老年人睾丸间质细胞结构及StAR和P450scc蛋白表达的变化

目的：观察老年人睾丸间质细胞结构以及类固醇激素合成快速调节蛋白（steroidogenic acute regulatory protein,StAR）和胆固醇侧链裂解酶（cholesterol-side-chain cleavage enzyme,P450scc）蛋白表达的变化,以探讨迟发性性腺功能减退症的机制。方法：青年人（20~30岁）及老年人（70~90岁）睾丸标本各10例,对患者进行AMS(Aging Male’s Symptoms)评分。应用HE染色观察睾丸组织形态学变化,电子显微镜观察睾丸间质细胞的超微结构改变,Western blot法比较青年组和老年组睾丸组织中StAR和P450scc蛋白表达水平的差异,并用ELISA法检测其血清总睾酮水平的差异。结果：老年组AMS评分显著高于青年组（61.25±7.08 vs. 20.75±3.73,P<0.001）,且血清总睾酮水平显著低于青年组（3.12±0.58 μg/L vs. 6.29±1.17 μg/L,P<0.05）。HE染色显示,老年人睾丸呈老年退行性改变,电子显微镜下观察到老年睾丸间质细胞线粒体肿胀,线粒体嵴消失。睾丸组织中StAR和P450scc蛋白表达水平显著低于青年组（P<0.05）。结论：老年人睾丸间质细胞结构、线粒体的损伤,以及StAR和P450scc蛋白表达水平的下降等病理变化均与老年人迟发性性腺功能减退症症状和血清总睾酮水平变化密切相关,其确切机制有待深入研究。     

HRM-非标记探针法检测CCL2-2518T>C突变方法的建立

目的建立一种高分辨率熔解曲线(HRM)-非标记探针的方法用于检测CCL2-2518T>C的单核苷酸多态性(SNP)。方法针对CCL2-2518 T>C,分别设计出针对野生型和突变型的两个非标记探针,采用HRM-非标记探针法对71名健康人群CCL2-2518位点的SNP进行检测,并采用TaqMan分型法进行验证。结果 HRM-非标记法的两个探针与TaqMan分型法分型结果一致,准确率100%;针对突变型(C)的探针明显好于针对野生型(T)的探针,其检测野生纯合型和突变纯合型的探针峰的温度之差分别为5.5℃和2.1℃。结论本研究建立的CCL2-2518 T>C位点突变检测的HRM-非标记探针方法是一种简单、廉价、灵敏、准确和快速的技术,适用于临床检测。     

老年大鼠睾丸间质细胞形态及睾酮合成功能变化的研究

目的 探讨衰老对睾丸间质细胞的形态及功能的影响.方法 青年(3月龄)及老年(24月龄)清洁级雄性SD大鼠各10只,麻醉后取血清检测总睾酮浓度,取睾丸组织用HE染色观察睾丸组织形态学变化,并用电镜观察睾丸间质细胞的超微结构改变.通过密度梯度离心分离原代睾丸间质细胞,并用LH刺激睾酮分泌后用Western blot比较青年组和老年组睾丸间质细胞类固醇合成快速调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,StAR)表达水平的差异,并用ELISA法检测其睾酮分泌的差异.结果 HE染色显示老年大鼠睾丸呈老年退行性改变,电镜下观察到老年大鼠睾丸间质细胞线粒体水肿,线粒体嵴消失.老年大鼠血清睾酮水平显著低于青年组(P＜ 0.05).原代培养的睾丸间质细胞无论LH刺激与否,老年组细胞上清中睾酮浓度及StAR蛋白表达水平均显著低于青年组(LH刺激时P＜0.01,无LH刺激时P＜0.05).结论 衰老造成的睾丸间质细胞线粒体水肿及LH诱导的StAR蛋白表达水平下降与其睾酮合成能力降低密切相关.     

种植自体脂肪干细胞的可吸收性细胞支架移植行兔阴茎增粗术的安全有效性研究

目的 观察自体脂肪干细胞(adipose derived stem cell,ADSC)种植可吸收性细胞支架对小阴茎增粗安全性和有效性.方法 45只雄性成年新西兰白兔随机分为假手术对照组(A组)、单纯Maxpol-T移植组(B组)和种植自体ADSC的Maxpol-T移植组(C组).静脉麻醉后取腹膜后脂肪组织,体外分离、鉴定和扩增ADSC并种植于可吸收性细胞支架Maxpol-T后,移植入兔阴茎皮下深筋膜和白膜之间.术后6个月评估阴茎增粗的效果及其安全性和有效性.结果 ADSC培养后流式鉴定结果CD34(+),CD90(+),CD105(+),CD133(+),CD13(-),CD45(-).移植术后6个月,三组均未发生支架排斥及炎症反应,A组无明显组织再生变化(P＞0.05),B组阴茎直径较A组无明显差异(P＞0.05),C组阴茎直径较A组和B组增粗效果显著(P＜0.001).局部组织病理学结果可发现增生组织及新生血管.结论 应用自体ADSC种植可吸收性细胞支架后植入成年新西兰白兔阴茎皮下,可安全有效地增生阴茎皮下局部组织,无明显排斥和炎症反应.