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目的建立大鼠心肌微血管内皮细胞(CMECs)缺氧模型。方法植块法培养CMECs,免疫细胞化学鉴定微血管内皮细胞特异性标志。将原代培养的CMECs在1%O2-94%N2-5%CO2低氧气体环境中培养24h制备低氧损伤模型(L组),以无血清常氧培养作为对照组(N组)。倒置相差显微镜观察缺氧前后细胞形态变化,MTT法测定细胞活力,AnnexinV—FITC和PI双标记法测定细胞凋亡率。结果植块法培养的大鼠CMECs具备典型微血管内皮细胞特征;Ⅷ因子、cD31相关抗原免疫染色鉴定均阳性。缺氧前后细胞形态无明显变化;与N组比较,L组细胞活力明显增加(P〈0.05);细胞凋亡率明显降低(P〈0.05),其中早期凋亡降低最明显(P〈0.01)。结论本方法可以成功建立简便、易行的CMECs细胞缺氧模型。  相似文献   
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目的 建立大鼠缺血心肌微血管内皮细胞(Cardiac Microvascular Endothelial Cells,CMECs)培养模型,为进一步研究其生物学特征提供实验基础.方法选取220~280 g成年雄性SD大鼠,结扎法建立心肌缺血模型,植块法培养结扎后24 h、3 d、7 d的心肌缺血模型大鼠CMECs,倒置相差显微镜观察培养细胞的形态学特征,观察不同时间点缺血模型CMECs生长状况,免疫细胞化学方法显示CMECs特异性抗原.结果 镜下观察部分CMECs刚游离出组织块时呈星形或多边形,当细胞生长至亚融合状态呈短梭形并呈铺路石样,部分区域可见管腔样或血管网络状结构,具备典型微血管内皮细胞特征;心肌缺血7 d时,缺血心肌组织CMECs密度最大;免疫细胞化学染色鉴定,Ⅷ因子、CD31相关抗原均为阳性,阳性率分别为(95.1±1.2)%、(95.0±1.6)%.结论 本方法可获得纯度高、结构和功能良好的缺血CMECs,为缺血性心血管疾病研究奠定基础.  相似文献   
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目的:观察益气活血中药对大鼠缺血心肌微血管内皮细胞( CMECs)增殖、迁移、成管功能的干预作用,及其对细胞增殖相关蛋白激酶(ERK)和细胞死亡相关分子(p53)mRNA 表达的影响。方法制备芪参益气滴丸高剂量(QG 组)、中剂量(QZ 组)、低剂量(QD 组)大鼠含药血清,分别与大鼠缺血 CMECs 共孵育,同时制备空白血清,分别与心肌缺血模型大鼠( MX 组)、正常大鼠( ZC组)来源的原代 CMECs 共孵育;噻唑蓝比色法检测细胞增殖情况,细胞划痕法检测细胞迁移能力,倒置相差显微镜观察管腔结构的形成情况;实时定量聚合酶链反应( Real - time PCR)检测 ERK 和 p53 mRNA 的表达情况。结果增殖窗口期 QZ 组、QD 组均为第2天,而 QG 组、ZC 组均为第3天,MX 组为第6天;QG 组、QZ 组、QD 组增殖率、迁移率及成管率均显著高于 MX 组,而 QD 组增高最明显(P ﹤0.01);与 MX 组比较,QG 组、QZ 组、QD 组 ERK mRNA 表达增加,p53 mRNA 表达降低(P ﹤0.05)。结论益气活血中药可促进大鼠缺血 CMECs 的血管新生功能,但其作用与药物剂量并非成正相关,可能与不同药物浓度干预导致 ERK 及 p53的差异表达有关。  相似文献   
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目的:调查冠心病心律失常住院患者方药应用情况,并观察患者动态心电图变化情况。方法:通过病案信息管理系统调取冠心病心律失常住院患者病案,记录心律失常类型、中医证型、中药注射剂和中药汤剂的种类、应用时间以及动态心电图的变化情况,分析中药应用强度不同的患者动态心电图疗效差异。结果:纳入冠心病心律失常住院患者386例,其中房颤166例、室上性心动过速50例、室性早搏163例、多发房性早搏68例(两种或三种心律失常同时发生者34例)。"阴虚火旺、心神不宁"证患者316例,占81.97%。滋阴降火安神方选生脉散(27.59%)、心疾宁方(17.53%)、炙甘草汤(7.76%),心阴虚者加当归、生地黄、党参、白芍;心火旺者加生地黄、黄连、知母、赤芍,心神不宁者加酸枣仁、柏子仁、牡蛎、龙骨。高、中、低强度组(应用中药注射剂和中药汤剂时间依次为≥14天、≥7天且14天、7天)患者动态心电图改善总有效率分别为86.96%、78.31%、56.45%,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:中医药治疗冠心病心律失常以滋阴降火安神方药为主,方选生脉散、心疾宁方、炙甘草汤等,且动态心电图疗效随治疗时间延长而增强。  相似文献   
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高血压病是常见的心血管系统疾病,大多数学者认为原发性高血压具有心理因素、性格缺陷和情绪障碍三大基本身心疾病临床特征,情绪的不稳定性影响患者的治疗效果.有效的心理护理干预对高血压病患者在改善焦虑症状、降低血压、减少住院时间等方面都有一定的影响,可收到良好的效果.  相似文献   
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[目的]观察大鼠缺血心肌微血管内皮细胞(CMECs)血管新生的生物学特征。[方法]采用结扎法建立大鼠心肌缺血模型,植块法培养CMECs,倒置相差显微镜观察细胞形态学特征,免疫细胞化学法检测CMECs特异性抗原。实验分组将大鼠缺血CMECs作为缺血组(I组),正常大鼠CMECs作为对照组(N组),采用噻唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线并检测细胞增殖能力,划痕法测定细胞迁移能力,倒置相差显微镜观察管腔结构形成情况。采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测细胞增殖相关蛋白激酶(ERK)和细胞死亡相关分子(p53)mRNA的表达情况。[结果]大鼠CMECs具备典型微血管内皮细胞特征,Ⅷ因子、CD31相关抗原免疫染色鉴定均为阳性。N组和I组迁移窗口期均为第1天,成管窗口期均为第2天,N组和I组的增殖窗口期分别为第3天、第6天。两组比较,I组迁移率、增殖率和成管率均低于N组,以迁移率降低最为明显(P0.01)。I组ERK、p53 mRNA表达均高于N组(P0.05)。[结论]缺血CMECs的血管新生能力明显降低,血管新生增殖窗口期改变,可能与ERK和p53mRNA表达的变化有关,为进一步研究其基因组学及药物干预提供实验依据。  相似文献   
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