蜘蛛拖丝蛋白基因亚克隆与全序列测序对其结构与功能了解的意义

目的:了解蜘蛛拖丝蛋白基因的结构,利用基因工程技术制备人工蛛丝纤维,开发具有独特的机械特性和良好生物相容性的新型蜘蛛丝纤维生物材料。方法:通过结合限制性内切酶消化和超声波机械剪切蜘蛛拖丝蛋白全基因克隆ScosDS-1DNA,制备的DNA片段分别与载体pUC19连接,构建了4个拖丝蛋白基因亚克隆文库。筛选、鉴定亚克隆文库的重组子,选取大小合适的重组子进行测序。结果:筛选的重组子数目超过400个,成功完成的测序反应数近500次,总读长已为ScosDS-1全长的5倍。结论:初步进行了ScosDS-1全序列拼接,以进一步了解拖丝蛋白基因的结构与功能,为合理的设计化合成基因,人工仿制蛛丝纤维奠定了基础。     

复方三七胶囊治疗伤骨科疾病136例

以复方三七胶囊治疗伤骨科疾病136例，与内服跌打丸的对照组116例作对比观察。结果显示：复方三七胶囊的治愈率明显高于跌打丸（P＜0．05）。     

复方白药酊治疗骨伤科疾病60例疗效观察

复方白药酊是云南白药厂在云南白药处方基础上制成的酊剂,临床上用于治疗闭合性骨关节及软组织损伤、风湿关节疼痛等症,具有消炎消肿、散瘀止痛、舒筋活络的功效。现将60例临床疗效观察报道如下:     

TFF3作为肿瘤生物标志物的研究

三叶因子3（trefoil factor 3, TFF3）为三叶因子多肽家族成员之一,与肿瘤的发生发展密切相关,可促进肿瘤的侵袭、转移与血管生成。作为肿瘤生物标志物,TFF3对胃癌诊断具有较高的敏感度和特异性,优于胃蛋白酶原（Pepsinogen, PG）标志物,是胃癌非侵入性筛查潜在的理想标志物,并可应用于胃肠道肿瘤化疗药效与预后的评价,同时,TFF3应用于子宫内膜样腺癌及甲状腺微小浸润性滤泡癌的病理诊断也具有重大临床价值。TFF3作为新型肿瘤生物标志物,在肿瘤分子诊断与靶向、个体化治疗领域倍受临床关注。     

应用水痘-带状疱疹病毒报告细胞系筛选抗病毒药物的研究

目的 应用构建的水痘-带状疱疹病毒(VZV)报告细胞系MV9G建立一种筛选抗VZV药物的新方法。方法 将VZV疫苗株(vOka)的无细胞病毒液(CFV)直接感染MV9G细胞2h后移除（CFV直接感染法）,或将感染vOka株的MeWo细胞（含带细胞病毒,CAV）与MV9G细胞共培养48 h（CAV共培养法）,以激发MV9G细胞表达报告基因萤火虫荧光素酶。在培养基中加入肝素、磷酸甘露糖(M-6-P)、阿昔洛韦(ACV)、白藜芦醇、roscovitine等抗病毒药物,通过比较加药前后MV9G细胞荧光素酶活性变化来分析药物对VZV的作用。结果 抗病毒药物各浓度组不同程度地抑制CFV直接感染和/或CAV共培养激发的MV9G细胞荧光素酶活性,荧光素酶活性的降低与平行对照组中病毒蚀斑数的降低一致。抗病毒药物中肝素、M-6-P和roscovitine 2.5 μmol/L组抑制CFV激发荧光素酶的作用强于抑制CAV激发荧光素酶的作用,而ACV和白藜芦醇抑制CAV激发荧光素酶的作用强于抑制CFV激发荧光素酶的作用。ACV抗药株Kanno和rOka YSR的CAV与MV9G细胞共培养均激发其强表达荧光素酶,但ACV抑制抗药株激发荧光素酶50％时浓度(IC50)显著高于抑制敏感株pOka和CaGu的IC50。结论 CFV直接感染法和CAV共培养法分别有助于筛选针对VZV感染早期和后期的药物,利用MV9G细胞建立的报告细胞法可为抗VZV药物筛选和作用机制研究提供一种简便、快速、敏感和高通量的新方法。     

骨伤廉复散合风湿跌打酊治疗急、慢性伤筋

骨伤康复散系由见血飞、五爪金龙、叶下花、绿葡萄根、透骨草、黑骨头、三条筋等药,均研为粉状按一定比例制成散剂,然后用风湿跌打酊混合上药加开水调敷。(风湿跌打酊组成:重楼、红花、苏木、川芎、炙乳香、灸没药、三分三、雪上一枝蒿、独定子、草乌、伸筋草、海风藤、细辛、防风、桂枝、木瓜、苡仁、羌活、独活,加酒精适量密封浸泡2周备用。)     

复方白药酊治疗骨伤科疾病60例疗效观察

复方白药酊是云南白药厂在云南白药处方基础上制成的酊剂,临床上用于治疗闭合性骨关节及软组织损伤,风湿关节疼痛等症,具有消炎消肿,散瘀止痛,舒筋活络的功效。现将60例临床疗效观察报道如下。一、临床资料全部为门诊病例,其中男33例,女27例。年龄最小者16岁,最大者70岁,平均年龄43岁。职业:学生7人,干部4人,工人38人,农民(?)1人。病程最短者一日,最长者三年以上。观察时间最短者五日,最长者九个月。     

蟾酥酒治疗冻伤55例疗效观察

笔者用自制具有消炎消肿,祛瘀止痛,健肤止痒作用的蟾酥酒治疗冻伤55例取得了较为理想的效果。报道如下:诊断标准及分型:按临床表现及病理变化     

RGD-蜘蛛拖丝蛋白聚合物的生物合成与纯化

蜘蛛拖丝是自然界性能最好的蛋白质纤维之一 ,其独特的机械性能 ,良好的生物相容性和缓慢的可降解性 ,作为生物材料在组织工程领域有着潜在的应用前景。本文根据蜘蛛拖丝蛋白序列高度重复的特点 ,引入与细胞黏附有关的精氨酸 甘氨酸 天冬氨酸 (RGD)三肽 ,化学合成RGD 蜘蛛拖丝蛋白基因单体 ,通过头尾相连倍加构建策略 ,首次得到RGD 蜘蛛拖丝蛋白基因 8聚体和 16聚体。分别将这两种多聚体与原核高效表达载体 pET 30a( )连接 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) pLysS ,用IPTG诱导表达。SDS PAGE图谱显示表达产物分子量分别为 35KD和 6 0KD ,与理论值基本相吻合 ;蛋白质印迹分析这两种表达产物均显示特异性。文中对表达产物的纯化方法进行了初步的摸索。