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放射诱导经Egr-1启动子调控的腺病毒介导CDglyTK基因的肿瘤靶向表达 总被引:13,自引:1,他引:12
目的:构建由Egr-1基因启动子驱动CDglyTK基因表达的腺病毒载体,通过放射诱导调控CDglyTK基因的肿瘤靶向表达,用于肝癌的基因-放射治疗,方法:利用细菌内高效同源重组法,制备腺病毒载体AdEger-CD/TK.MM45T.Li肝癌细胞感染AdEger-CD/TK后,体外观察γ射线照射诱导CDglyTK基因表达及在前药5-FC、GCV存在的条件下钉对存活率的变化。利用荷瘤小鼠肝癌模型观察不同处理的抑瘤效应。结果:体外实验结果显示,γ射线照射可诱导CDglyTK基因在MM45T.Li肿瘤细胞内的表达,并呈剂量依赖性;显著增强细胞对前药5-FC、GCV的敏感性(P<0.01);当5-FC和GCV同时存在时具有明显的协同效应。体内抗肿瘤实验结果提示,与单纯肿瘤局部照射(TLI)、瘤内注射AdEger-CD/TK+腹腔注射5-FC+GCVD土产且相比,瘤内注射AdEger-CD/TK+腹腔注射5-FC+GCV合并TLI组的抗瘤效果最好(P<0.01),并可使30%的肿瘤完全消退,且未见全身毒性反应的增加,结论:利用放射调控CDglyTK基因的肿瘤靶向表达,是一种安全、有效的肿瘤基因治疗新策略。 相似文献
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本文作者利用肿瘤血道转移和自发转移模型,从整体和离体两方面观察75mGyX射线全身照射对小鼠抗瘤能力的影响。结果发现:①与假照组相比,照射组小鼠B16黑色素瘤血道肺转移结节数明显降低(P<0.01);过继转移至同系小鼠体内的脾细胞,可明显抑制Lewis肺癌(LLC)的局部生长和自发肺转移(P<0.05~0.01)。②与假照组相比,体外检测照射组小鼠脾细胞对ConAIL-2反应性增强(P<0.01),NK活性明显提高(P<0.01);体内检测其巨噬细胞功能也显著增强(P<0.01),125IUdR标记黑色素瘤细胞在肺内的存留率显著降低(P<0.01)。上述结果提示,小剂量辐射可明显提高小鼠的抗瘤能力;机体免疫功能的增强可能是其抗肿瘤效应的主要机理之一。 相似文献
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从体内体外观察75mGyX线全身照射对小鼠免疫功能的影响,发现照射后小鼠胸腺和脾的有核细胞数增多,体外检测胸腺细胞对3H—TdR的掺入增加,脾细胞对ConA和IL—2的反应性及其NK活性均显著提高.整体条件下检测照射组小鼠的巨噬细胞功能增强,肺内B16黑色素瘤的转移结节数明显降低。上述结果提示,75mGyX线全身照射可刺激多种免疫细胞功能,提高机体免疫功能的总体水平。 相似文献
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恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定。治疗策略也不下12种,但何种策略为佳尚无定论。目前采用的策略多数为单一基因治疗,鉴于肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的,该研究探索多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究。首先克隆一系列的治疗基因,构建不同载体及调控原件, 相似文献
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目的 采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建靶向KLF4的基因编辑质粒,建立CRISPR/Cas9-sgKLF4人正常胃黏膜GES-1细胞株,观察KLF4基因敲除效果及其对细胞生物学行为的影响.方法 设计靶向KLF4基因的sgRNA序列,将合成的片段插入到CRISPR/Cas9质粒骨架载体pX459中,再将重组后的质粒做转化,挑取克隆,扩增后提质粒进行测序验证正确性.将构建好的重组质粒体外转染入人胃黏膜细胞GES-1中,利用嘌呤霉素进行筛选获得KLF4敲除的克隆细胞,应用Western blot技术检测未转染细胞和克隆细胞中KLF4蛋白的表达情况,平板克隆实验检测KLF4敲低后克隆形成能力,MTT实验检测其增殖能力,Transwell实验检测其迁移能力.结果 经测序验证,成功构建了靶向KLF4的重组质粒pX459-KLF4-sgRNA,经Western blot方法验证,转染该重组质粒后人胃黏膜上皮细胞株GES-1的KLF4蛋白表达量明显降低,行为学实验结果表明,GES-1细胞敲低KLF4基因后克隆形成能力、增殖能力以及迁移能力都明显增强.结论 成功构建了靶向KLF4的CRISPR/Cas9基因编辑质粒载体及KLF4基因敲低的稳定细胞株GES-1,KLF4基因敲低后GES-1细胞生物学行为的改变证实其抑癌基因活性. 相似文献
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恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定。治疗策略也不下12种,但何种策略为佳尚无定论。目前采用的策略多数为单一基因治疗,鉴于肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的,该研究探索多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究。首先克隆一系列的治疗基因,构建不同载体及调控原件,然后进行不同基因的联合治疗作用,并与放射治疗相结合,最后还筛选新的肿瘤治疗侯选基因,旨在为临床提供更有效的肿瘤基因治疗策略和方案。 相似文献
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恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定。治疗策略也不下十余种,但何种策略为佳尚无定论。目前采用的策略多数为单一基因治疗,而肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的。本研究建立一种细胞因子基因工程人肝癌和胃癌细胞“瘤苗”,用于经手术切除的肝癌或胃癌患者,消灭微小残存癌细胞, 相似文献
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就75mGyX线全身照射对小鼠免疫功能的影响进行了研究.结果发现,与未照射的对照组相比,照射后24h小鼠脾及胸腺有核细胞数明显增加(P<0.05),巨噬细胞功能增强(P<0.01),脾细胞NK细胞毒活性及其对ConA的反应性明显提高(P<0.01).上述结果提示,小剂量X线全身照射可对机体的免疫机能产生刺激作用. 相似文献
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