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从大肠杆菌清亮裂解液直接抽提的质粒pBR322DNA可被凝胶电泳分成五条明显的区带。电镜分析表明,pBR322单体超螺旋DNA及由超螺旋单体组成的连环寡聚体或多聚体;pBR322DNA的松弛型单体及其连环聚合体;松弛型的。BR322环状二聚体DNA和由它组成的连环聚合体各组成这种质粒DNA凝胶电泳的第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区带。这个事实证明DNA的连环聚合体有着特殊的电泳行为。电镜和电泳的分析表明体内的pBR322DNA存在着一类独特的但是重要的拓扑异构体——“花型结构”DNA。电镜资料还显示可能是由DNA链的交叉(半连环)联系的多股双链DNA组成的复合链的存在。本文对大肠杆菌染色体DNA的折迭过程与两类DNA拓扑异构酶的关系作了讨论。 相似文献
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限制性内切酶BamHI是基因操作中一种常用的工具酶,它在许多常用的质粒载体上只有一个切点,适于体外重组及分子克隆。关于限制性内切酶BamHI的提取方法,国内外均有报道。我们主要参照Smith、Chirikjian和科学院生物物理所的方法进行简化,所得的BamHI经过鉴定证明能胜任基因重组实验的需要。 相似文献
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