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1.
近十年来,已相继研制成功多株胃癌单克隆抗体,但有关胃癌单克隆抗体在临床上的应用价值仍在探索中。因此,选择不同类型的胃癌细胞作为免疫原,制备针对不同的胃癌相关抗原的单克隆抗体,对于胃癌的诊断和治疗具有重要的意义。 相似文献
2.
人源化抗人肺癌单域抗体基因的构建、表达及活性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的: 构建人源化的抗人肺癌单域抗体hu3D3VH基因, 在大肠杆菌中表达, 对其蛋白活性进行分析.方法: 采用CDR移植技术对mAb3D3的重链可变区进行人源化, 通过重叠PCR获得hu3D3VH的基因.构建pET22(b+)/hu3D3VH表达载体, 并转化大肠杆菌BL21(DE3), 在IPTG诱导下表达.表达产物通过Ni亲和层析柱纯化.采用间接ELISA和竞争抑制ELISA法进行活性分析.结果: 通过重叠PCR获得序列正确的目的基因.目的蛋白以包涵体的形式表达, 表达量占菌体总蛋白的30%以上.纯化后, 目的蛋白的纯度达95%以上.hu3D3VH具有与亲本抗体相同的抗原反应性, 并能抑制mAb3D3与L342细胞的结合.结论: 获得的人源化单域抗体hu3D3VH, 保留了与mAb3D3相同的反应性和特异性, 为进一步临床应用奠定了基础. 相似文献
3.
用碱洗脱技术观察了国产洋红霉素(DMN)引起小鼠淋巴白血病P388细胞单链DNA的断裂作用。在CMN0.25-2.0μg/ml范围内,这种作用是剂量依赖性的。电镜观察研究CMN对P388细胞核仁超微结构的影响。CMN1.0μg/ml作用2小时,核仁空泡增多、微球体出现;作用4小时,核仁仁空增多、微球体出现;作用4小时,核仁“帽”形成;作用8小时,部分细胞核仁成分碎裂。 相似文献
4.
5.
~3H前体掺入实验表明国产洋红霉素对L121l细胞DNA合成具有显著的抑制作用,药物作用一小时,IC_(50)为2.47μg/ml。小牛胸腺DNA溶液碱变性、热变性和粘度实验表明洋红霉素可以和DNA结合;紫外光谱位移实验和荧光淬实验进一步证明这种结合。提示国产洋红霉素的抗肿瘤机理可能与药物和DNA结合后,引起DNA分子模板功能障碍有关。 相似文献
6.
目的探讨注射供者的肝匀浆提取液对大鼠淋巴细胞功能及大鼠异位移植心的影响。方法以Wistar大鼠为供者,SD大鼠为受者。制作Wistar大鼠的肝匀浆提取液;建立大鼠同种异体异位心脏移植模型。(1)经受者阴茎静脉注射肝匀浆提取液0.3 ml,14d后取供、受者的血液,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法分别测定受者对同一供者和无关供者的单向混合淋巴细胞反应(MLR)。(2)心脏移植术前2h经受者阴茎静脉注射肝匀浆提取液0.3 ml。心脏移植术后分别观察受者注射同一供者和无关供者的肝匀浆提取液后移植心脏的存活时间;心脏停跳后取移植心做病理检查及免疫组织化学检测。结果受者对同一供者和无关供者的单向MLR比较,前者明显减轻,吸光度A值分别为:0.434±0.034和0.522±0.015,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。心脏移植术前,受者接受同一供者和无关供者的肝匀浆提取液后,前者移植心脏存活时间延长,分别为(38.05±17.07)d和(9.86±2.67)d,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);且前者心肌出血、坏死程度更轻,心肌组织内IgM和IgG沉积更少。结论注射同一供者的肝匀浆提取液能特异性抑制相应个体抗原引起的淋巴细胞增殖反应,减轻大鼠移植心脏的排斥反应,明显延长其存活时间。 相似文献
7.
目的制备131I标记的抗神经纤毛蛋白-1(NRP-1)单克隆抗体A6(131I-A6),探讨其作为NRP-1靶向显像新型分子探针的可行性。方法(1)采用Iodogen法对A6进行131I标记,检测其标记率、放化纯和体外稳定性。(2)以人胶质瘤细胞株U87MG为实验细胞进行体外实验,测定131I—A6生物学活性、结合率及其与受体的亲和力。(3)将荷U87MG胶质瘤模型裸鼠采用随机抽样法分为5组,每组5只,分别于注射1.2MBq 131I-A6后24、48、72、96和120h处死,计算各脏器放射性摄取(%ID/g)、肿瘤/血液(T/B)和肿瘤/肌肉(T/M)比值。(4)取6只荷瘤裸鼠,以随机抽样法分为未阻断组和竞争阻断组,前组注射3.7MBq 131I-A6;后组注射3.7MBq 131I-A6和未标记的700仙gA6,均分别于注射后24、48、72、96和120h行SPECT/CT显像。采用两样本t检验对实验数据进行统计学分析。结果(1)131I—A6标记率为(95.46±3.34)%,放化纯〉95%;131I—A6在室温下PBS溶液中放置至96h,其放化纯仍〉85%。(2) 131I-A6与U87MG胶质瘤细胞特异性结合率1h达到最高值,为(15.80±1.30)%,在加入未标记的抗体A6时,U87MG细胞对131I-A6明显受抑制(t=2.862,P〈0.05);与细胞表面抗原的亲和力(kd)为(1.67±0.14)nmol/L。(3)24h时131I—A6在荷瘤裸鼠血液放射性最高,为(8.00±1.42)%ID/g;其次是肝脏和肿瘤组织,分别为(7.68±1.56)和(6.00±1.24)%ID/g;脑、骨、肌肉组织放射性计数较低。给药后24h,T/B和T/M分别为0.78±0.10和3.20±0.30,随时间延长比值逐渐增高,在120h达到最高,分别为1.87±0.50和7.13±0.24。(4)体内显像示,注射 131I-A6后24h肿瘤略显影,随时间延长变清晰,120h显影为最清晰,阻断后未见肿瘤显影。结论 131I-A6的标记方法简单易行,标记率高,产物稳定性好,? 相似文献
9.
颜江华 《福建医科大学学报》1991,(3)
蒽环类抗肿瘤抗生素柔红霉素(DNR)和阿霉素(ADM)已广泛应用于临床白血病和某些实体瘤的化疗,但由于剂量依赖性心脏毒性,限制了它们的临床应用。1973年苏联的 Gause 发现了一个新的蒽环类药——洋红霉素(Carminomycin,CMN),其抗瘤谱与 相似文献
10.
目的建立双特异抗体anti-CD3xanti-AFP介导CIK细胞对AFP阳性肝癌细胞的特异杀伤。方法利用anti-CD3抗体联合细胞因子IL-2活化人外周血淋巴细胞扩增CIK细胞,流式细胞仪分析细胞表型。柠檬酸三钠还原法制备金溶胶,物理吸附制备载荷anti-CD3和anti-AFP两种单抗的胶体金制剂,光镜检测抗体活性。AlarmaBlue法检测双特异抗体介导CIK细胞对肝癌细胞HepG-2和宫颈癌细胞Hela的杀伤活性。结果 14 d活化后的人外周血淋巴细胞鉴定为CIK细胞。抗体活性检测证实纳米金制剂保持了anti-CD3xanti-AFP的双特异抗体活性,在其介导下,CIK对特异靶细胞HepG-2杀伤效率为42%,提高11.4%(P<0.05),而对非特异靶细胞Hela杀伤无明显变化。结论金标双特异抗体anti-CD3xanti-AFP可以加强CIK细胞对AFP阳性肝癌细胞的杀伤作用。 相似文献