产气肠杆菌菌体内核苷磷酸化酶酶活测定条件的分析

背景与目的：以产气肠杆菌完整细胞为酶源合成阿糖腺苷，确定合适的酶活测定方法和酶反应条件。方法：用分光光度法测定不同菌体浓度、不同反应时间条件下酶反应生成的碱基。结果：尿苷磷酸化酶的酶活测定条件为：0．5%菌体量，10mmol／L尿苷，60℃水浴下反应20min。胸苷磷酸化酶的酶活测定条件为：3％菌体量，10mmol／L胸苷，60℃水浴下反应10min。嘌呤核苷磷酸化酶的酶活测定条件为：10mmol／L肌苷溶液．60℃水浴下反应20min。结论：用分光光度法测定酶反应生成的碱基，据此判断产气肠杆菌菌体内核苷磷酸化酶酶活，方法简单易操作，灵敏度高，反应体系稳定。