一氧化氮供体型心脑血管药物研究的实践与思考

一氧化氮(nitric oxide,NO)作为信使物质和/或效应分子在心血管、神经、免疫等系统中发挥着极其重要的作用.NO生成不足或信号传导异常与多种疾病的形成和发展密切相关,直接或间接调控体内NO水平及其相关代谢途径的研究已成为生物医学和药学领域研究的热点.本文介绍了体内NO的产生及其在心脑血管中的生理、病理作用,综...     

一氧化氮供体型烷氧基联苯化合物的合成及抗肿瘤活性

基于药物设计的拼合原理,将一氧化氮(NO)供体片段联接到烷氧基联苯结构中,设计、合成了一系列NO供体型烷氧基联苯化合物。采用MTT法评价了目标化合物对人肝癌细胞系HepG-2、Bel-7402、SMMC-7721、QGY-7701及Bel-7404的增殖抑制作用。结果表明,目标化合物(4a~4g)对5种肝癌细胞均呈现出较好的抑制作用,其中对HepG-2的活性最强(IC₅₀=1.15~4.34 μmol/L)。值得注意的是,除化合物4f外,其他化合物对正常肝细胞LO2的抑制作用较小(IC₅₀=5.00~8.53 μmol/L),提示NO供体型烷氧基联苯化合物对肝肿瘤细胞具有一定的选择性。此外,化合物4b对敏感及耐药的K562细胞均具有显著的增殖抑制作用,其IC₅₀分别为1.32和1.28 μmol/L。加入NO清除剂后,化合物4b的抑制活性显著降低,提示该化合物释放的NO对其抗肿瘤活性具有重要贡献。     

硫化氢供体分子研究进展

硫化氢(H₂S)是一种内源性的气体信使分子,具有极其广泛的生物学活性,包括舒张血管、保护心脏、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等。和其他气体信使分子一样,H₂S的活性和其释放的部位、浓度以及持续时间密切相关。因此,H₂S供体药物研究的关键科学问题在于如何提高H₂S供体分子的选择性,在靶部位(一般为病变部位)释放适当浓度的H₂S,发挥治疗作用的同时限制其不良反应。本文综述了两大类H₂S供体分子的结构及其释放H₂S的机制,重点介绍近年来发展的具有可控释放潜力的H₂S供体药物,旨在为H₂S供体药物研究提供新的思路。     

川芎嗪/查耳酮类杂合物的设计、合成及抗血小板聚集活性

基于药物设计的生物电子等排和拼合原理,设计、合成了一系列川芎嗪/查耳酮类杂合物(2~26),以期得到活性较强的抗血小板聚集药物。结果表明,目标化合物对二磷酸腺苷(ADP)和花生四烯酸(AA)诱导的血小板聚集均显示不同程度的抑制,其中化合物8活性最强,对ADP诱导的血小板聚集的抑制作用(IC₅₀=0.14 mmol/L)是川芎嗪的9.1倍,查耳酮的10.5倍;对AA诱导的血小板聚集的抑制作用(IC₅₀=0.09 mmol/L)是川芎嗪的8.8倍,查耳酮的10.0倍,且略优于阿司匹林(IC₅₀=0.15 mmol/L)。     

羧甲司坦L-精氨酸盐的合成及其对支气管上皮细胞的保护作用

羧甲司坦（CMC）是治疗慢性阻塞性肺病的常用药,长期服用对胃肠道产生严重刺激。L-精氨酸是一氧化氮（NO）合酶（NOS）的底物,在体内可转化为对心血管及胃肠道等有益的NO。L-精氨酸属碱性氨基酸,能与某些含羧酸基团的化合物成盐以改善原药的水溶性,并可能由于促进NO的释放带来活性的提高或毒副作用的缓解。因此,本文设计、合成了CMC的L-精氨酸盐（CMCA）,并测试其理化性质以及在香烟烟雾诱导的人支气管上皮细胞损伤模型中清除活性氧（ROS）、抗细胞凋亡和NO释放的能力。结果表明,CMCA能有效捕获ROS,释放NO,并抑制细胞凋亡,效果优于CMC或L-精氨酸,提示该化合物值得深入研究和开发。     

新型CDDO-Me类似物的合成及抗肿瘤活性

以齐墩果酸(OA)为起始原料,经9步反应合成了C环含有α,β-不饱和酮结构的2-氰基-3,12-二氧代齐墩果烷-1,9(11)-二烯-28-酸甲酯(CDDO-Me)活性类似物1,再将不同的脂肪羧酸和芳杂环羧酸分别与其C-3位羟基酯化,设计、合成了新型CDDO-Me类似物(2a~2e),并进一步将C-1位溴代,得到化合物3a~3e。采用MTT法测定了目标化合物对肺癌细胞A549、肝癌细胞HepG2以及肺上皮细胞BEAS-2B的增殖抑制活性。结果表明,目标化合物对HepG2细胞和A549细胞的增殖均显示了不同程度的抑制,其中化合物3b和3c的抑制活性最强［IC₅₀=(6.13±1.16)μmol/L,IC₅₀=(5.49±1.03)μmol/L］,优于先导物1,与CDDO-Me相当。此外,目标化合物对正常细胞BEAS-2B的抑制活性显著小于对上述两种肿瘤细胞的抑制活性,显示了较高的肿瘤细胞选择性,其中3e对HepG2的选择性最高,其抑制作用是正常细胞的10倍,值得进一步研究。     

CDDO⁃Me对缺氧诱导的肺动脉外膜成纤维细胞活化的影响

目的：探索甲基巴多索隆（bardoxolone methyl,CDDO?Me）对缺氧诱导的人肺动脉外膜成纤维细胞（pulmonary artery adventitia fibroblast,PAAF）活化的影响及其相关机制。方法：体外培养人PAAF,随机分为常氧组（21%O2）、缺氧组（1%O2）、缺氧+ CDDO?Me组和常氧+CDDO?Me组。采用CCK?8法检测细胞活力;Transwell实验检测细胞迁移;DCFH?DA荧光探针检测细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平,ELISA试剂盒检测细胞内谷胱甘肽（glutathione,GSH）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）含量以及细胞上清液中转化生长因子（transforming growth factor,TGF）?β1、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）?α、白细胞介素（interleukin,IL）?1β表达水平;免疫荧光法观察细胞内α?平滑肌肌动蛋白（α?smooth muscle actin,α?SMA）表达以及核因子κB（nuclear factor kappa?B,NF?κB）p65核转位情况;Western blot检测细胞内α?SMA、Ⅰ型胶原蛋白、波形蛋白表达以及Smad3、p65磷酸化水平。结果：CDDO?Me（62.5、125.0、250.0、500.0 nmol/L）可以浓度依赖性地降低缺氧诱导的PAAF细胞活力的升高,并在250.0 nmol/L和500.0 nmol/L时具有显著抑制作用。CDDO?Me（500.0 nmol/L）可以抑制缺氧诱导的PAAF迁移以及肌成纤维细胞转化,恢复细胞形态,抑制缺氧诱导的PAAF中α?SMA、Ⅰ型胶原蛋白和波形蛋白表达水平的升高。在缺氧条件下,CDDO?Me（500.0 nmol/L）显著降低PAAF中ROS和MDA水平,升高GSH和SOD含量,提高细胞抗氧化应激能力。CDDO?Me（500.0 nmol/L）可以抑制缺氧诱导的PAAF中细胞因子TGF?β1的分泌,抑制TGF?β1/Smad3信号通路的激活。此外,CDDO?Me（500.0 nmol/L）还可以抑制缺氧诱导的PAAF中NF?κB（p65）的核转位及其磷酸化,并抑制其下游炎症因子TNF?α和IL?1β的表达。结论：CDDO?Me可以抑制缺氧诱导的PAAF增殖、迁移以及向肌成纤维细胞转化,提高PAAF抗氧化应激能力,并抑制TGF?β1/Smad3信号通路和NF?κB信号通路。     

2-氰基-3,12-二氧代齐墩果烷-1,9(11)-二烯-28-酰胺类化合物的合成与抗乳腺癌活性研究

目的设计合成一系列2-氰基-3,12-二氧代齐墩果烷-1,9(11)-二烯-28-酰胺类化合物,以期寻找活性更好的抗肿瘤化合物。方法以2-氰基-3,12-二氧代齐墩果烷-1,9(11)-二烯-28-羧酸(CDDO)为先导化合物,将CDDO的17位羧基通过连接基团与各种氨基化合物进行偶联制得目标化合物;采用MTT法测试偶联物对乳腺癌MDA-MB-468细胞的增殖抑制活性。结果与结论目标化合物的结构经IR、MS及1H-NMR谱确证,合成的10个化合物对乳腺癌MDA-MB-468细胞显示出不同程度的增殖抑制活性,明显优于先导化合物CDDO,其中,化合物2i、2j的活性最强(IC50值分别为1.12、1.37μmol·L-1)。构效关系研究发现,二胺偶联物的活性最好,氨基酸和正丙醇胺偶联物的活性次之,而芳胺偶联物的活性较弱,化合物2i和2j值得进一步研究。     

新型齐墩果酸衍生物的合成及抗肿瘤活性

以齐墩果酸（OA）为先导化合物,经C28位羧基保护、C3位乙酰化、C12位氧化、C11位溴代后消除等7步连续反应合成了具有α,β-不饱和酮结构的OA衍生物;再以甘氨酸为连接基团,将不同取代的呋咱氮氧化物类一氧化氮供体与其偶联,获得新型OA衍生物,其结构经IR、MS及¹H NMR确证。采用MTT法测定目标物和部分中间体对4种人肿瘤细胞的增殖抑制活性。结果表明,所有目标物的抗肿瘤活性均显著优于OA,其中10a-10e和10i对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制活性与阳性对照药2-氰基-3,12-二氧代齐墩果烷-1,9（11）-二烯-28-羧酸甲酯（CDDO-Me）相当。     

苯胺基嘧啶/偶氮鎓二醇盐杂合物的设计、合成及其抗非小细胞肺癌活性

为寻找活性强的抗非小细胞肺癌(NSCLC)药物,设计、合成了15个结构新颖的苯胺基嘧啶/偶氮鎓二醇盐杂合物9a~9e、10a~10e、11a~11e,采用MTT法考察其对表皮生长因子受体(EGFR)L858R/T790M突变的人肺腺癌细胞H1975的增殖抑制活性。结果表明,化合物9a~9e显著抑制H1975细胞的增殖,优于对照药吉非替尼(gefitinib)。其中,化合物9b活性最强(IC₅₀=0.65 μmol/L)。分子对接提示,化合物9b可能通过氢键和静电作用力等与EGFR T790M活性部分结合,值得进一步研究。