酶联免疫吸附测定检测儿童粪便幽门螺杆菌抗原

目的:探讨酶联免疫法检测粪便标本幽门螺杆菌抗原(HpSA)诊断儿童Hp感染的应用价值.方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)检测2005年1月至2006年1月门诊、住院的86例患儿怀疑Hp感染的粪便标本,同时与临床试验(快速尿素酶试验、13C-呼气试验)进行比较评价.结果:以快速尿素酶试验、13C-尿素呼气试验联合检测阳性为Hp感染的临床诊断标准,HpSA试验诊断准确率90.7%.粪便抗原试验的敏感度为87.9%,特异度为95.2%,阳性预测值为96.7%,阴性预测值为83.3%.经配对资料x2检验,HpSA检测与联合检测结果差异无统计学意义(x2=0.8,P＞0.05,x0.052=3.84).HpSA试验与13C-尿素呼气试验检测结果差异无统计学意义(x2=0.36,P＞0.05),HpSA试验与快速尿素酶试验检测结果差异有统计学意义(x2=4.92,P＜0.05).结论:粪便标本HpSA试验诊断儿童幽门螺杆菌感染有较高的准确率、敏感度和特异度,为新的简便易行的非侵入性方法.     

血清可溶性转铁蛋白受体作为机体铁负荷指标的研究

目的：探讨血清可溶性转铁蛋白受体（sTfR）作为重型β地中海贫血（β地贫）患儿机体铁负荷指标的可行性。方法：对20例重型β地贫未接受过输血、20例重型β地贫接受规则输血及40例正常健康儿童的血红蛋白量（Hb）、铁蛋白（SF）以及sTfR进行检测,应用单变量回归分析分析20例重型β地贫未接受过输血患儿的sTfR与SF2者之间有无相关关系。结果：①重型β地贫未接受输血患儿的Hb值明显低于那些接受规则输血及正常对照儿童,而SF与sTfR水平则明显高于那些接受规则输血及正常对照儿童。②单变量回归分析显示sTfR与SF2者之间存在直线正相关,sTfR水平随着SF水平的增高而增高。结论：sTfR可作为一项监测重型β地贫患儿机体铁负荷的指标。     

巨细胞病毒感染与儿童免疫性血小板减少性紫癜的关系探讨

目的探讨人巨细胞病毒（HCMV）感染与儿童免疫性血小板减少性紫癜（ITP）的关系。方法采集154例ITP患儿（ITP组）和50例健康儿童（对照组）的血清样本,用Real-time PCR检测HCMV DNA,ELISA方法检测HCMV IgM、IgG抗体;其中105例ITP患儿和50例健康对照儿童采集了尿液标本,用Real-time PCR检测HCMV DNA,并比较ITP组HCMV DNA阳性患儿与阴性患儿的血小板数量的差异。结果 ITP患儿血清HCMV DNA、HCMV IgM及IgG抗体和尿HCMV DNA阳性率均明显高于健康对照儿童,两组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）;ITP组HCMV DNA阳性患儿的血小板数量（29.72±14.54）×109/L与阴性患儿（41.28±18.35）×109/L比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论儿童感染HCMV可能是发生ITP的重要致病因素之一,这对指导临床有效治疗及预防ITP的发生有着积极的意义。     

miR-125b在儿童AML中的表达及其反义寡核苷酸对白血病细胞的作用

目的: 研究儿童急性髓细胞白血病(AML)患者骨髓细胞中miR-125b的表达及miR-125b为靶标的反义寡核苷酸对人白血病细胞的作用。方法: 采用基因芯片和实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测儿童AML治疗前后骨髓细胞中miR-125b的表达。采用电转法将与miR-125b序列互补的反义寡核苷酸转染HL-60细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测转染后24 h、48 h、72 h、96 h细胞增殖情况。结果: 芯片结果显示miR-125b在儿童AML中表达明显增高,约为正常的12倍,qRT-PCR结果进一步证实了miR-125b在儿童AML中异常高表达,同时还发现miR-125b在儿童AML部分缓解的患者骨髓细胞中表达下降,在完全缓解患者骨髓细胞中降至正常水平。CCK-8结果显示,针对miR-125b的反义寡核苷酸能有效抑制白血病细胞的增殖,与对照组相比有显著差异(P<0.01)。结论: miR-125b在儿童AML中可能起"癌基因"作用,以miR-125b为靶标的反义寡核苷酸可能为儿童AML治疗提供新的方法。     

5例儿童急性巨核细胞白血病的实验室检测

目的分析急性巨核细胞白血病(AMKL)患儿的诊断过程,探讨儿童AMKL的实验室诊断方法。方法骨髓细胞形态学依据急性白血病FAB标准诊断分型;应用流式细胞术单克隆抗体直接标记检测白血病细胞表面相关抗原表达;透射电子显微镜(电镜)检测分析AMKL患儿巨核细胞血小板过氧化物酶(PPO)阳性反应;24 h培养法G显带技术显带并分析染色体核型;荧光RT-PCR(FQ-RT-PCR)方法筛选白血病42种融合基因。结果所有5例AMKL患儿的骨髓原始巨核细胞异常增生比例≥30%;糖原(PAS)、NAE反应阳性;免疫分型均表达CD41a、CD42b和CD61;1例患儿骨髓巨核细胞以Ⅰ期原始巨核细胞为主,PPO染色呈阳性反应;1例患儿+21染色体核型异常,1例患儿MLL-AF9融合基因阳性。结论需依靠骨髓细胞形态学、细胞化学染色、流式细胞术白血病免疫分型检测、电镜检查、染色体核型分析和分子生物学综合分析确定儿童AMKL的诊断,以利于该病的治疗与预后。     

血清可溶性转铁蛋白受体测定在地中海贫血复合铁缺乏诊断与治疗中的意义

目的探讨血清可溶性转铁蛋白受体水平(soluble transferrin receptor,s Tf R.)在地中海贫血(地贫)合并缺铁诊断中的实际应用价值。方法对19例静止型α地贫,51例标准型α地贫,81例β地贫杂合子,59例缺铁性贫血,30例地贫合并缺铁及50例正常健康儿童的血红蛋白(Hb)含量,血清铁蛋白(serum ferritin,SF.)水平以及s Tf R水平进行检测,并对结果进行统计学分析。结果地贫患儿的s Tf R水平与正常对照相比无显著性差异或仅略高于正常对照,单纯缺铁性贫血患儿的s Tf R水平高于正常对照,地贫合并缺铁患儿的s Tf R水平明显高于单纯地贫患儿。结论 s Tf R可作为一项反映地贫合并缺铁患儿机体铁状况的指标,用于对此类患儿的诊断及铁剂治疗后的疗效监测。     

正常儿童ACE基因多态性与血清ACE活性的关系

目的探讨正常儿童血管紧张素转换酶(ACE)基因插入/缺失多态性与血清ACE活性的关系,并观察血清ACE的活性在不同性别和不同年龄阶段的是否有差异。方法应用PCR方法检测100例正常儿童ACE基因插入/缺失多态性并同时用酶偶联法测定血清ACE活性。结果正常儿童ACE基因型中DD型血清ACE活性最高(68.21±22.54)U/L,显著高于ID型(48.91±19.72)U/L和II型(37.15±16.49)U/L(P均<0.05),ID型虽高于DD型,但两者比较无统计学意义(P>0.05);不同性别和不同年龄阶段间ACE活性均无统计学意义(P均>0.05)。结论正常儿童ACE基因多态性与其血清ACE活性密切相关,性别和年龄不影响其血清ACE活性。     

川崎病血脂代谢与冠状动脉损害多项分类Logistic模型分析

目的:探讨血脂代谢紊乱与川崎病冠状动脉损害的关系。方法:应用多项分类Logistic模型分析等统计学方法分析川崎病组和对照组儿童的血脂结果,探讨川崎病患儿血脂结果与冠状动脉损害程度的关系。结果:川崎病组血清脂类与正常对照组相比病程中TG、ApoB100、ApoE、LDL-C比对照组高(P<0.01),TC、HDL-C、ApoA1比对照组低(P<0.01),Lpa与正常儿童相比差异无统计学意义(P=0.07)。经多项分类Logistic模型分析,致冠状动脉损害的危险因素为:TG、ApoE、LDL-C,以LDL-C的OR值最大,其次为TG,但两者的CI值也大,最为可信的是ApoE(95%CI1.004～1.222)。结论:川崎病患儿病程中存在血脂代谢紊乱,ApoE水平增加为川崎病患儿发生冠状动脉损害的危险因素。     

探讨儿童再生障碍性贫血患儿初诊时检测血清促血小板生成素的临床意义

目的探讨儿童再生障碍性贫血(AA)初诊时检测血清促血小板生成素(TPO)的临床意义。方法采集45例AA患儿(AA组)和32例健康儿童(对照组)的血清样本,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测其TPO水平,比较重型AA(SAA)与非重型AA(NSAA)患儿在初诊时的TPO水平,并分析AA患儿初诊时TPO水平与血小板、巨核细胞数目的关系。结果 AA患儿血清TPO水平明显高于健康对照儿童,两组比较差异有显著性(P0.05);SAA患儿血清TPO水平明显高于NSAA患儿,两组比较差异有显著性(P0.05);初诊时TPO水平与血小板数(P0.05,r=-0.63)、巨核细胞数(P0.05,r=-0.69)呈负相关。结论 AA患儿初诊时血清TPO水平明显增高,SAA患儿血清TPO水平明显高于NSAA患儿,TPO与血小板、巨核细胞减少程度有明确相关性,检测TPO水平有助于临床早期诊断儿童AA。     

免疫比浊法测定尿微量白蛋白的探讨

目的 对免疫比浊法测定尿微量白蛋白(UmALB)进行方法学评价。方法 采用免疫比浊法在HITACH17170A全自动生化分析仪上测定UmALB。结果 UmALB的检出限为0～200mg／L，批内变异系数为0．55％，平均批间变异系数为1．80％，平均回收率为102％。0．62g／L以上的血红蛋白和1．73μmol／L以上的胆红素对测定有较大负干扰，干扰率分别为-2．60％和-3．0％。结论 该法测定尿微量白蛋白精密度好，准确性高，适于常规实验室使用。