胡椒碱对人肝癌HepG2细胞抗肿瘤活性的体外实验研究

目的 探讨胡椒碱(piperine)对人HpeG2肝癌细胞株的增殖、杀伤和细胞凋亡的影响,为肝癌的治疗提供理论依据.方法 体外培养的HpeG2细胞,采用MTT比色法检测不同浓度胡椒碱对体外培养的HepG2细胞和新分离的外周血白细胞的增殖抑制作用.Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态,采用流式细胞术测定胡椒碱对HepG2细胞的凋亡.结果 胡椒碱对HepG2细胞增殖的抑制率随着浓度的升高而增加,半量抑制浓度(IC50)为15.13±3.21 μmol/L,低于其对外周血白细胞的抑制率(64.52±5.32 μmol/L).Hoechst 33258染色后,胡椒碱处理癌细胞组表现出典型的细胞凋亡特征,流式细胞仪检测20 μmol/L的胡椒碱处理HepG2细胞24 h后,细胞凋亡率由对照组的2.89%上升到了21.76%.结论 胡椒碱具有抑制HepG2细胞增殖和诱导凋亡的抗肿瘤活性,有应用于肝癌治疗的潜在价值.     

人参皂甙抗小鼠手术应激的细胞免疫调节效应

人参皂甙对小鼠三种形式的手术应激(截肢术、胸壁手术和剖腹术)介导的细胞免疫功能抑制,具有显著的调整和促进恢复作用,可部分拮抗应激小鼠天然杀伤细胞和抗体依赖细胞介导细胞毒活性的抑制,完全拮抗腹腔巨噬细胞吞噬功能的受抑状态,使其在应激期间维持正常或稍高于正常水平。上述结果表明,人参皂甙有希望成为一种治疗应激介导的免疫抑制药物。     

TA克隆及双链DNA：测序：介绍一种快速克隆及分析PCR产物的方法

将人酸性纤维母细胞生长因子’（ａＦＧＦ’）ｃＤＮＡ的ＰＣＲ产物以ＴＡ连接方式克隆入ｐＣＲ￣（ＴＭ）ＩＩ质粒，然后采用Ｔ７和Ｓｐ６启动子特异性引物对克隆的片段以双脱氧未端终止法进行双链ＤＮＡ测序。结果表明这项技术是一种快捷而可靠的克隆及分析ＰＣＲ产物的方法     

EDS对新生SD大鼠海马神经干细胞增殖分化的作用

目的观察在不同剂量蜕皮甾酮（ecdysterone,EDS）作用下,体外培养的神经干细胞（neural stem cells,NSCs）增殖、分化情况。方法原代培养新生SD大鼠海马NSCs,经EDS处理后,传代细胞克隆形成率、四甲基偶氮唑盐比色法观察神经干细胞增殖能力的变化,免疫荧光细胞染色技术、流式细胞术检测神经干细胞分化情况。结果与对照组相比,中低剂量组（50、100、200mg／L）,对大鼠海马NSCs增殖能力无显著影响,而高剂量的EDS（400mg／L及800mg／L）干预组则明显抑制了NSCs的增殖。在分化条件下,EDS200mg／L干预组显著提高NSCs向神经元分化的比例,其余各组无统计学差异。结论EDS能够调节体外培养的大鼠海马NSCs的增殖和分化水平,在合适的剂量下明显提高了神经元的分化比例。     

土木香内酯通过调节细胞周期相关蛋白的表达抑制慢性粒细胞白血病耐药细胞株K562/ADR增殖

目的 研究土木香内酯对慢性粒细胞白血病(CML)耐药细胞株K562/ADR增殖、周期分布以及周期相关蛋白的影响.方法 选用0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μmol/L土木香内酯作用K562/ADR细胞12、24、48 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测土木香内酯对K562/ADR细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测土木香内酯对K562/ADR细胞周期分布的影响,Western blot检测周期相关蛋白的表达.结果 土木香内酯能够显著抑制K562/ADR细胞增殖,半数抑制浓度为5.0 μmol/L.流式细胞术检测结果显示,不同浓度(0、2.5、5.0、7.5 μmol/L)的土木香内酯能够使K562/ADR细胞周期阻滞在G2/M期,G2/M期细胞比例由(15.8±1.7)％分别提高到(21.0±2.4)％、(26.4±2.7)％、(30.1±3.9)％(P＜0.05).土木香内酯能够明显降低CDK1、CyclinB1的表达,上调周期抑制蛋白p21的表达.此外,土木香内酯能够有效地抑制bcr-abl融合蛋白的表达水平.结论 土木香内酯可能通过调节细胞周期相关蛋白的表达介导K562/ADR细胞G2/M期阻滞,抑制细胞的增殖.