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目的观察人TCP11L2和鼠Tcp1112基因在细胞中的表达及定位和Tcp1112基因的表达谱研究。方法用RT-PCR法从正常人和鼠睾丸组织中分别扩增得到人TCP11L2基因和鼠Tcp1112基因的开放读码框全长cDNA并定向克隆到真核表达载体pEGFP-N1质粒中,构建了pEGFP-TCP11L2和pEGFP-Tcp1112融合基因表达载体,然后以脂质体介导转入MDCK细胞中,荧光显微镜下观察融合基因的表达情况;RT-PCR检测鼠Tcp1112基因在组织中的表达情况。结果在转染重组真核表达载体pEGFP-TCP11L2、pEGFP-Tcp1112的MDCK细胞中,荧光主要集中在细胞核外区域,而在转染空白载体pEGFP-N1的细胞中,荧光布满整个细胞;RT-PCR检测鼠Tcp1112为多组织表达。结论人TCP11L2和鼠Tcp1112蛋白能在MDCK细胞中高效表达,表达的蛋白定位在细胞核外区域,鼠Tcp1112的多组织表达提示该基因与鼠Tcp11基因功能的不同。 相似文献
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目的对FKBP6基因第3、4外显子进行突变和多态性筛查,研究第3外显子278C/A位点及第2内含子C/T位点(rs7797242)在无精症患者和正常男性中的多态性,初步探讨与原发无精症的相关性。方法采用变性高效液相色谱和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,对第3、4外显子进行突变和多态性筛查,对177例无精症患者和231名正常男性的278C/A和C/T(rs7797242)多态性进行基因分型。结果278C和278A等位基因频率符合Hardy-Weinberg平衡。无精症患者278A显著低于正常对照,差异有统计学意义(P<0.05)。C/T多态性在两组中均未检出,第3、4外显子未筛查到新的变异。结论278A等位基因可能与原发无精症相关。C/T(rs7797242)及370G/A,430G/C,467T/C,468G/A在中国人群中非常罕见。 相似文献
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作者研究了45例老年人和29例青年人外周血淋巴细胞在FUDR和咖啡因诱导下,外周血淋巴细胞染色体的畸变及脆性位点的表达。结果:①老年组染色体畸变率为2475%,青年组为422%,两者差异显著(P<001);②老年组脆性位点表达率为4593%,青年组为2302%,明显低于老年组(P<001);③染色体断裂点与脆性位点符合率老年组为7998%,青年组为92%,说明脆性位点与染色体畸变密切相关 相似文献
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基因治疗是从基因角度用正常有功能的基因置换或增补缺陷基因的方法,从治疗方面是将新的遗传物质转移至某个体的细胞内使其获得治疗效果。基因治疗作为治疗疾病的一种新手段,正愈来愈受到伤们的重视和关注。RNA干涉(RNA intefference,RNAi)是一种自然界普遍存在、古老且进化上高度保守的使基因沉默的机制,它是近年来疾病基因组学和功能基因组学研究的热点。RNAi作为基因治疗的一种工具,自发现以来一直倍受人们的关注,并发展成为关闭特定基因功能的关键技术。由于其具有高效性和高度特异性,已经开思广泛用于基因功能研究和疾病基因治疗。本文主要介绍它在感染性疾病和神经系统疾病方面的应用。 相似文献
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受精促进肽和腺苷酸一起调控腺苷酸环化酶/cAMP信号通路,起初促进获得和随后抑制顶体的丢失,从而提高人及哺乳动物精子受精能力。现就受精促进肽在这一调控过程中的作用进行综述,并对其可能的作用机理进行讨论。 相似文献
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目的观察人类无精症相关基因ZNF463在Cos-7细胞中的蛋白质表达及定位。方法用RT—PCR法从正常人睾丸组织中扩增得到人ZNF463基因的翻译区全长cDNA,并定向克隆到真核表达载体pEGFP—C1质粒中,构建了ZNF463-GFP融合基因表达载体。然后以脂质体介导转入Cos-7细胞中,荧光显微镜下观察。结果在转染重组真核表达载体pEGFP—ZNF463的Cos-7细胞中,荧光主要集中在细胞核内,而在转染空白载体pEGFP—C1的细胞中,荧光布满整个细胞。结论表明转染的Cos-7细胞能高效表达人ZNF463蛋白,ZNF463基因表达的蛋白定位于细胞核内,与其所属家族成员作为转录因子发挥作用的特征相符。 相似文献
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目的 分离、克隆人受精促进肽受体TCPll基因1个新的转录本TCPllc的全长cDNA,研究其表达的阶段性、组织特异性及TCPll基因3种转录本的剪接方式。方法 运用BLAST方法获得与TCPlla同源的ESTs,以逆转录的人睾丸cDNA为模板进行PCR扩增,将PCR扩增片段克隆入pGEM-T easy载体并测序;采用BLAST、ClustalW及RT-PCR方法分析各转录本的基因组结构及剪接方式;RT-PCR方法分析其组织表达的特异性和阶段性。结果 获得1个新的全长cDNA,它编码440个氨基酸的蛋白质,与TCPlla、b相比,在基因组的5′-端存在复杂的外显子剪接现象。RT-PCR结果显示该转录本在正常睾丸中表达,而其他组织、无精症患者及胎儿睾丸组织中未见该基因表达。结论 从人睾丸组织中分离到人受精促进肽受体TCPll基因1个新的转录本TCPllc, 结合mTcp-11的功能提示,TCPll基因a、b、c这3种转录本对精子发生和人受精过程可能起重要作用。 相似文献
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ZNF230基因突变筛查及其与无精症的相关性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨 ZNF230基因与无精症的关系.方法应用变性高效液相色谱(denaturing high performance liquid chromatography,DHPLC) 对99例无精症患者与115名健康对照者基因组DNA中 ZNF230基因全部6个外显子进行突变筛查. 结果检测到 ZNF230基因第6外显子A316G碱基转换;无精症组与健康对照组之间等位基因频率和基因型频率均差异存在统计学意义(分别为P<0.01和P<0.05);无精症组内GG和GA基因型亚组血清卵泡刺激素水平明显高于AA基因型亚组(P<0.05). 结论 ZNF230基因不但可能和无精症相关,而且可能与血清FSH水平有一定相关性. 相似文献
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目的研究小鼠Boule蛋白与精子成熟相关基因Crem之间的相互作用,揭示Boule蛋白在精子发生过程中所起的作用。方法构建pGEX-Boule表达载体,将表达载体转化宿主菌(BL21)感受态细胞,诱导纯化出Boule蛋白,应用RT-PCR和凝胶滞后实验(EMSA)分析与Boule蛋白结合的mRNA。结果表达载体pGEX-Boule构建成功,纯化出GST-Boule融合蛋白,RT-PCR和EMSA实验证明Boule蛋白能够结合Crem3′UTR。结论 Boule蛋白能够结合Crem3′UTR,可能通过调控Crem蛋白的表达作用于精子发生过程。 相似文献