丙酸睾酮对大肠杆菌RecQ解旋酶结构和功能的影响

目的研究体外丙酸睾酮对大肠杆菌RecQ解旋酶结构和功能的影响及二者的相互作用机制。方法分别运用荧光偏振技术、ATPase试剂盒和紫外吸收光谱技术分析丙酸睾酮对大肠杆菌RecQ解旋酶活性和DNA结合活性、AT-Pase活性和构象的影响。结果丙酸睾酮能够影响E.coliRecQ解旋酶的活性。低浓度促进解旋酶活性,高浓度抑制;抑制RecQ解旋酶与dsDNA的结合活性,其抑制常数Ki小于7×10-5 nmol.L-1;对与ssDNA结合活性的Ki为7×10-3 nmol.L-1;对ATPase活性抑制作用的时间相关性较弱;影响RecQ解旋酶的构象变化,但峰位无偏离。结论提示丙酸睾酮与RecQ解旋酶具有弱相互作用,二者具有两个结合位点。     

Molecular mechanism of a Matijin-su derivative for inhibiting proliferation,invasion and migration of prostate cancer cells北大核心CSCD

目的探讨马蹄金素衍生物HXL130对前列腺癌PC3细胞的增殖、侵袭及迁移的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测HXL130对PC3细胞增殖的影响,Hoechst 33258染色和流式细胞术检测对癌细胞凋亡以及对其细胞周期的影响,运用Transwell法检测对癌细胞侵袭与迁移的影响;运用蛋白组学测序技术检测化合物处理癌细胞引起的差异表达蛋白(DEPs),分析DEPs的功能及其调控的相关信号通路,并运用Western blot进行验证。结果PC3细胞成活率随着HXL130浓度和时间的增加而降低,且可明显的诱导细胞凋亡和阻滞G 2期,并可明显的抑制PC3细胞的侵袭和迁移能力;蛋白质组学分析表明,HXL130处理癌细胞引起67个蛋白发生差异表达,包括51个上调蛋白和16个下调蛋白,其主要参与PI3K-AKT、MAPK、细胞凋亡及内质网蛋白处理相关信号通路;Western blot结果研究表明HXL130可明显促进细胞中上述信号通路中的关键蛋白PERK、p-elF2α、CHOP、Bax蛋白表达,抑制Bcl-2、MMP1和VEGF的蛋白表达。结论马蹄金素衍生物HXL130可抑制PC3细胞的增殖和转移,其分子机制主要涉及到PI3K-AKT、MAPK、细胞凋亡及内质网蛋白处理相关信号通路的调控。     

一类新型小檗碱衍生物的合成与生理活性

目的:以具有多种生理活性的小檗碱为原料合成新型衍生物,并研究其细胞增殖抑制作用,抑制乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶的活性。方法:运用药效团整合策略将具有多种生理活性的小檗碱与抑制组蛋白去乙酰化酶的药效团异羟肟酸、邻苯二胺、巯基进行拼合,通过有机合成手段得到了7个文献未见报道的小檗碱新型衍生物,通过核磁共振氢谱(~1H-NMR),碳谱(~(13)C-NMR)和质谱(MS)进行结构表征,并采用噻唑蓝(MTT)比色法检测了7种小檗碱衍生物对人结肠癌细胞(HCT116),人肝癌细胞(Hep G2),人宫颈癌细胞(He La),人急性淋巴白血病细胞(CCRF-CEM)的增殖活性,采用Ellman法对乙酰胆碱酯酶(ACh E)和丁酰胆碱酯酶(Bu Ch E)抑制活性进行了测试。结果:含甲基酮的小檗碱衍生物同时具有较好细胞增殖抑制作用,抑制乙酰胆碱酯酶的活性,化合物5b对CCRF-CEM细胞株的版抑制浓度(IC_(50))达到了1.48μmol·L~(-1),对乙酰胆碱酯酶的抑制活性IC_(50)为(0.38±0.004)μmol·L~(-1),明显高于先导化合物小檗碱。结论:目标化合物的合成路线为此类生物碱衍生物的合成与活性研究提供了参考,其中化合物5b细胞增殖抑制作用和乙酰胆碱酯酶抑制活性较强,后续值得进一步研究。     

尿激酶原逆向溶栓联合PCI术对急性ST段抬高心肌梗死患者的应用效果

目的观察尿激酶原逆向溶栓联合经皮冠状动脉介入(PCI)术对急性ST段抬高心肌梗死(ASTEMI)患者的应用效果。方法选取2016年12月至2018年5月平舆县人民医院收治的72例ASTEMI患者,依治疗方案分为两组,对照组(36例)接受血栓抽吸术联合PCI术治疗,观察组(36例)接受尿激酶原逆向溶栓联合PCI术治疗。对比两组术后TIMI血流分级、MACE发生率、左心室射血分数(LVEF)、ST段回落≥50%发生率。结果观察组术后TIMI 3级发生率(94.44%)高于对照组(77.78%)(P<0.05);观察组术后1.0～1.5 h ST段回落≥50%发生率(63.89%)高于对照组(38.89%)(P<0.05);观察组术后住院期间、术后12个月LVEF水平较对照组高(P<0.05);随访12个月后,观察组MACE发生率(8.82%)低于对照组(27.27%)(P<0.05)。结论尿激酶原逆向溶栓联合PCI术应用于ASTEMI患者,能减少无复流发生,调节左心室收缩功能,降低MACE发生率。     

胺碘酮治疗急性心肌梗死合并心房颤动的临床观察

目的:探讨胺碘酮对于急性心肌梗死合并心房颤动临床疗效,为患者治疗提供理论和实践价值。方法:选取2012年8月到2013年8月我院收治的48例因急性心肌梗死合并心房颤动患者,随机分成两组,每组各24例,其中对照组予以中药活血化瘀汤治疗,治疗组对患者予以胺碘酮进行治疗,对用药后患者病情缓解情况以及各不良反应发生情况进行观察统计分析。结论:经过临床观察与分析,使用胺碘酮治疗急性心肌梗死合并心房颤动显著效果率高,无效率极低,用药后不良反应发生率相对较低,值得临床广泛应用推广。     

溴化乙锭对布鲁姆综合症解旋酶生物学特性的影响

目的研究溴化乙锭(EB)对BLM解旋酶的生物学特性的影响。方法应用荧光偏振技术研究EB对BLM解旋酶的DNA结合活性与解链活性的影响;应用自由磷检测技术研究EB对BLM解旋酶的ATPase活性的影响;应用紫外吸收光谱法研究EB对BLM解旋酶的构象的影响。结果EB可完全抑制BLM解旋酶的DNA结合活性,当双链DNA与单链DNA作为底物时,Ci值分别为(21.3±0.7)μmol.L-1和(3.3±0.3)μmol.L-1;可完全抑制BLM解旋酶的解链活性,Ci值为(9.0±0.3)μmol.L-1;对BLM解旋酶的ATPase活性有抑制作用,但差异无显著性;可改变BLM解旋酶的构象,最大吸收峰发生红移。结论 EB可以结合BLM解旋酶并改变其构象,抑制其与DNA的结合,从而抑制BLM解旋酶的生物学活性。     

苯甲酸雌二醇对大肠杆菌RecQ解旋酶生物学活性的影响

 目的 研究体外苯甲酸雌二醇对大肠杆菌RecQ解旋酶生物学活性的影响及作用机制。方法 运用荧光偏振技术和ATPase检测技术分析苯甲酸雌二醇对大肠杆菌RecQ解旋酶活性、DNA结合活性和ATPase活性的影响。结果 苯甲酸雌二醇对RecQ解旋酶活性、DNA结合活性及ATPase活性均有弱抑制作用,对RecQ解旋酶活性抑制常数K_i为5×10-3 nmol·L-1,对dsDNA和ssDNA结合活性的K_i分别为5×10-2和0.5 nmol·L-1。结论 在体外苯甲酸雌二醇对大肠杆菌RecQ解旋酶生物学活性具有弱抑制作用,二者至少有两个作用位点。     

两步酶法在小鼠睾丸支持细胞分离与培养过程中的研究

目的:探讨两步酶法分离小鼠睾丸支持细胞以及在体外培养、纯化、鉴定过程中的优越性。方法:选取7~8d雄性昆明小鼠,用胶原酶Ⅳ及胰蛋白酶两步酶法分离小鼠睾丸组织获得支持细胞,利用细胞差速贴壁特性纯化支持细胞,利用倒置显微镜、PI染色、特异性抗体标记的方法从多个维度鉴定小鼠睾丸支持细胞。结果:培养72 h后支持细胞呈片状平铺于培养皿底层,相互接触,连接成片。用波形蛋白特异性鉴定证实本实验分离所获得的小鼠睾丸支持细胞。经过PI染色提示这些支持细胞为具有活性的支持细胞。结论:本研究提示两部酶法是一种简便且高效的分离小鼠睾丸支持细胞的有效方法,值得推广。     

中华真地鳖血淋巴对人红白血病HEL细胞增殖及凋亡的影响

目的 为研究中华真地鳖血淋巴(Eupolyphaga sinensis Walker hemolymph,ESWH)对人红白血病(human erythroleukemia,HEL)细胞增殖及凋亡的影响并探究其机制.方法 采用不同质量浓度(10～60mg· L-1)的ESWH体外作用于人红白血病细胞(HEL细胞)细胞,...