血竭素高氯酸盐对舌鳞癌细胞Tca-8113增殖及凋亡的影响

目的:研究血竭素高氯酸盐(Dracorhodin perchlorate,DP)对舌鳞癌细胞Tca-8113增殖和凋亡的影响并初步探讨其相关机制。方法:以舌鳞癌细胞Tca-8113为研究对象,采用CCK-8、流式细胞术分析及Western Blot等方法检测不同浓度DP对Tca-8113细胞的增殖、凋亡及核因子E2-相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、血红素氧合酶 1(heme oxygenase 1,HO-1)蛋白表达的变化。采用SPSS17.0统计软件对实验结果进行分析。结果:CCK-8检测表明,与空白对照组相比,DP可以显著抑制细胞增殖,且对细胞的增殖抑制作用有时间-剂量依赖性(P<0.05)。流式细胞术及Western Blot检测结果显示DP可以促进细胞凋亡(P<0.05),并提高Nrf2、HO-1在Tca-8113细胞中的表达。结论:DP能抑制舌鳞癌细胞Tca-8113增殖并诱导其发生凋亡,其作用可能与Nrf2/HO-1信号通路激活有关;可能成为抗口腔癌药物。     

外源性NO对脂肪干细胞成软骨分化的影响

目的 通过观察不同浓度外源性一氧化氮（nitric oxide ,NO）供体硝普钠（SNP）对脂肪干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）增殖状况及相关基因表达的影响,探讨外源性NO在ADSCs成软骨分化中的作用。方法 获取并培养ADSCs,分别进行成骨和成脂诱导,采用茜素红染色和油红O染色进行多向分化鉴定。NO检测试剂盒检测ADSCs成软骨分化过程中NO的变化;采用细胞计数试剂盒-8(CCK8)法检测不同浓度SNP（0.25 mmol/L、1.00 mmol/L、4.00 mmol/L）下ADSCs的增殖情况。以Real time-PCR（RT-PCR）方法检测ADSCs在不同浓度SNP下,表达转化生长因子-β1（TGF-β1）以及成软骨分化特异基因——信号传导蛋白Smad3、 Ⅱ胶原蛋白（Col-Ⅱα1）基因的变化。结果 培养的细胞经成骨和成脂诱导后茜素红染色和油红O染色呈阳性;ADSCs成软骨分化过程中,培养上清液中NO浓度始终比对照组高（P<0.05）;与对照组相比,低浓度SNP（0.25 mmol/L、1.00 mmol/L）对ADSCs的增殖无明显影响（P>0.05）,高浓度SNP（4.00 mmol/L）抑制ADSCs增殖,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测发现SNP能抑制ADSCs自身TGF-β1 mRNA的表达,同时抑制Smad3 mRNA和Col-Ⅱα1 mRNA的表达。结论 在ADSCs成软骨分化过程中,外源性NO可以通过抑制ADSCs自身产生TGF-β1,并且抑制TGF-β下游信号通路,从而抑制成软骨分化。     

大鼠β-catenin miRNA表达载体的构建及在脂肪干细胞中沉默效果的检测

目的 构建具有沉默大鼠脂肪干细胞β-catenin表达的miRNA（miR)表达载体。方法 通过酶切法将合成的miR表达载体寡聚核苷酸引物与质粒pSWH相连,形成pSWH-miR;PCR扩增出增强型绿色荧光蛋白（EGFP）开放阅读框,插入经双酶切处理的pSWH-miR形成pSWH-EGFP-miR。β-catenin miR表达质粒瞬时转染SD大鼠脂肪干细胞 (adipose-derived stem cells derived from rats,rADSCs),72 h后提取细胞全蛋白,Western blot检测β-catenin的表达情况。结果 针对大鼠β-catenin的不同位点,一共构建了5个miRNA表达载体（miR-780、miR-796、miR-1467、miR-1948、miR-1960）,其中miR-780、miR-796对β-catenin沉默效果最好（P<0.05）,miR-1960的沉默效果次之（P<0.05）,miR-1467、miR-1948不具有沉默效果（P<0.05）。结论 miR-780、miR-796能够有效沉默SD大鼠脂肪干细胞中β-catenin的表达。     

瓜蒌通脉丸对高脂血症大鼠血脂及血管NO、SOD、MDA的影响

目的观察瓜蒌通脉丸对高脂血症大鼠血脂、血管一氧化氮（nitric oxide,NO）、超氧化物歧化酶（superoxide dismu-tase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平的影响。方法采用高脂饲料喂养,建立大鼠高脂血症模型,同时用瓜蒌通脉丸水溶液2 g.kg-1.d-1、4 g.kg-1.d-1、辛伐他汀水溶液2 mg.kg-1.d-1干预。8周末腹主动脉取血测血脂,同时取胸腹主动脉血管测定NO、MDA水平及SOD活力。结果用药8周后,瓜蒌通脉丸组血液总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-c）、极低密度脂蛋白（VLDL）水平明显降低（P〈0.01或P〈0.05）,血管NO含量及SOD活力明显高于高脂血症组（P〈0.05或P〈0.01）,而MDA水平明显低于高脂血症组（P〈0.01）。结论瓜蒌通脉丸能调节血脂,增强血管抗氧化能力,改善血管内皮功能,发挥抗动脉粥样硬化的作用。     

中医药治疗高脂血症的研究进展

高脂血症（Hyperlipemia,HLP）是指由于脂肪代谢或运转异常使血浆中一种或几种脂质高于正常的疾病,又称为血脂异常。HLP是动脉粥样硬化、冠心病、脑梗塞等疾病的重要危险因素。随着人民生活水平的不断提高,人群膳食结构变化,其发病率呈上升及发病年龄提前趋势。中医药治疗HLP具有疗效肯定、配方灵活、副作用少且能多靶点调节心血管功能等一系列优点。因此,进行中医药防治高脂血症的临床与基础研究,开发安全有效调节血脂且能改善心血管功能药物成为当前的迫切需要。近年来,中医药治疗HLP研究日趋深入,已由单纯血脂指标调整阶段进入调脂作用部位、途径及机制研究阶段,现综述如下。