采用骨内型牵张器建立垂直向牙槽骨牵张成骨动物模型

【目的】应用自行研制的骨内型牙槽骨牵张器,建立犬垂直向牙槽骨牵张成骨动物模型。【方法】实验动物为中山大学动物中心提供的健康成年杂种犬12只。实验材料为自行设计,纯钛制成的骨内型垂直向牙槽骨牵张器,体部直径3.75mm,长5mm。先拔除犬双侧下颌前磨牙,形成萎缩牙槽嵴的模型。3月后随机选取一侧行骨切开术,植入两枚牵张器。1周后开始牵张,每天1次,每次1mm,共5d;分别在牵张后1、2和3月将动物处死进行临床检查,X线检查和组织学检查。【结果】骨内型垂直牙槽骨牵张器愈合良好。牙槽骨高度平均增加(4.8±0.50)mm。组织学切片显示在牵张区有骨质形成,其骨小梁方向与牵引方向一致。【结论】采用该骨内型牙槽骨牵张器成功建立稳定的、重复性好的犬牙槽骨牵张成骨动物模型,为牙槽骨牵张器的国产化和临床上应用该项技术打下基础。     

光固化氢氧化钙制剂作为临时冠粘结剂的临床应用

目的 探讨光固化氢氧化钙制剂作为临时冠粘结剂的可行性.方法 纳入242例需行临时冠的患者,根据每月就诊周数顺序随机分为3组,每组患牙制作临时冠并分别采用TempoCemNE(n=78)、Provicol(n=80)、Calcimol LC(n=84)行临时冠粘结,1周后复诊,观察固位效果、牙龈状况以及牙髓状况,比较其临床效果.结果 1周后复诊,3组间总体的固位效果、牙龈状况以及牙髓状况比较,差异无统计学意义(c12=5.553,P1=0.062>0.05;c22=4.783,P2=0.091>0.05;c32=3.290,P3=0.193>0.05).结论 光固化氢氧化钙制剂Calcimol LC和临时冠粘结剂TempoCemNE、Provicol具有相似的粘结效果,牙龈和牙髓保护作用良好,操作简单,可作为一种新型临时冠粘结剂进行临床应用.     

侧壁开窗法上颌窦底提升术植入Bio-Oss后骨生成的mRNA表达谱

 目的：探讨侧壁开窗法上颌窦底提升术这种特殊的引导性骨再生（guided bone regeneration, GBR）过程的转录组特点。方法：3只Beagle犬,随机选择一侧经侧壁开窗行上颌窦底提升术,同时植入Bio-Oss骨粉,术后2周,对另一侧用相同的方法行上颌窦底提升术。第2次术后2周,收集植入的Bio-Oss骨粉组织块,提取总RNA,全基因组表达谱芯片检测分析上颌窦底提升后2周和4周时的差异表达基因。利用基因本体论（gene ontology, GO）对差异表达的基因进行功能分类,以及京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG）进行信号通路分析。结果：在2周时表达升高的基因与刺激反应、免疫-炎症反应和细胞增殖有关,同时,与神经元分化、破骨细胞分化和早期血管化过程相关的基因也高表达。在4周时,与细胞代谢和发育相关的基因表达升高,重要的是,与血管生成和骨骼发育相关的基因都高表达,与骨骼发育相关的基因包括骨生成相关的生长和分化因子［转化生成因子β1（transforming growth factor beta 1, TGFB1）和骨形态发生蛋白4（bone morphogenetic protein 4, BMP4）］、软骨和骨胞外基质［软骨黏附素（chondroadherin, CHAD）、Ⅰ型胶原α1链（collagen type I, alpha 1 chain, COL1A1）、Ⅰ型胶原α2链（collagen type I, alpha 2 chain, COL1A2）、Ⅴ型胶原α2链（collagen type Ⅴ, alpha 2 chain, COL5A2）、核心蛋白聚糖（decorin, DCN）、骨连接蛋白（osteonectin, SPARC）和骨钙素（osteocalcin, BGLAP）］等相关的基因。信号通路分析显示4周时表达升高的基因与转化生长因子β/骨形态发生蛋白（transforming growth factor beta/bone morphogenetic protein, TGF-β/BMP)信号通路有关。无翅型MMTV整合位点家族（wingless-type MMTV integration site family, WNT）信号通路中的关键基因WNT5A和卷曲蛋白受体9（frizzled receptor 9, FZD9）在2周时表达升高,而连环蛋白β1（catenin beta 1, CTNNB1）在4周时表达升高。结论：侧壁开窗法上颌窦底提升术2周后转录表达谱变化以免疫-炎症反应和破骨反应下调、骨生成相关基因表达升高为特点,骨再生的过程还与神经生成和血管生成过程相关。在骨再生的过程中,TGF-β/BMP和WNT信号通路起重要作用,WNT信号通路的作用复杂。     

口腔颌面部多间隙合并颈部及胸腔纵隔感染的回顾性分析

目的探讨口腔颌面部多间隙感染合并颈部及胸腔纵隔感染的诊断、治疗及预后。方法回顾性分析5例口腔颌面部多间隙感染合并颈部及胸腔纵隔感染患者的临床资料,分析其感染来源、临床特点、并发症及处理。结果 5例患者均为牙源性感染,临床表现为颌下、口底、颈部广泛肿胀,脓液形成。影像学显示2例纵隔及胸腔内有脓液形成。经过及时广泛切开引流及多学科综合治疗,4例痊愈,1例死亡。结论对于临床上颌面多间隙感染合并颈部广泛肿胀的病例应予高度重视,影像学检查在早期诊断中有很高价值,应尽早行多部位的切开引流及多学科综合治疗。     

改良式小梁切除联合深层巩膜切除术

小梁切除术一直是最为经典的抗青光眼手术,也是适应证最广、降眼压幅度最大的外滤过性手术代表。根据小梁切除术的降眼压机制及其术式改良的演变与发展,本文在既往各种术式改良的基础上,总结了一种较为优化的术式——小梁切除联合深层巩膜切除术。此术式发挥了多种引流机制、降眼压幅度大、可有效避免滤过泡相关远期并发症;手术适应证与小梁切除术相同,更适合于中晚期青光眼患者;操作简单、易学;术后并发症相对较少。(眼科,2022,31:175-180)     

乳腺干细胞培养基的建立及有效性验证

背景：干细胞培养基,尤其是乳腺干细胞培养基现阶段尚无有效的制备方法。目的：利用Sca-1＋乳腺细胞验证自制乳腺干细胞培养基的有效性。方法：用BM培养基培养乳腺器官样小体,6 d后以免疫荧光方法监测成纤维细胞Sca-1和vimentin的表达。筛选出MaECM培养基,培养乳腺细胞6 d后,免疫磁珠筛选Sca-1＋和Sca-1-细胞群,流式细胞术分析Sca-1阳性细胞的纯度,1×10^4 Sca-1＋或Sca-1-细胞种植在4只鼠双侧乳腺脂肪垫上,6-8周后取出乳腺脂肪垫,以卡红整体染色和苏木精-伊红染色分析长出乳腺的结构数量。结果与结论：乳腺器官样小体用BM培养基培养6 d后,检测到大量Sca-1和vimentin阳性的成纤维细胞,说明BM培养基不适合分离Sca-1＋乳腺干细胞。筛选出的MaECM培养基能够抑制成纤维的生长。磁珠筛选后,流式细胞术检测Sca-1＋细胞在Sca-1＋和Sca-1-细胞群的纯度分别是92%和5%。移植实验显示在8个种植Sca-1＋细胞的脂肪垫生长出6个乳腺结构;而在8个种植Sca-1-细胞的脂肪垫中除1只鼠死亡,其余脂肪垫中均未长出乳腺结构。提示MaECM培养基适用于培养鼠乳腺干细胞。     

冲顶式上颌窦底提升植骨同期牙种植的实验研究

[目的]探讨用Summer's骨凿冲顶提升上颌窦底后窦底骨质和黏骨膜改变情况以及种植体与周围组织结合生物学变化,为临床应用该项技术提供进一步可靠的实验依据.[方法]16只狗随机分为提升高度不同(2 mm、4 mm)2组,每只狗植入种植体4枚,一侧植骨,一侧不植骨,在不同时间(3、6、12、24周)取材.标本经大体观察,放射检查,组织学检查,四环素荧光检查,抗BMP-2免疫组化检测.[结果]移植骨愈合良好,种植体形成骨结合,提升4 mm不植骨种植体顶端无骨形成.[结论]上颌窦提升2 mm种植体顶端有骨存在,提升4 mm时,植入种植体顶端多数情况下无骨存在.     

成骨诱导或干扰素γ预处理对胎儿骨髓源Flk-1+间充质干细胞免疫活性的调节

背景：骨髓间充质干细胞在修复异基因组织最终分化为特定细胞后，理论上会因MHC及共刺激分子上调而引起组织排斥，但实际上并没有发生排斥反应。推测骨髓间充质干细胞在异基因组织分化诱导及炎性因子微环境作用下，有可能分化成一种仍具有免疫调节活性的终末细胞，不被机体的免疫识别系统清除掉。 目的：在体外运用成骨诱导及干扰素γ预处理来模拟体内组织分化及炎性因子微环境，观察在此作用下胎儿骨髓源Flk-1+间充质干细胞是否能够保持其在自然条件下所呈现的免疫学活性。 设计、时间及地点：细胞学体外对照观察，于2007-09/2008-05在北京协和医学院基础学院完成。 材料：2例骨髓样品取自流产胎儿，由北京回龙冠妇产医院提供。外周血样品取自15~35岁健康志愿者，由北京三○七医院提供。地塞米松等诱导因子和干扰素γ为美国Sigma公司产品。 方法：Ficoll法分离胎儿骨髓单个核细胞，取白环层以上细胞，以1×106/cm2密度接种，贴壁法纯化，采用阴性分选法去除CD45+、GlyA+和CD34+细胞，分离扩增得到Flk-1+骨髓间充质干细胞。以淋巴细胞分离液梯度离心分离外周血单个核细胞，用于混合淋巴细胞培养实验及有丝分裂原刺激的淋巴细胞增殖实验。 主要观察指标：流式细胞仪鉴定细胞表型，用成骨、成脂、成软骨和成内皮诱导液检测其分化潜能，成骨诱导或干扰素γ预处理后细胞表面抗原表达、对淋巴细胞增殖及活化抗原CD69、CD25表达的影响，对白细胞介素10和转化生长因子β分泌水平的影响。 结果：光镜下骨髓来源的间充质干细胞为成纤维细胞样贴壁生长，均高表达Flk-1，同时高表达黏附分子CD29、CD44、CD105，造血细胞标志CD34、CD45呈阴性；可向成骨、成脂肪、成软骨和成内皮方向分化；低表达MHC-Ⅰ类分子，不表达　　　　MHC-Ⅱ类分子，成骨诱导能上调MHC-Ⅰ表达，干扰素γ预处理可上调MHC-Ⅱ表达。骨髓源Flk-1+间充质干细胞经成骨诱导7 d或干扰素γ预处理48 h后，仍呈低免疫原性，不激发异基因淋巴细胞增殖，抑制植物血凝素刺激的淋巴细胞增殖效果明显增强（t=2.57，P < 0.05），可进一步抑制CD69和CD25的表达，ELISA检测显示其培养上清分泌白细胞介素10水平增强（t=2.66，P < 0.05），但分泌转化生长因子β水平经成骨诱导后无明显变化，干扰素γ预处理后则明显升高。 结论：经成骨诱导或干扰素γ预处理后，骨髓源Flk-1+间充质干细胞仍能保持低免疫原性，且免疫调节活性进一步提高。     

正常眶部受植区骨密度的CT多平面影像测量分析

目的:利用螺旋CT定量评价正常眶部受植区骨密度,为眶部种植手术提供参考.方法: 选择60 例健康成人(男30 例,女30 例)行64 排螺旋CT薄层容积扫描,以时钟方式行多平面图像重建,在重建影像上测量受植区下方眶骨骨密度并进行统计学分析.结果: 眶部受植区不同位置的骨密度值差异较大,左右侧相同位置骨密度无显著差异,骨密度值随年龄变化而改变,且在一定的年龄段骨密度值具有性别差异.结论: 利用螺旋CT可以评价眶部受植区的骨密度,CT值具有定量性、客观性,对眶部种植体植入位置的选择具有参考价值.     

上颌窦外提升及同期牙种植动物模型的建立

目的：建立一种可行上颌窦外提升及同期种植体植入的动物模型。方法：1-1.5岁的成年狗8只为实验对象,其中2只行上颌窦区解剖学观察,另6只拔除双侧上颌第一磨牙,使用上颌窦外提升法提升上颌窦,同期植入种植体及自体骨。术后3月处死动物,观察种植体的大体及新生骨的情况。结果：犬上颌窦有足够的体积行上颌窦外提升术.术后3月种植体稳固,牙槽嵴丰满,种植体顶部有新生骨形成。结论：建立犬上颌窦外提升及同期牙种植动物模型具有一定的可行性。