22234例子宫颈高危型HPV感染及亚型分布研究

目的:分析17种型别的高危型人乳头瘤病毒(HPV)在22234例子宫颈癌筛查中的感染率及亚型分布特点。方法:回顾性分析2018年1月1日至2019年1月1日22234例于华中科技大学同济医学院附属协和医院行子宫颈癌筛查患者高危型HPV感染率及感染亚型。结果:22234例接受子宫颈癌筛查患者中,一种或以上高危型HPV阳性者3574例(16.1%),其中HPV16或(和)HPV18阳性者703例(3.2%)。在3574例高危型HPV阳性女性中,最常见的高危HPV感染是HPV52(24.4%),其次为HPV58(16.5%)、HPV16(14.0%)、HPV53(12.6%)和HPV39(8.6%)。与HPV16阴性患者相比,在HPV16阳性的患者中,除HPV31、HPV35、HPV45、HPV26和HPV82以外的12种高危型HPV的感染风险均显著降低约2~5倍(OR 0.169~0.530,P<0.05);与HPV18阴性患者相比,HPV18阳性的患者中HPV16、HPV33、HPV39、HPV51、HPV52、HPV58和HPV53的感染风险均显著下降(P<0.05)。结论:女性高危型HPV感染率较高,最常见的高危型HPV是HPV52和HPV58感染,并且HPV16、18感染对多个其他型别高危型HPV感染有保护作用。     

卵巢癌相关成纤维细胞与卵巢癌淋巴结转移的关系

目的:探讨肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)与卵巢癌临床病理学特征特别是淋巴结转移的关系,研究CAFs在卵巢癌淋巴管生成和淋巴管内皮细胞(LEC)增殖迁移中的作用。方法:免疫组化法检测、计算机图像处理软件分析71例卵巢癌组织间质中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性面积百分比,以此代表卵巢癌CAFs的数量。用D2-40标记淋巴管内皮细胞,检测淋巴管密度(LVD)。EdU标记法和Transwell迁移实验检测与CAFs共培养前后淋巴管内皮细胞增殖和迁移情况。结果:卵巢癌有淋巴结转移组间质中CAFs百分比明显高于无淋巴结转移组(P=0.024),分别为(29.39±4.32)%和(22.56±6.78)%。卵巢癌间质CAFs数量与淋巴管密度呈正相关(r=0.504,P=0.0003)。与卵巢癌成纤维细胞共培养后,淋巴管内皮细胞增殖增多2.8倍(P<0.0001),迁移增多5.2倍(P<0.0001)。结论:卵巢癌间质成纤维细胞可能通过促进淋巴管内皮细胞增殖、迁移和淋巴管生成,参与卵巢癌的进展和淋巴结的转移。     

EZH2基因与卵巢癌细胞系A2780化疗敏感性的关系

目的:探讨RNA干扰沉默果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)基因与卵巢癌细胞A2780顺铂敏感性的关系.方法:获得稳定表达EZH2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的人卵巢癌细胞A2780-shEZH2,实时定量PCR(Rea...     

2198例液基细胞学宫颈癌筛查的临床分析

目的:评价Auto Cyte PREP液基细胞学对宫颈癌筛查的临床价值。方法:取2 198例受检者的宫颈脱落细胞作液基薄片细胞学检查,细胞学诊断采用TBS分级系统,阳性诊断包括鳞状上皮内低度病变(LSIL)及以上病变。对于意义不明的不典型鳞状细胞(ASCUS)及以上的受检者行阴道镜活检,并将两种结果作对照。结果:Auto Cyte PREP液基细胞学标本满意度高,检测的敏感性、特异性和准确性分别达到81.6%、91.4%和87.7%,对鳞状细胞癌(SCC)、鳞状上皮内高度病变(HSIL)、鳞状上皮内低度病变(LSIL)的分级敏感性分别为100.0%(10/10)、85.9%(61/71)、77.9%(106/136)。细胞学与组织学级别基本达到一致。结论:液基细胞学应用于宫颈癌筛查能明显提高标本质量和宫颈异常细胞诊断的准确性,尤其是对HSIL。     

病人自控硬膜外镇痛在分娩中的应用及护理

为了解病人自控硬真能（ＰＣＥＡ）在无痛分娩中的临床效果,探讨其护理原则。将１１０例单胎头位初产妇随机分为两组,ＰＣＥＡ组（ｎ＝５５）分娩时采用ＰＣＥＡ无痛分娩;对照组（ｎ＝５５）为自然分娩。比较两组分娩时疼痛强度,难产率,产程时间及新生儿情况等。结果：ＰＣＥＡ组产妇分娩时疼痛对照组明显减轻（Ｐ〈０．０１）,剖宫产率明显降低（Ｐ〈０．０５）,同时第一产程和总产程时间也明显缩短（Ｐ〈０．０５）。结论：     

产后抑郁症相关因素分析

为了探讨引起产妇产后抑郁症的危险因素,对１６８例产妇进行了观察。结果显示：１６８例产妇中发生抑郁症者９例,发生率为５．３６％。产后抑郁症的发生与产妇年龄、职业、妊娠结局和新生儿性别无关,与产前并发症、产钳或胎头吸引器助产、对分娩疼痛的恐惧有关（Ｐ〈０．０１）。提示,应加强产妇围产期的心理保健,积极处理孕期异常情况,尽可能消除身体和精神刺激,推广康乐待产,以降低产后抑郁症的发生率。     

RNA干扰沉默EZH2基因对人卵巢癌细胞增殖迁移的抑制作用

目的:探讨RNA干扰沉默EZH2基因对人卵巢癌细胞系A2780增殖和迁移的影响。方法:真核表达载体介导靶向沉默EZH2 shRNA的重组质粒转染A2780细胞,Real-time RT-PCR检测EZH2基因的沉默效果,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,Transwell小室检测细胞迁移。结果:EZH2shRNA转染明显下调EZH2的表达(P0.001)。重组质粒稳定转染至A2780细胞后,细胞增殖速度明显下降(P0.05),G0/G1期细胞增加(P0.01),体外迁移能力下降(P0.01),差异均有统计学意义。结论:EZH2基因沉默能有效抑制卵巢癌细胞的增殖和迁移能力,为卵巢癌的表观遗传学治疗提供新靶点。     

不同方法建立卵巢癌紫杉醇耐药细胞株对临床用药方案的启发

目的：用不同的诱导耐药方法培养紫杉醇耐药细胞株A2780／Taxol，A2780／（DDP＋Taxol），A2780／Taxol-1，以进一步探讨卵巢癌耐药机理，为临床逆转耐药研究提供模型依据。方法：采用逐步增加药物浓度和大剂量冲击两种方法处理细胞，直至细胞能在2．5μg&#183;ml^-1紫杉醇中稳定生长。用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定其耐药性及紫杉醇对各组细胞的抑制率，并在冻存3个月后再次检测耐药性。结果：MTT法检测A2780，A2780／DDP细胞对紫杉醇的药物半数抑制浓度（IC50）分别为（0．23&#177;0．04）μg&#183;ml^-1和（0．26&#177;0．02）μg&#183;ml^-1，采用逐步增加药物浓度诱导法历经九个月时间建立A2780的紫杉醇耐药细胞株A2780/Taxol-l，对紫杉醇的Ic50为（6．63&#177;0．31）μg&#183;ml^-1，耐药倍数为28．83。采用大剂量冲击法以A2780和A2780／DDP为对象建立各自的紫杉醇耐药细胞株A2780/Taxol、A2780／（DDP＋Taxol），检测大剂量冲击法建立的A2780／Taxol，A2780／（DDP＋Taxol）耐药性，发现它们对紫杉醇的耐药倍数分别为19．65，17．96，两者比较无统计学差异（P〉0．05），而两种方法建立的紫杉醇耐药细胞株A2780／Taxol、A2780／Taxol-1的耐药性有统计学差异（P〈0．05）。同时检测A2780／DDP和A2780／（DDP＋Taxol）对顺铂的IC50差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：通过逐步诱导法建立的耐药细胞株比通过大剂量冲击法建立的耐药细胞株耐药性稳定，耐药性显著增高，提示临床用药中应足剂量用药。紫杉醇与顺铂无交叉耐药。在A2780／DDP细胞基础上使用紫杉醇建立双耐药细胞株时，紫杉醇对细胞的顺铂耐药性无影响，不能逆转其顺铂耐药性，所以对顺铂耐药患者多药合用意义不大，单用紫杉醇可能为佳。     

单次液基细胞学检查对宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的诊断价值

目的:评价采用TBS分类法的单次薄层液基细胞学(AutoCyte PREP)对C INⅡ以上病变的诊断价值。方法:回顾性分析2 198例行液基细胞学检查病人,细胞学结果大于或等于ASCUS者行阴道镜检查,并在阴道镜指导下进行活检,组织送病理学检查。并比较以不同细胞学结果为不同阴道镜检查起点时,其诊断C INⅡ以上病变的阳性预测值和阴道镜检率。结果:细胞学结果≥ASCUS者共587例,ASCUS、LSIL、HSIL、SCC组C INⅡ+的发生率分别为2.64%、8.46%、72.46%和100.00%。以ASCUS、LSIL、HSIL或SCC为阴道镜检查界点,阳性预测值和阴道镜检率分别为13.80%、26.70%;33.97%、9.50%;75.98%、3.59%和100.00%、0.45%。结论:单次薄层液基细胞学结果反映了宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的分布,对C INⅡ+有良好的预测价值,且以LSIL为阴道镜检查起点最具诊断意义。     

EZH2 shRNA真核表达载体的构建及其在卵巢癌A2780细胞系的稳定表达

目的 采用基因工程技术,构建EZH2 shRNA的真核表达载体,获得稳定表达干扰质粒的卵巢癌A2780细胞系.方法 合成特异性干扰EZH2的shRNA片段并定向克隆插入Supersilencing shRNA质粒表达载体pGPU6/GFP/Neo,获得表达载体pGPU6/GFP/Neo-shEZH2.脂质体介导重组质粒转染A2780细胞,经G418加压筛选获得稳定转染细胞株,Real time RT-PCR和Western blot检测转染后细胞系EZH2的表达.结果 测序结果证实重组载体构建成功,稳定转染shEZH2的A2780细胞EZH2的mRNA和蛋白水平下降(90.20±1.66)%和(73.80±5.49)%,P＜0.01,差异有统计学意义. 结论成功构建EZH2 shRNA表达载体,获得EZH2基因稳定沉默的A2780细胞系,为进一步研究以EZH2为靶点的卵巢癌治疗奠定实验基础.