常温条件血液保存实验研究

常温条件血液保存实验研究①１００８５３北京解放军总医院刘景汉骆群欧阳锡林王青梅李锡金关键词血液保存中国图书资料分类号Ｒ４５７．１２目前，血液保存有两种温度，即４°Ｃ（２～６°Ｃ）和低温（－８０°Ｃ～－１９６°Ｃ），对这两种温度保存的血液，作者曾较全面...     

北京地区无偿献血者庚型肝炎感染情况初步调查研究

目的 分析不同献血人群中庚型肝炎病毒(HGV)的感染情况,及其对血液安全性的影响,为血液筛查策略调整提供科学依据.方法 收集694例无偿献血者血浆标本,逆转录聚合酶链法(RT-PCR)检测血浆中HGV RNA,χ2检验比较不同献血人群HGV感染情况.结果 694例献血者共检出HGV RNA阳性15例(2.16％),93例部队献血者均未检出HGV RNA,164例街头献血者中HGV RNA阳性3例(1.83％),437例血站血小板献血者中HGV RNA阳性12例(2.75％).结论 部队献血者、街头献血者和血站血小板献血者3组献血人群的HGV感染率无差异,儿童患者、造血干细胞移植后的受血者等高危受血者有必要进行HGV筛查.     

X射线辐照对淋巴细胞的灭活能力及对单采血小板质量的影响研究

目的 探讨25Gy X射线辐照单采血小板后对其淋巴细胞的灭活能力及对单采血小板质量的影响。方法 选取本中心2021年1～5月的健康无偿献血者20名,每人捐献单采血小板2袋,分为2组,分别用25Gy的X、γ射线辐照10 min;将上述辐照前后的单采血小板标本经淋巴细胞分离液分离出淋巴细胞,培养后分析比较X射线、γ射线辐照灭活单采血小板内淋巴细胞的能力;检测单采血小板辐照前及辐照后1、3 d的CD41b、CD62p、血常规、pH值。应用SPSS统计软件进行独立样本t检验分析比较组间差异。结果 25Gy X射线、γ射线辐照后对淋巴细胞的抑制率分别为(98.034±1.778)%与(97.882±1.915)%。25Gy X射线辐照单采血小板后,与γ射线辐照组相比,1、3 d的Plt、PDW、MPV、P-LCR、PCT、pH、CD41b和CD62p值比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 25Gy X射线辐照能有效灭活单采血小板内的淋巴细胞,其灭活效果与γ射线相当,对淋巴细胞的增殖抑制率均能达到95%以上,且对单采血小板的质量没有显著影响。     

流式细胞术联合测定保存血小板表达的磷脂酰丝氨酸和CD62p

人类血小板通过不同的技术进行离体保存后，其特性改变差异较大。建立适用于各种保存血小板特性分析的流式细胞术（FCM）对保存血小板的质量监测和新保存方法研究有重要意义。本研究通过对FCM分析方法主要条件的优化评估，建立了联合测定血小板膜表面包括磷脂酰丝氨酸在内的多参数FCM定量分析方法。在标本制作中，血小板不需要洗涤即可直接进行标记，减少了血小板离心洗涤过程中的激活。除了FCM常用的同型对照外，中还将新鲜富含血小板血浆（FPRP）、凝血酶激活FPRP和液氮处理FPRP作为血小板标准阴性、阳性对照，直接应用于FCM分析，且效果良好。该方法中Gly-Pro-Arg-Pro乙酸盐（GPRP）的选择应用，既防上了血小板聚集和纤维蛋白的形成，同时可稳定血小板，减少制备过程中人为激活，克服了在血小板、Ca^2 和血浆共存条件下FCM定量分析血小板的困难，尤其是为深低温处理血小板包括PS在内的多参数分析提供了良好的方法基础。研究表明该方法标本处理简单，结果分析简便、准确，重复性好。作还通过低温、低渗或激活剂的方法制备了几种膜表面分子标记显不同的血小板应用于FCM分析，不仅证实了所建立的FCM分析方法在各种不同膜表面分子标记的血小板分析中的实用性，又表明了中制备的4种不同膜表面分子标记的血小板在FCM分析保存血小板方法学中的实用价值。     

白膜富集法制备浓缩血小板方法的优化及质量评价

目的优化白膜富集法制备浓缩血小板的离心制备条件,并对其质量进行评价。方法第1次离心：选择4档转速、4个离心时间组合成16组离心条件,对满足血小板得率血小板初产品进行CD62p表达率及再表达率检测;第2次离心：3档转速、3个离心时间组成9组离心条件,对所得血小板终产品进行血小板得率、白细胞残留量、红细胞残留量检测。结果第1次离心共有4组离心条件所得血小板得率达到国家标准,其中2 400 r/min（1 861 g）、15 min离心条件所得血小板初产品CD62p表达率最低,CD62p再表达率最高,与其他3组比较差异有显著性（P〈0.01）;第2次离心：仅1 100 r/min（391g）、6 min所得血小板得率、白细胞残留率、红细胞残留率符合国家标准。结论第1次2 400 r/min、离心15 min;第2次1 100r/min、离心6 min制备的血小板在满足国家标准的同时,血小板损伤最低,功能储备最佳。     

36例ABO血型亚型检测及血清学分析

目的对本院2008～2011年36例ABO血型亚型患者及献血者进行血型血清学分析,以探讨ABO亚型的分布状况及亚型患者的临床输血安全。方法采用输血相容性检测实验室全自动血型/配血系统、试管法检测ABO正反定型,通过检出血清中不规则抗-A、抗-B,吸收放散试验等方法进行ABO血型亚型的鉴定。结果 36例ABO血型亚型中有12例A亚型,23例B亚型和2例cisAB亚型。结论准确鉴定ABO血型亚型对于降低亚型患者输血治疗风险有重要意义。     

流式细胞术测定红细胞存活率的方法建立

目的 :建立应用流式细胞术测定红细胞体内存活率的方法。方法 :献血者Rh表型ccDEE ,受血者为CCDEE ,以抗 c为一抗结合ccDEE的红细胞 ,两群细胞按设定的比例混合 ,以山羊抗人标记荧光素的IgGab段为二抗连接抗 c ,经流式细胞仪测定ccDEE表现型红细胞在两群细胞中所占的比例 ,并与实际的比例进行相关性比较。结果 :已知两群细胞数的比例与流式细胞仪测定的比例的相关系数r =99.87。结论 :流式细胞术技术可以体外测定红细胞体内的存活率     

492例绝经后阴道流血临床分析

绝经后阴道流血(PMB)是老年妇女最常见的症状之一,也是部分老年妇女生殖系统恶性肿瘤的征兆,为明确引起PMB的病因及诊断方法,我们对2002年1月至2007年12月因绝经后引起阴道流血在浙江省临安市妇幼保健所和浙江省妇幼保健所住院的492例患者进行临床分析.     

化学发光法检测输血前梅毒特异性抗体复查策略的研究

目的探讨化学发光法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)完全替代酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)进行患者输血前梅毒特异性抗体检测的可行性,并制定化学发光法检测弱反应性标本的复查策略。方法首先采用CLIA试剂筛选出梅毒特异性抗体结果 S:CO(absorbance signal of sample∶cutoff value,即样本吸光度值∶临界值)>0.30的血清样本,再采用2种ELISA试剂复查,最后以梅毒螺旋体血凝实验(treponema pallidum haemagglutination assay,TPHA),对3种试剂均在临界值以上(S/CO≥0.80)或至少1种试剂临界值以上的标本进行确认。评估检测效果,制定复查策略。结果应用CLIA试剂从5 000份标本中筛查出梅毒特异性抗体S/CO>0.30的血清样本141份,经2种ELISA试剂复查后,CLIA检测结果S/CO≥0.5、ELISA检测结果≥0.8的阳性率为92.5%;3种试剂或至少1种试剂检测结果S/CO≥0.8的72份标本,经TPHA确认阳性58份,其中2份标本CLIA检测结果0.8>S/CO>0.60。结论 CLIA与ELISA方法检测梅毒特异性抗体存在一定不符合性;建议对CLIA检测结果 S/CO>0.50标本采用ELISA联合检测,对S/CO>0.60的标本采用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(Treponema pallidum particle assay,TPPA)或TPHA法确证。