某些肿瘤标志物基因表达检测在胃肠道恶性肿瘤中的意义

近年,一些肿瘤标志物已被证实与胃肠道恶性肿瘤转移及患者预后密切相关。本文着重介绍经典的肿瘤标志物——癌胚抗原（CEA）和细胞角蛋白20（cytokeratin 20,CK20）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其抑制剂、生存素（survivin）等肿瘤标志物的结构、功能及其基因表达监测在恶性肿瘤转移和复发方面的应用进展。     

恶性肿瘤外周血基质金属蛋白酶2及其抑制物表达的临床研究

目的：研究基质金属蛋白酶2（MMP-2）及金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）表达在胃癌、肠癌转移及预后判断中的作用。方法：采用逆转录荧光实时定量PCR的方法检测58例结肠癌患者，52例胃癌患者外周血中MMP-2和TIMP-2 mRNA的表达水平。结果：胃癌、肠癌患者MMP-2表达均高于正常对照（P〈0．01）；其中，有局部浸润、淋巴结肿大、远处脏器转移者的MMP-2 mRNA和TIMP-2／MMP-2比值与未转移者差异有统计学意义（P〈0．01）；TIMP-2／MMP-2比值对判断胃癌、肠癌瘤转移的灵敏度分别为86．6％、89．2％，特异性为81．8％、83．3％。结论：基质金属蛋白酶2的表达升高与恶性肿瘤的转移密切相关，TIMP-2／MMP-2比值是恶性肿瘤转移和预后判断的良好指标。     

上海地区人群抗凝蛋白C基因突变和多态性研究

目的研究上海地区人群抗凝蛋白C(PC)活性的正常范围和PC基因突变及多态性的分布;研究活化蛋白C抵抗(APC-R)的分布及其与相应已知基因突变的关系。方法采用发色底物法检测867例上海健康人PC活性,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测PC抗原,采用凝血法检测APC-R,采用聚合酶链反应(PCR)扩增PC基因所有外显子及其侧翼序列和5′、3′非翻译区,采用直接测序法检测所有扩增片段。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测APC-R相关多态性。结果 PC活性和APC-R的正常范围分别为67%～147%和114.7～195.2S。不同性别研究对象PC和APC-R测定结果间差异有统计学意义(P<0.05)。PC活性随年龄增长而增加(P<0.01)。在对10例PC活性降低标本的基因检测中发现2个基因突变,即Ala121Thr(G3406A)和Pro247Ser(C8454T)。据此,计算出上海地区健康人群PC基因突变的频率为0.23%。在对15例APC-R阳性标本的检测中未发现FV多态性位点(FV Arg306Thr、Arg306Gly、Arg506Gln、His1299Arg和Ile359Thr)和PT G20210A。结论 PC基因突变的频率为0.23%;APC-R与已知的FV多态性位点无关;PC基因突变Ala121Thr和Pro247Ser可能是中国人易栓症的危险因素。     

遗传性抗凝蛋白缺陷症与静脉血栓关系的研究进展

抗凝蛋白缺陷症是静脉血栓栓塞症发病的主要危险因素之一。抗凝蛋白缺陷症分为遗传性和获得性两种,其中遗传性抗凝蛋白缺陷症主要是由蛋白C（PC）、蛋白S（PS）和抗凝血酶（AT）缺陷症导致。PC、PS和AT缺陷症在静脉血栓发病中所占的比率分别为2．0％～8．0％、7．3％和1．0％～8．0％;不同抗凝蛋白缺陷所导致的临床症状差别不大,但AT缺陷症的临床表现最为严重。     

恶性肿瘤外周血微转移检测的临床研究

目的 研究外周血CEA、CK20mRNA表达检测在胃恶性肿瘤转移及预后判断中的作用.方法 采用逆转录实时定量PCR(Real-time PCR)法检测52例经病理确诊的胃恶性肿瘤患者,28例胃良性肿瘤患者,29例健康体检对照者外周血及组织标本CEAmRNA、CK20mRNA表达;电化学光免疫测定外周血CEA水平,结果血清CEA在胃良恶性肿瘤中的阳性检出率有显著差异(P<0.05),但在是否有远处转移者中的差异无统计学意义(P>0.05).胃癌患者外周血可检测到不同水平的CEA及CK20mRNA表达,其中,CEAmRNA的表达与胃癌病理类型及分期相关;而CK20mRNA的表达与分期及有无淋巴结转移相关;两者联合检测较单个指标的检出阳性率高.结论 胃癌CEA、CK20表达可能与转移相关;采用实时定量RT-PCR检测外周血中CEA、CK20基因的表达可能为一种较理想的无创性胃癌诊断、转移的检测方法;血清CEA水平不能反映胃恶性肿瘤的转移情况.     

胃癌患者外周血癌胚抗原、细胞角蛋白20及生存素基因检测的临床意义

目的:研究癌胚抗原(CEA)mRNA、细胞角蛋白20(CK20)mRNA及生存素(survivin)mRNA与胃癌患者诊断、转移的相关性,评估其检测的临床应用价值。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法联合检测79例胃癌、56例癌前病变及50例正常对照者外周血survivin、CEA、CK20基因的转录,并分析其与临床病理及预后关系。结果:正常对照组外周血未检测到CEA、CK20、survivin mRNA的转录,癌前病变患者survivin转录检测的阳性率为16.1%,平均拷贝数为1.6±0.8。胃癌外周血CEA、CK20、survivin mRNA转录阳性率分别为48.1%、60.8%、87.3%,其阳性率和肿瘤的分期、淋巴结转移等相关。Survivin mRNA高转录者5年生存率显著低于低转录者。胃癌患者外周血CEA、CK20、survivin mRNA转录的联合检测对肿瘤预后的判断具有较高的特异度和阳性似然比。结论:实时RT-PCR联合检测胃癌外周血中多个肿瘤标志物基因的表达,是一种较为理想的监测肿瘤复发、判断预后的方法。     

外周血CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA水平与乳腺癌的关系

目的研究外周血癌胚抗原（CEA）、生存素（Survivin）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）mRNA表达与乳腺癌的关系。方法采用逆转录实时定量聚合酶链反应（real-time PCR）检测54例乳腺癌患者和23名正常对照组外周血MMP-2 mRNA、TIMP-2 mRNA、CEAmRNA和Survivin mRNA的表达水平。以正常对照组结果为正常参考范围,分析乳腺癌患者外周血CEA mRNA和Survivin mRNA表达的阳性率。结果乳腺癌患者外周血可检测到不同水平的CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA的表达。Ⅰ/Ⅱ期及Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌组外周血MMP-2 mRNA表达量高于正常对照组（P〈0.01）;TIMP-2/MMP-2比值则低于正常对照组（P〈0.05、P〈0.01）;Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CEAmRNA和Survivin mRNA表达量高于正常对照组（P〈0.01）。Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血MMP-2 mRNA、CEA mRNA、Survivin mRNA表达量及TIMP-2/MMP-2比值与Ⅰ/Ⅱ期乳腺癌患者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CEAmRNA和Survivin mRNA表达的阳性率明显高于Ⅰ/Ⅱ期乳腺癌患者（P〈0.01、P〈0.05）。结论采用逆转录real-time PCR检测外周血CEA、Survivin、MMP-2 mRNA的表达以及TIMP-2/MMP-2比值可以成为一种无创性乳腺癌辅助诊断、分期、转移的方法。     

外周血CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA水平与乳腺癌的关系

目的研究外周血癌胚抗原(CEA)、生存素(Survivin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)mRNA表达与乳腺癌的关系。方法采用逆转录实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测54例乳腺癌患者和23名正常对照组外周血MMP-2 mRNA、TIMP-2 mRNA、CEAmRNA和Survivin mRNA的表达水平。以正常对照组结果为正常参考范围,分析乳腺癌患者外周血CEA mRNA和Survivin mRNA表达的阳性率。结果乳腺癌患者外周血可检测到不同水平的CEA mRNA、Survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA的表达。Ⅰ/Ⅱ期及Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌组外周血MMP-2 mRNA表达量高于正常对照组(P<0.01);TIMP-2/MMP-2比值则低于正常对照组(P<0.05、P<0.01);Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血CEAmRNA和Survivin mRNA表达量高于正常对照组(P<0.01)。Ⅲ/Ⅳ期乳腺癌患者外周血MMP-2 mRNA、CEA mRNA、Survivin mRNA表达量及TIMP-2/MMP-2比值与Ⅰ/Ⅱ期乳腺...     

结直肠癌患者外周血生存素检测的临床意义

目的采用实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PGR）技术，检测结直肠癌患者外周血中生存素基因的表达，并分析其与转移之间的关系，探讨其成为无创性结直肠癌诊断、转移检测指标的可能性。方法取58例结直肠癌患者，46例非癌性肠道病变患者和29名健康成人的外周血，用实时定量RT-PCR的方法检测Survivin基因的表达，分析其与临床病理因素之间的关系。结果正常对照组外周血中未检测到Survivin mRNA表达转录本。癌前病变患者生存素表达检测率为6．25％，平均拷贝数为1．77&#177;0．75；肠癌组患者生存素表达检测率为79．3％，平均拷贝数为5．62&#177;1．32，两者差异有统计学意义（P〈0．01）。Survivin的表达在各性别、年龄、及不同分化组之间差异无统计学意义，而有、无淋巴结转移组之间以及Dukes分期C、D组与A、B组之间则发现Survivin的表达显著增高（P〈0．05）。生存分析表明，Survivin mRNA的高表达者4年生存率（62．9％）显著低于低表达者（86．6％）（P〈0．05）。回归分析发现，Dukes分期为影响肠癌预后有的独立因素。结论生存素基因在结肠癌患者中存在过表达，并可能与转移有关，采用实时定量RT—PGR检测外周血中生存素基因的表达，可能成为一种较理想的无创性结肠癌诊断、转移检测方法。     

外周血肿瘤标志物与肠癌预后关系的临床研究

目的检测肠癌患者外周血中生存素(survivin)基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制物(TIMP-2)的基因表达,并探讨其在肿瘤诊断、转移及预后判断中的作用。方法对101例肠癌、68例癌前病变及50例正常对照者,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测外周血中survivin mRNA、MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA的表达水平。并分析其与临床病理因素之间的关系。结果 Survivin mRNA的转录在正常对照组未检测到,良性病变者表达率为7.4%,肠癌组表达率为72.3%,其阳性率与疾病分期及淋巴转移等相关。肠癌患者MMP-2mRNA表达均高于正常对照和良性病变组(P0.005);MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA/MMP-2 mRNA比值与肿瘤分期及转移相关(P0.01);Sur-vivin mRNA高转录者5年生存率显著低于低转录者(P0.01)。结论 Survivin mRNA、MMP-2 mRNA的高表达、TIMP-2 mRNA/MMP-2 mRNA比值与肠癌的分期、转移密切相关,是肠癌转移和评估预后的良好指标,联合检测有更高的判断价值。