逆转录病毒介导的IL－2和TNF－α融合基因在卵巢癌细胞中的表达及其对肿瘤细胞生长的影响

ＩＬ－４和ＴＮＦ－α是引人注目的抗肿瘤活性因子，两者在抗肿瘤及免疫调节方面具有协同作用。我们利用逆转录病毒载体Ｘｄ１构建了插入ＩＬ－２和ＴＮＦ－α融合基因的重组逆转录病毒载体ＸｄＦ，融合基因包括编码ＩＬ－２前导肽和ＩＬ－２和ＴＮＦ－α成熟肽的序列。重组载体用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法引入病毒包装细胞ＰＡ３１７，挑选Ｇ４１８抗性克隆，用ＮＩＨ３Ｔ３细胞测定病毒滴度，获得一滴度为１×１０￣４ＣＦＵ／ｍｌ的高滴度克隆。超速离心浓缩这一重组病毒上清，转导人卵巢癌细胞系ＳＫＯＶ３，经Ｇ４１８筛选获得抗性克隆。ＰＣＲ可从融合基因转导的细胞ＤＮＡ中扩增出１．１ｋｂ的融合基因片断，证明目的基因完整的整合在细胞的基因组ＤＮＡ中，测其上清中的ＩＬ－２和ＴＮＦ－α活性结果显示：ＩＬ－２的活性为８－１５Ｕ／１０￣６ｃｅｌｌｓ／２４ｈ，ＴＮＦ－α的活性为１５０－４００Ｕ／１０￣６ｃｅｌｌｓ／２４ｈ。这一结果表明逆转录病毒介导的融合基因可以在卵巢癌细胞中获得有效表达，表达的融合基因产物在体内和体外部对肿瘤细胞的生长具有抑制作用。     

直接从外周血或骨髓进行定量RT－PCR

直接从外周血或骨髓进行定量ＲＴ－ＰＣＲ北京医科大学人民医院中心实验室颜世庆，白桃，王申五ＰＣＲ方法是基因表达定量和定性检测的简便方法，外周血和骨髓是临床检测和遗传研究中常用标本。通常是利用白细胞分离液从全血中制备白细胞，然后提取白细胞总ＲＮＡ，检测基...     

腺病毒介导的LacZ基因在乳腺癌细胞中的表达

观察腺病毒介导的基因转移在乳腺癌细胞的转导效率及腺病毒转导对细胞生长的影响。方法：腺病毒介导的基因转导。结果：在病毒的重复感染率为５００时细胞的转导效率达到１００％；不同数量的病毒转导乳腺癌细胞对癌细胞的生长没有明显影响。低温冻存可使病毒的感染性明显下降。结论：腺病毒介导的基因转移在乳腺癌细胞中有高的转导效率，而病毒载体本身对细胞的生长没有影响，可用作乳癌特异物前体酶激活基因治疗的基因转移方法。     

人白细胞介素2和肿瘤坏死因子融合基因在卵巢癌细胞中的转基因表达

人白细胞介素２和肿瘤坏死因子融合基因在卵巢癌细胞中的转基因表达颜世庆，张连峰，彭仁玲现已证明，对实验动物和病人，全身给予具有抗肿瘤活性的细胞因子，可以诱导原发及转移性肿瘤的消退。越来越多的证据表明，在肿瘤内或肿瘤局部，应用某些细胞因子，可表现为更为增...     

RT－PCR和免疫组化方法在白血病多药耐药基因分析中的应用

ＲＴ－ＰＣＲ和免疫组化方法在白血病多药耐药基因分析中的应用北京医科大学人民医院中心实验室颜世庆，白桃，王申五北京协和医院血液科陈嘉林，李蓉生在肿瘤与白血病的治疗中对化学药物的抗药性是治疗失败的主要原因，多药耐药基因（Ｍｕｌｔｉ－ＤｒｕｇＲｅ－ｓｉｓｔ...     

腺病毒介导的LacZ基因在乳腺癌细胞中的表达

目的：观察腺病毒介导的基因转移在乳腺癌细胞的转导效率及腺病毒转导对细胞生长的影响。方法：腺病毒介导的基因转导。结果：在病毒的重复感染率（MOI）为500时细胞的转导效率达到100％；不同数量的病毒转导乳腺癌细胞对癌细胞的生长没有明显影响。低温冻存可使病毒的感染性明显下降。结论：腺病毒介导的基因转移在乳腺癌细胞中有高的转导效率，而病毒载体本身对细胞的生长没有影响，可用作乳癌特异药物前体酶激活基因治疗的基因转移方法。     

多药耐药基因（MDRI）在急性白血病细胞中表达

多药耐药基因（ＭＤＲＩ）在急性白血病细胞中表达北京医科大学人民医院中心实验室颜世庆，白桃，王申五北京协和医院血液科陈嘉林，李蓉生急性白血病（ＡｃｕｔｅＬｅｕｋｅｍｉａ）是一种常见的恶性肿瘤，现在的主要治疗手段是化学药物疗法，在白血病的治疗中对化学药物...