结直肠癌细胞通过IL-33/ST2轴招募肥大细胞的研究

目的 探讨结直肠癌细胞通过IL-33/ST2轴招募肥大细胞的作用机制。方法 收集结直肠癌组织及癌旁组织石蜡切片各15例,免疫组织荧光检测结肠癌及癌旁组织肥大细胞的浸润情况以及IL-33的表达量。利用细胞免疫荧光检测肥大细胞表面ST2受体的表达,Transwell细胞迁移实验观察IL-33、结直肠癌细胞条件培养液、IL-33+sST2（IL-33受体抑制剂）、结直肠癌细胞条件培养基+sST2条件下肥大细胞体外迁移能力的变化。将肥大细胞与结肠癌细胞共培养,RT-PCR检测肥大细胞细胞因子的表达。结果 相比于癌旁组织,结直肠癌组织的肥大细胞数量明显增多,IL-33的表达量也增加（P<0.001）。IL-33和结肠癌细胞条件培养基可以增强肥大细胞的迁移能力,而加入IL-33的抑制剂sST2后,迁移能力减弱（P<0.01）。共培养后的肥大细胞相比对照组,肥大细胞表达细胞因子IL-4、IL-6、IL-10和GM-CSF表达水平显著增加（P<0.05）。结论 结直肠癌细胞能够通过IL-33/ST2轴招募肥大细胞。     

ATG5 介导肝癌细胞对抗营养危机的作用研究

目的 探索在小鼠肿瘤细胞中对抗营养缺乏的分子途径。方法 构建ATG 5 基因表达的质粒并瞬 时转染至细胞内;用不同靶基因的si-RNAs 转染到细胞来沉默基因的表达;不同条件下提取小鼠正常肝细胞 AML-12 和肝癌细胞Hepa1-6 的RNA 和蛋白;用qRT-PCR 检测基因的表达;用Western blot 检测蛋白的表达; 用流式细胞仪检测细胞周期;用CCK-8 的试剂测定细胞活性。结果 与小鼠正常肝细胞AML-12 比较,肝癌 细胞Hepa1-6 对缺血引发的细胞死亡有抵抗性。缺血使Hepa1-6 细胞内诱导自噬相关蛋白ATG5 表达升高 （P <0.05）;沉默内源ATG 5 基因后Hepa1-6 细胞对缺血的敏感性升高,且ATG5 诱导细胞周期抑制蛋白p21（cip1/ waf1）表达增加使细胞滞留在G1 期。结论 在营养缺乏的环境中,Hepa1-6 细胞内ATG5 表达升高,且ATG5 增加p21（cip1/waf1）的表达量使细胞滞留在G1 期,可能与对抗缺血引起的死亡有关。