二氢杨梅素对绒毛膜癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的 探讨二氢杨梅素（DMY）对绒毛膜癌（绒癌）JEG-3及JAR细胞增殖和迁移能力的影响。 方法 MTT法检测不同浓度的二氢杨梅素(0 mg/L, 20 mg/L, 40 mg/L, 60 mg/L, 80 mg/L)作用一定时间后,对绒癌JEG-3和JAR细胞增殖能力的影响;细胞划痕实验和Transwell法检测不同浓度二氢杨梅素(0 mg/L, 40 mg/L, 60 mg/L, 80 mg/L)分别作用绒癌JEG-3细胞及JAR细胞一定时间后,对其迁移能力的影响;Real-time PCR和Western blotting方法分别检测不同浓度二氢杨梅素(0 mg/L, 40 mg/L, 60 mg/L, 80 mg/L)作用绒癌JEG-3及JAR细胞后,基质金属蛋白酶2（MMP-2）mRNA和蛋白表达水平的影响。 结果 不同浓度二氢杨梅素作用绒癌JEG-3和JAR细胞24 h和48 h后,随着二氢杨梅素浓度增加,对JEG-3和JAR细胞增殖抑制作用增强（P＜0.05）。二氢杨梅素作用绒癌JEG-3及JAR细胞后,显著抑制细胞迁移能力,且具有浓度依赖性（P＜0.05）。不同浓度二氢杨梅素作用JEG-3和JAR细胞后,MMP-2 的mRNA和蛋白表达水平明显下降（P＜0.05）。 结论 二氢杨梅素能够抑制JEG-3及JAR细胞的增殖能力且具有浓度依赖性,同时二氢杨梅素可能通过下调绒癌JEG-3及JAR细胞中MMP-2 mRNA和蛋白的表达,抑制绒癌细胞的侵袭迁移。     

CCL2与M2巨噬细胞在慢性应激患者结直肠癌中表达及其相关性研究

目的 在慢性应激患者结直肠癌中,探究CCL2对M2巨噬细胞极化的影响及其意义。方法 采用生物信息学方法,预测CCL2与结直肠癌肿瘤分期、患者预后的相关性;利用免疫组织化学法,检测结直肠癌组织中CCL2和M2巨噬细胞标记物CD163的表达情况;Western Blot检测结直肠癌组织中CCL2、M2巨噬细胞标记物CD163、M1巨噬细胞标记物CD80的表达情况。统计分析CCL2、CD80和CD163在慢性应激和非应激的结直肠癌患者组织的表达差异及其相关性。结果 CCL2与M2巨噬细胞标记物CD163在慢性应激患者结直肠癌组织中显著高表达,且存在显著正相关。结论 在慢性应激的结直肠癌患者中,CCL2有可能通过影响M2巨噬细胞的极化,从而影响患者预后。     

异丙肾上腺素诱导的慢性应激焦虑样行为学检测

目的 阐明异丙肾上腺素长期作用可以诱导昆明小鼠出现慢性应激焦虑样行为.方法 50只昆明小鼠随机分为对照组、慢性应激组、异丙肾上腺素(Isoprenaline,ISO)组、慢性应激+ICI118,551(ICI)处理组、ISO+ICI 118,551(I S O+I C I)处理组,每组10只.对照组:每天腹腔注射生理盐水;慢性应激组:每天进行慢性应激处理;ISO处理组:每天腹腔注射ISO(5 mg/kg);慢性应激+ICI处理组:每天慢性应激处理后,腹腔注射ICI(0.2 mg/kg);ISO+ICI处理组:每天腹腔注射ISO(5 mg/kg)和ICI(0.2 mg/kg).结果 高架十字迷宫结果中,慢性应激组和ISO组开臂停留时间、进入开臂次数、开臂停留时间百分比和进入开臂次数百分比均显著低于对照组(P<0.05).明暗箱结果中,慢性应激组和ISO处理组明箱停留时间、明箱停留时间百分比、明箱活动次数和穿梭次数显著低于对照组(P<0.05);暗箱停留时间显著高于对照组(P<0.05).结论 在β-AR激动剂异丙肾上腺素长期作用下,昆明小鼠出现了慢性应激焦虑样行为.     

二氢杨梅素联合依托泊苷对绒毛膜癌细胞JAR的抑制作用

目的 探讨二氢杨梅素（DMY）联合依托泊苷（VP16）对绒毛膜癌细胞JAR的抑制作用及其相关机制。方法 体外培养JAR细胞,设空白对照组、DMY组、VP16组以及DMY与VP16联合（DMY+VP16）组。MTT法检测各组细胞增殖情况;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术分析各组细胞的凋亡率;克隆形成实验检测细胞生存能力;Western blotting法检测凋亡抑制蛋白Bcl-2、细胞凋亡抑制蛋白2（c-IAP2）表达水平。 结果 MTT检测结果显示,与空白对照组比较,DMY组、VP16组及DMY+VP16组在24 h和48 h时间点的细胞存活率均下降,且DMY+VP16组细胞存活率下降最为明显;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术结果显示,与对照组相比各实验组凋亡率均有增高,DMY+VP16组凋亡率明显高于各单独用药组;克隆形成实验结果显示,对于JAR细胞,实验组的克隆球数目均少于对照组,且DMY+VP16组克隆球数目最少;对于正常肝脏HL7702细胞,DMY组与对照组相比无明显差异,VP16组与DMY+VP16相比亦无明显差异;Western blotting实验结果显示,与对照组相比,无论DMY和VP16单独还是联合使用均可下调Bcl-2、c-IAP2蛋白表达,同时DMY+VP16组下调作用最明显。 结论 二氢杨梅素联合依托泊苷明显增强对绒毛膜癌细胞JAR的生长抑制作用,联合使用可以减少化疗药物VP16的用量,其抑制肿瘤细胞作用可能与下调Bcl-2、c-IAP2蛋白的表达有关。     

人绒毛膜癌裸鼠原位移植模型的建立

目的建立人绒毛膜癌裸鼠原位移植瘤模型。方法培养人绒毛膜癌细胞系JAR,制备JAR单细胞悬液,给5只8周龄BALB/c裸鼠经皮下注射建立皮下移植瘤模型。待裸鼠皮下成瘤后,无菌条件下取瘤组织并切成1 mm^3组织块,通过手术方式植入10只10周龄BALB/c裸鼠子宫腔内,裸鼠濒死状时4%水合氯醛(10 g/kg)腹腔注射麻醉处死,观察子宫成瘤及腹腔转移情况。解剖取子宫原位移植瘤、腹腔内转移瘤、腹腔淋巴结及其他脏器组织标本,通过组织病理学检查进行鉴定。结果10只BALB/c裸鼠中共有7只裸鼠子宫内可见移植瘤肿块形成,其中2只可同时观察到子宫移植瘤和腹膜转移瘤。在病理学形态和结构上,皮下移植瘤模型、原位移植模型和腹膜转移瘤的瘤细胞与人绒毛膜癌细胞系JAR一致。结论成功建立人绒毛膜癌JAR细胞的BALB/c裸鼠原位移植瘤模型。     

慢性应激-肿瘤微环境对肿瘤影响的研究进展

应激是机体内环境稳态被破坏,或者面临破坏威胁时产生的适应性反应;根据应激源的持续时间分为急性应激和慢性应激.急性应激是指机体面对紧急危险情况下产生的非特异性适应性改变,通常有积极的影响,比如可以提高记忆力,暂时改善大脑的功能.慢性应激则是机体长期处于失稳状态,如生活、社会、职场压力和逆境等持续产生的负面影响,不仅会产生...