核酸转录介导的扩增中室内质控方法的探讨

目的 比较箱体图法和Levey-Jennings质控图法在转录介导的扩增中对室内质控的监测情况.方法 每天使用同一台机器检测同一批号的HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA室内质控品的待测物信号/临界值(S/CO值).使用SPSS17.0软件绘制箱体图并判断离群值,并用K-S检验判断室内质控品S/CO值是否服从正态分布;使用Excel软件连续测定前20次室内质控品的S/CO值为参数绘制Levey-Jennings质控图.结果 共收集86组HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA室内质控品S/CO值,箱体图法分别出现2次、0次、1次离群值;Levey-Jennings质控图法分别出现4次、4次、6次失控值;室内质控品S/CO值经过K-S检验服从正态分布(P>0.05),适用于Levey-Jennings质控图的绘制.结论 应用外部质控品S/CO值绘制的Levey-Jen-nings质控图法相对于箱体图法,更有助于检验核酸检测体系的稳定性.     

表没食子儿茶素没食子酸酯( EGCG) 对免疫性肝损伤的保护作用及其机制研究

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对雷公藤甲素(TP)诱导的免疫性肝损伤的保护性作用及其作用机制。方法:雌性C57BL/6 小鼠随机分为4 组,即正常对照组、EGCG 对照组、TP 组、EGCG 治疗组。以赖氏法检测血清中ALT 水平,以分光光度法检测肝匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)的变化情况,以HE染色观测小鼠肝脏组织形态学变化,以ELISA 方法检测肝脏中白细胞介素(IL)-17 和IL-6 的表达水平,以Western blot 方法检测肝脏中Toll 样受体4(TLR4)的表达情况。结果:TP 组小鼠血清转氨酶水平明显高于正常对照组(P<0.005),EGCG 对照组与正常对照组比较无变化(P>0.05),而EGCG 治疗组小鼠血清转氨酶水平与TP 组相比下降明显(P<0.005)。TP 组小鼠肝脏病理切片示较多肝细胞坏死和中性粒细胞浸润,EGCG 对照组和正常对照组小鼠肝脏形态学基本正常,EGCG 治疗组示肝细胞炎症坏死程度较TP 组有大幅减轻。TP 组小鼠肝脏中MDA、IL-17 及IL-6 水平明显高于正常对照组(P<0.005),而SOD和GSH 水平明显低于正常对照组(SOD,P<0.05;GSH,P<0.005),EGCG 对照组与正常对照组比较无变化(P>0.05),EGCG 治疗组小鼠肝脏中MDA、IL-17 及IL-6 水平均下降明显(P<0.005),而SOD 和GSH 水平均增高,与TP 组比较有显著性差异(SOD,P<0.05;GSH,P<0.005)。TP 组肝脏TLR4 蛋白表达水平高于正常对照组,EGCG 对照组与正常对照组比较无变化(P>0.05),而EGCG 治疗组TLR4 水平显著降低。结论:EGCG 对TP 所致小鼠肝损伤有明显的保护作用,可能与其抗氧化作用及对炎症因子的调节有关。     

槲皮素拮抗雷公藤甲素诱导的小鼠肝损伤的机制研究

  目的  探究槲皮素(quercetin,QE)对雷公藤甲素(triptolide,TP)诱发肝损伤的拮抗机制。  方法  取40只C57BL/6小鼠,随机平均分为正常对照组、TP模型组、低剂量QE(20 mg/kg)组和高剂量QE(80 mg/kg)组。低剂量QE组和高剂量QE组进行预处理给药,按0.2 mL/10 g量连续灌胃10 d,2次/d,其余各组灌胃等量生理盐水。末次给药4 h后,除正常对照组外,各组单次灌胃500 μg/kg TP进行造模。造模22 h后取血,处死小鼠,肝切片HE染色观察肝组织病理学改变;检测小鼠血清中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性;测定肝匀浆液中还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平;采用ELISA方法检测肝匀浆液中白细胞介素(IL)-17、IL-10和IL-6分泌情况;Western blot测定Toll样受体4(TLR4)蛋白表达水平。  结果  与正常对照组比较,TP模型组肝小叶结构萎缩甚至消失,肝细胞坏死明显,炎性细胞浸润;小鼠血清中ALT、AST和MDA水平异常升高,SOD和GSH水平降低,IL-6和IL-17分泌水平升高,IL-10分泌水平下降,TLR4蛋白水平升高(P < 0.05)。与TP模型组相比,QE组肝组织损伤和炎症细胞浸润减轻,血清中ALT、AST、MDA、IL-6和IL-17水平均下降,TLR4表达水平下调(P < 0.05),且高剂量QE组改变更为明显(P < 0.05,与低剂量QE组比较)。  结论  槲皮素可通过减轻氧化损伤促进抗氧化,调控细胞因子的分泌,减轻TP诱导的肝损伤。     

无偿献血人群HBV-DNA混样反应性孔位拆分2次结果分析

目的 探讨在血站核酸检测系统中,对混样检测结果呈反应性的孔位进行2次拆分的必要性。方法 筛选酶联免疫吸附试验检测合格标本在COBAS s 201系统上进行核酸检测。对混样检测呈反应性的孔位进行常规拆分的同时,加做1次拆分,以达到双孔复试的目的。分析混样CT值与拆分结果的关系。结果 2015-2020年该系统上共725孔混样检测呈HBV-DNA反应性,2次拆分共有543例HBV-DNA反应性标本。其中340孔在2次拆分时均拆出同一HBV-DNA反应性标本;108孔仅在第1次拆分有1例HBV-DNA反应性标本;41孔仅在第2次拆分有1例HBV-DNA反应性标本;210孔2次拆分结果均为非反应性;26孔拆分出不止1例HBV-DNA反应性标本。结论 在COBAS s 201系统上对混样反应性孔位进行2次拆分,拆分反应性率达74.90%。混样CT值<35且首次拆分结果呈非反应性孔位,有必要进行再次拆分。