扰技术探讨类表皮生长因子域7(VE-statin/Egfl 7)在恶性胶质瘤血管生成中的作用和机制。方法Transwell培养技术建立U 251-HUVEC共培养系统,体外模拟恶性胶质瘤与内皮细胞的相互作用;并通过构建靶向VE-statin/Egfl7基因的siRNA慢病毒载体抑制U251和HUVEC细胞中该基因的表达。通过内皮细胞增殖、粘附、迁移及成管实验检测该基因在体外恶性胶质瘤微环境中对血管生成的影响。结果沉默VE-statin/Egfl 7基因表达后,HUVEC生长出现暂时性减缓,但很快恢复正常增殖状态,而且内皮细胞的迁移能力不受影响,但是内皮细胞的粘附能力明显受到抑制;成管实验发现,VE-statin/Egfl7基因沉默后内皮细胞不能形成毛细血管样结构。结论 VE-statin/Egfl7可通过调节内皮细胞的粘附性而在恶性胶质瘤血管生成过程的血管管腔形成过程中起着关键性调控作用。     

脊髓全横断大鼠神经生长因子和脑源性神经营养因子表达及三七皂苷的干预效应

目的:神经生长因子和脑源性神经营养因子同属神经营养素家族,在神经系统发育及维持正常神经元功能中有重要作用。实验拟证实脊髓全横断损伤三七皂苷对大鼠神经生长因子及脑源性神经营养因子蛋白水平的表达变化产生了影响。方法:实验于2005-06/09在昆明医学院神经科学研究所完成。①实验材料:清洁级健康雌性SD大鼠72只,质量(200±20)g;三七皂苷由云南植物药业提供。②分组及实验过程:大鼠被随机分为4组:假手术组、单纯脊髓全横断损伤组、脊髓全横断损伤 生理盐水(0.5mL/次)组、脊髓全横断损伤 三七皂苷(100mg/kg/次)组,每组18只。于T10水平横断大鼠脊髓,假手术组仅剪开硬脊膜而不损伤脊髓。后2组于术后30min,4,24,48,72h腹腔注射给药各1次。③实验评估:各组于术后3,7及21d分别取6只大鼠L1～2段脊髓制作冰冻切片,采用免疫组织化学ABC法染色。观察并计数脊髓腹角神经生长因子、脑源性神经营养因子蛋白的表达变化;常规苏木精伊红染色观察脊髓的组织病理变化。结果:72只大鼠全部进入结果分析:①脊髓全横断损伤后脊髓出现明显的神经变性坏死、炎性浸润等病理变化,三七皂苷可减轻这些变化。②神经生长因子蛋白主要分布于灰质神经元胞浆及胶质细胞胞核中。在正常脊髓有少量表达,脊髓损伤后7d表达明显升高,直到伤后21d仍高于假手术组(P<0.05);三七皂苷可明显促进其表达,伤后3,7d均明显高于其他各组(P<0.05),在21d时下降但仍高于假手术组(P<0.05)。③脑源性神经营养因子蛋白主要分布于腹角的运动神经元胞浆中,胶质细胞未见着色。在正常脊髓有少量表达,脊髓损伤后7d表达明显升高(P<0.05),伤后21d已下降,同假手术组相比差异无显著性(P>0.05);三七皂苷可明显促进其表达,伤后3,7,21d均明显高于所有对照组(P<0.05)。结论:三七皂苷可减轻脊髓横断性损伤后继发损害,增加神经生长因子、脑源性神经营养因子表达量及提前神经生长因子、脑源性神经营养因子表达时间,提示其可以促进脊髓损伤早期修复。     

扩大经蝶窦入路影像解剖

【目的】为扩大经蝶窦入路手术提供CT影像学解剖资料。【方法】对20具头颅标本行CT冠状位矢状位及轴位扫描,进行与扩大经蝶窦入路相关的颅底结构的观测。【结果】CT多方位扫描观测见筛顶和筛板呈高台和平移两种位置关系,后组筛窦、蝶窦与视神经管关系分为蝶窦优势型、蝶筛均势型及筛窦优势型,以蝶窦优势型占多数(60%)。蝶嵴至双侧视神经管眶口垂直距离相比较无显著性差异(P>0.05)。【结论】①后组筛窦,蝶窦和视神经的毗邻关系,蝶窦气化类型及蝶窦分隔应作为扩大经蝶窦入路术前常规的影像学观测内容。②蝶嵴位于双侧视神经管眶口的中点,为术中可靠的中线标志。     

EGFL7在人脑胶质瘤中的表达及其与微血管密度的关系

目的探讨EGFL7基因在人脑胶质瘤组织中的表达及与肿瘤微血管密度（MVD）的关系。方法收集4 5例人脑胶质瘤石蜡标本,其中低度恶性（Ⅰ～Ⅱ级）2 4例,高度恶性（Ⅲ～Ⅳ级）2 1例,应用免疫组织化学检测EGFL7蛋白的表达情况,应用八因子免疫组化标记肿瘤微血管。分析EGFL7蛋白表达与胶质瘤病理分级及MVD的关系。结果EGFL7在人脑胶质瘤中存在表达,EGFL7蛋白表达主要位于肿瘤细胞及血管内皮细胞的胞浆。其表达与肿瘤的恶性程度（t=4.3 9 9,P＆lt;0.0 1）及MVD（r=0.6 8 4,P＆lt;0.0 1）有明显的相关性;EGFL7在正常人脑组织中无表达。结论人脑胶质瘤存在EGFL7基因的表达,并且与肿瘤恶性程度及MVD具有明显相关性,提示EGFL7在人脑胶质瘤的血管生成中可能发挥重要作用。     

高血压脑出血CT定位微创穿刺清除术治疗体会

高血压脑出血是急性脑血管病中病死率最高的疾病。目前手术方法有手术显微镜下血肿清除及微创穿刺清除术。我院自1999年4月以来,应用CT定位微创穿刺清除术治疗30例,疗效显著,现报告如下。1　临床资料1.1　一般资料　本组30例,男20例,女10例,年龄36～70岁,平均年龄54岁。70岁以上为10例(占33.3%),均有高血压病史。1.2　症状与体征　起病后头痛28例,呕吐22例,癫痫发作5例,入院时体温≥38℃11例。血压≥226mmHg(1mmHg=0.133kPa)2例,血压≥188mmHg19例,血压≥150mmHg9例。GCS评分3～5分7例、6～9分评分18例、10～12分5例。一侧瞳孔散大10例,…     

3D打印模型引导软通道穿刺治疗高血压脑出血的效果探讨

目的对3D打印模型引导软通道微创穿刺治疗高血压脑出血的效果进行探讨。方法从湖南省湘西土家族苗族自治州人民医院(吉首大学第一附属医院)选取2016年1月—2017年6月收治的84例经检查诊断为高血压脑出血的患者进行手术,选择开颅血肿清除术和3D打印模型引导软通道微创穿刺术。研究组进行3D打印模型引导软通道微创穿刺术,对照组进行开颅血肿清除术,通过对比总结不同的手术方式对患者治疗效果的影响及其跟随访问一年后术后的情况进行分析。结果研究组的治疗效果显著优于对照组(P<0.05);研究组的手术方式治疗高血压脑出血的术后并发症和再出血情况要少于对照组(P<0.05)。结论 3D打印模型引导软通道微创穿刺治疗高血压脑出血的效果比开颅血肿清除术的治疗效果更加理想。     

鞍区Rathke囊肿的诊断及显微手术治疗

目的 探讨鞍区Rathke囊肿的术前诊断和手术治疗。方法 对2000年3月至2007年6月我院收治的21例经手术及术后病理检查证实的Rathke囊肿病人的临床资料进行回顾性分析。此21例中。8例男性，13例女性；入院后21例病人均行了头颅CT和MRI检查。鞍区Ratllke囊肿患者临床表现包括头痛、视野缺损及内分泌功能紊乱等。15例经鼻-蝶窦入路，6例经右侧额下入路显微手术切除病变。结果 术前正确诊断为Rathke囊肿11例。其余10例均被误诊。术后随访3个月至5年，患者头痛症状和视力、视野障碍均有改善，术前有内分泌功能障碍者术后63．6％（7／11）得到改善，无复发病例。结论 鞍区Rathke囊肿术前较难明确诊断。MRI检查有助于其鉴别诊断。经蝶窦显微手术是有效的治疗方法。     

胶质瘤血管新生及其调控机制

体内外研究表明实体性肿瘤的生长是依赖血管的,其直径一旦超过2 mm,若没有新生的血管供血则肿瘤的生长就会停止。胶质瘤是人体内血管化程度最高恶性的肿瘤之一。胶质瘤的血管发生与其他实体性肿瘤血管发生一样,由血管形成及血管新生两种方式构成：前者由内皮祖细胞或者血管母细胞形成新的血管;而后者是由组织中既存的成熟血管的内皮细胞发生增殖和游走形成小血管。血管新生是肿瘤血管生成的主要形式,胶质瘤血管新生的机制研究以及抑制其血管生成是胶质瘤治疗的一个新途径,成为近年来的研究热点,本文就胶质瘤血管新生及其调控机制作一综述。     

人EGFL7基因短发夹结构RNA慢病毒载体的构建及鉴定

目的构建人类表皮生长因子域7（EGFL7）基因RNA干扰（RNAi）慢病毒载体。方法将靶向EGFL7基因的短发夹结构RNA（shRNA）表达序列连接到包含U6启动子及绿色荧光蛋白（GFP）报告基因的慢病毒载体pGCL-GFP中,获得重组质粒,命名为pGCL-GFP-vshEGFL7,经多聚酶链反应（PCR）和测序鉴定后,与慢病毒包装质粒pHelper 1.0及pHelper 2.0通过lipofectamine 2000共转染至包装细胞293T,包装产生病毒液,测定其滴度。结果PCR扩增和测序结果证实EGFL7shRNA核苷酸链序列插入正确,包装慢病毒产生病毒悬液的滴度为4.8×107TU/ml。结论成功构建人EGFL7基因shRNA慢病毒载体。