大熊猫秦岭亚种IL-2基因的克隆表达及其生物活性研究

目的: 明确大熊猫四川种群和秦岭种群IL-2在基因水平是否存在差异; 得到具有具有生物活性的秦岭大熊猫IL-2原核表达产物.方法: 采用RT-PCR方法从ConA诱导培养的秦岭大熊猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到IL-2的cDNA片段, 利用DNA重组技术构建原核表达载体pET32a-IL-2, 转入BL21(DE3)中, 以IPTG BL21(DE3)表达IL-2融合蛋白.融合蛋白进行SDS-PAGE和Western blot进行鉴定及可溶性分析; 用纯化的融合蛋白免疫家兔, 制备多克隆抗体; 采用淋巴细胞增殖试验测定融合蛋白生物活性.结果: 通过重组表达获得IL-2抗原蛋白, 相对分子质量(Mr)为34 000; 免疫家兔得到特异性的抗IL-2抗体, 该抗体能够检测细胞内源性IL-2蛋白的表达; 融合蛋白具有促进淋巴细胞转化增殖的生物学活性, 并且它的这种作用可被本研究制备的多抗所抑制.结论: 成功克隆了秦岭大熊猫IL-2基因, 与四川大熊猫核苷酸同源性为99.4%表达了具有生物活性的融合蛋白.     

金丝猴肺炎双球菌败血症诊断

0　引言　肺炎双球菌感染是猴、大鼠、天竺鼠等实验动物和人的重要的呼吸道疾病.该菌属链球菌属,故也称肺炎链球菌(Streptococcuspneumonia).通常条件下可从健康动物的呼吸道、生殖道中分离出.肺炎双球菌是猴的第2位最常见的呼吸道病原菌[1],属条件致病菌类.当动物机体抵抗力下降时,易在种群中形成流行.在猴群中死亡率可达82%[2].金丝猴属国家一级保护珍稀动物,属现存稀有物种.本病在金丝猴中表现,受各种条件限制,不能对其流行病学特性进行深入研究,1999-03/1999-10陕西野生动物抢救中心救治后金丝猴群突发此病,先后有四只猴子死亡,经我中…