人肝再生增强因子基因序列的优化、重组表达及功能研究

目的:体外重组表达人肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration,ALR)并进行功能研究.方法:全基因合成ALR序列并插入原核表达载体pET28a ,转化入BL21菌内进行诱导表达,表达产物经过纯化后利用MTT法观察表达产物对人肝细胞的刺激增殖活性;利用小鼠急性四氯化碳损伤模型观察表达产物的肝功能保护作用.结果:酶切鉴定及测序结果提示表达产物正确;纯化后表达产物具有明确的促进肝细胞增殖作用,并在中、低剂量具有降低小鼠急性化学性损伤后转氨酶水平的作用.结论:重组表达的ALR结构正确,具有促进肝细胞再生的作用.     

异常凝血酶原和甲胎蛋白联合检测在原发性肝癌中的临床价值

目的探讨血清异常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)和甲胎蛋白(AFP)联合检测在原发性肝癌中的临床价值。方法选取该院收治的218例确诊的肝细胞癌患者(HCC组)、37例肝内胆管细胞患者(ICC组)、32例其他消化道系统恶性肿瘤患者(其他消化道肿瘤组)、28例肝硬化患者(LC组)、32例慢性肝炎患者(CH组)以及45例健康体检者(健康对照组)为研究对象,检测各组血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平及相关性;运用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析两指标单独及联合检测诊断原发性肝癌时的曲线下面积(AUC)、灵敏度和特异度;比较HCC患者治疗前后血清PIVKA-Ⅱ、AFP的水平。结果 HCC组血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平与其他组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。ROC曲线分析显示,单独检测时PIVKA-Ⅱ的灵敏度较高(81.63%)、AFP特异度较高(89.60%),联合检测两指标时AUC为0.923,灵敏度最高(90.30%)。治疗后血清PIVKA-Ⅱ、AFP水平低于治疗前水平,差异有统计学意义(P0.05)。结论联合检测患者血清PIVKA-Ⅱ和AFP在原发性肝癌早期诊断和疗效监测优于AFP单独检测,值得临床推广使用。     

唾液酸化胎球蛋白A lectin-ELISA方法的建立及其在原发性肝细胞癌中的诊断价值

目的:建立检测唾液酸化胎球蛋白A（Sia-fetuin A）的凝集素-酶联免疫吸附试验方法（lectin-ELISA）,探讨其在原发性肝细胞癌（HCC）中的诊断价值。方法:收集2017至2020年于上海东方肝胆外科医院就诊的HCC患者300例,疾病对照160例（包括肝硬化亚组36例、慢性乙型肝炎亚组124例）,另同期收...     

凝集素捕获微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体在原发性肝癌中的应用评价

目的探讨凝集素捕获微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体（AFP-L3）在原发性肝癌（PLC）中的临床应用。方法采用电化学发光法（ECL）和凝集素捕获微量离心柱法分别定量检测622例甲胎蛋白（AFP）阳性PLC、24例AFP阴性PLC、17例AFP阳性良性肝脏疾病患者AFP-L3,并比较凝集素捕获微量离心柱法和凝集素亲和免疫电泳自显影法检测AFP-L3的符合率。结果 622例AFP阳性PLC患者中,AFP-L3阳性患者的γ-谷氨酰基转移酶（GGT）、总胆红素（TBil）明显高于AFP-L3阴性患者（P〈0.05）。AFP-L3与患者的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、白蛋白（Alb）均无相关性。凝集素捕获微量离心柱法和凝集素亲和免疫电泳自显影法检测AFP-L3的阳性率分别是46%、50%,两者的符合率为92%。按AFP浓度分层分析AFP-L3阳性率后发现,随AFP浓度升高,AFP-L3阳性呈现上升趋势。AFP-L3在AFP阳性的PLC患者和AFP阳性的良性肝脏疾病患者中的检出率分别为16.67%、23.53%,显著低于AFP阳性的PLC患者（63.5%,P〈0.05）。结论凝集素捕获微量离心柱法与凝集素亲和免疫电泳自显影法具有较好的一致性;AFP-L3在AFP阳性的PLC患者中有较高的检出率,对临床具有辅助诊断和鉴别诊断价值。     

甲胎蛋白异质体在原发性肝癌临床诊断中的应用

目的 通过临床大样本数据回顾性分析血清甲胎蛋白（AFP）和甲胎蛋白异质体（AFP-L3）诊断原发性肝癌（PLC）的价值。方法 2015年1月～2015年12月东方肝胆外科医院诊治的PLC患者7097例,同期诊治的肝硬化（LC）患者122例。采用化学发光法检测血清AFP水平,采用凝集素捕获微量离心柱法检测AFP-L3,将AFP-L3/AFP比值大于10%定义为AFP-L3阳性。结果 7097例PLC患者血清AFP水平为61.7（5.4,1226.0）μg/L,显著高于122例LC患者的3.6（2.5,10.95） μg/L（P<0.05）,AFP-L3阳性率为8.2（-,26.1）%,而在肝硬化患者未检出AFP-L3阳性（P<0.05）;以血清AFP≥20 μg/L或/和AFP-L3≥10%任一阳性为截断点,诊断PLC的准确度为63.1%,优于AFP（60.3%）和AFP-L3（47.9%）单独诊断的结果;AFP-L3阳性率随着AFP水平的升高而升高;血清AFP阴性的PLC和AFP阳性的LC患者AFP-L3阳性率分别为39.6%和7.7%,显著低于血清AFP阳性PLC患者的73.7%（P<0.05）;在2103例具有病理学诊断的PLC患者,1976例肝细胞癌（HCC）患者血清AFP水平为50.8（4.8,1015.0） μg/L,6例混合型肝癌患者血清AFP水平为74.9（4.55,39248.3） μg/L,AFP-L3阳性率分别为5.3（-,24.6）%和8.4（-,18.8）%,均显著高于121例肝内胆管细胞癌患者【2.8（2.2,5.15） μg/L,P<0.05】和【-（-,-）%,P<0.05】。结论 大样本的结果显示PLC患者血清AFP和AFP-L3存在较高的阳性率,其诊断效能较好。     

华佗妙治喉疾

有一次,一位王爷3岁的公子病了,任何东西都吃喝不下。王爷请来多位御医给公子医治也未能治好。没办法,王爷请来了神医华佗。华佗见到公子后,发现他面色并没有什么异常,脉搏也正常,心中很是疑惑。华佗命侍者拿来食物送人公子口中。只见公子勉强张嘴,食物却咽不下也吐不出,脸部涨得通红,甚为痛苦。华佗反复观察了一阵,确定公子的喉内一定有异物。便叫来公子的侍者仔细询问,方知他们带公子在荷塘边游玩时,公子忽然吞进了一颗荷叶上的螺蛳,并卡在喉咙里了。     

结缔组织生长因子在慢性肝病诊断中的应用研究

探讨结缔组织生长因子(CTGF)在慢性肝病诊断中的应用价值。运用ELISA方法检测198例研究对象,观察血清CTGF水平的变化,分析CTGF水平与临床特征及实验室指标的相关性;运用实时荧光定量RT-PCR方法检测组织中CT-GF mRNA的表达量,比较各组间表达量的变化。乙肝后重度肝纤维化组、肝硬化组、原发性肝细胞癌(HCC)组的血清CTGF水平均显著高于正常对照组,且具有统计学意义(P<0.05);血清CTGF水平与部分临床实验室特征存在相关性,在区分早晚期肝纤维化上具有诊断提示作用;癌旁组织的CTGF mRNA相对表达量显著高于正常对照和癌组织的表达量且具有统计学差异(P<0.05)。血清CTGF水平与肝纤维化、肝硬化及肝癌的发生发展关系密切,有望成为一个新的无创性肝纤维化检测诊断指标,为临床诊断提供依据。     

基于临床常用检验项目的原发性肝细胞肝癌术前微血管侵犯诊断模型研究

目的建立基于临床常用检验项目的原发性肝细胞肝癌(HCC)微血管侵犯(MVI)诊断模型。方法以5 602例HCC患者作为训练组,以另外1 905例HCC患者作为验证组,收集所有患者的临床资料,包括性别、年龄、肿瘤个数、肿瘤大小、Edmondson分级、MVI发生情况及术前48项指标的检测结果。在训练组中,采用Logistic回归分析评估HCC患者术前发生MVI的危险因素,依此建立联合诊断模型,并在验证组中进行独立验证。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估联合诊断模型PA-SALAD诊断HCC患者术前发生MVI的效能。结果训练组与验证组之间年龄、白蛋白(Alb)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、唾液酸(SA)、凝血酶原时间(PT)、肿瘤个数、肿瘤大小、MVI比例差异均有统计学意义(P0.05),其他项目2个组之间差异均无统计学意义(P0.05)。Logistic回归分析结果显示,年龄、血小板(PLT)、Alb、SA、甲胎蛋白(AFP)、异常凝血酶原(DCP)、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)是MVI发生的危险因素[比值比(OR)分别为0.981、0.998、0.971、1.016、1.226、1.361、1.012]。根据Logistic回归分析结果建立的联合诊断模型为PASALAD=0.220-0.002×PLT-0.019×年龄+0.016×SA-0.029×Alb+0.012×AFP-L3+0.204×lgAFP+0.308×lgDCP。ROC曲线分析结果显示,在训练组中,PA-SALAD模型诊断有MVI的曲线下面积(AUC)为0.695,最佳临界值为-0.235 3,敏感性为69.3%,特异性为60.4%;在验证组中,PA-SALAD模型诊断有MVI的AUC为0.704,以训练组的最佳临界值-0.235 3作为临界值,敏感性为66.5%,特异性为62.0%。结论基于临床常用检验项目的联合诊断模型PA-SALAD诊断HCC患者是否发生MVI,特别是高危MVI有一定的价值。     

电化学发光免疫法检测甲胎蛋白出现钩状效应一例

电化学发光免疫法(ECLIA)是自上世纪90年代后开始发展的新一代标记免疫分析技术,结合了电化学发光与免疫测定的优势。由于检测全过程在一个全封闭的反应体系中全自动进行,反应时间较短,具备快速、精确、重现性好及试剂安全无毒等特点,一直受到临床应用者的好评。