Chemerin在COPD患者发病机制中的作用

目的 通过检测慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性发作期、缓解期患者以及健康无COPD者外周血中Chemerin和高敏C反应蛋白（hsCRP）的浓度变化,探讨Chemerin与COPD的关系.方法 研究以我院住院的COPD急性发作期（AECO-PD）、缓解期患者与健康体检者作为研究对象,应用EILSA法检测3组研究对象不同时段外周血中Chemerin和hsCRP的浓度变化.结果 AECOPD患者外周血中Chemerin浓度和hsCRP浓度明显高于COPD缓解期患者和正常对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;相关性分析显示,Chemerin浓度变化与hsCRP浓度呈正相关.结论 Chemerin可能参与AECOPD患者的炎症反应过程.     

一种抑制型慢性阻塞性肺疾病大鼠的建立

目的建立一种CCL20抗体抑制型COPD大鼠动物模型。方法18只Wistar大鼠随机分为：正常对照组、COPD组、CCL20抑制组,各6只。采用气道内注脂多糖（LPS）和烟熏4周的方法建立COPD组模型;建COPD模型注LPS前予CCL20单克隆抗体腹腔注射（100μg／只）,制备CCL20抑制动物模型。第28天处死大鼠,肺组织作病理HE染色,酶联免疫法（ELISA）检测外周血和肺泡灌洗液（BALF）中CCL20的含量。结果病理HE染色镜下见CCL20抑制组大鼠肺部病变性质较COPD组轻。CCL20抑制组大鼠外周血中CCL20含量高于正常对照组（P〈0．001）,与COPD组差异无统计学意义;BALF中CCL20含量高于正常对照组（P〈0．05）,低于COPD组（P〈0．05）。CCL20抑制组中CCL20的含量在外周血和BALF中的变化呈正相关关系（r=0．873,P〈0．01）。结论CCL20可能参与了COPD的发病过程,CCL20抗体对该过程可能有一定的抑制作用。     

微课及微信互动课堂在低年资规培医师学习中的应用

目的探讨微课教学联合微信互动课堂的教学方法在低年资住院医师规范化培训学员临床内科学习中的应用及影响。方法选取2016年9月—2017年9月在遵义医学院附属医院呼吸内科轮转学习的第一年住院医师规范化培训学员40名作为研究对象,将其随机分为两组。其中,实施传统教学法为对照组(n=20),实施微课教学和微信互动课题教学方法的为观察组(n=20),比较两组学习效果。结果观察组学员临床理论知识成绩及总成绩均高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。观察组学员对该教学方法和带教老师满意度均高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论微课联合微信互动的教学方法可提高临床内科低年资住院医师规范化培训学员的学习效果,且满意度高,可让学员在有限的时间内加强理论知识学习。     

树突细胞及其相关趋化因子受体在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺部的表达变化及其意义

目的 了解树突细胞（DC）及其趋化因子受体CCR6、CCR7在慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠肺部的表达变化,并探讨其意义。方法 选用20只清洁级健康Wistar大鼠,采用随机数字表法分为健康对照组（10只）和COPD组（10只）。COPD组使用香烟烟雾刺激和气道内注入脂多糖（LPS）的方法制备COPD模型。第29天取大鼠肺组织,制作病理切片,行HE染色观察其病理学改变;采用免疫组织化学技术检测肺部OX+62DC、CD+83DC的表达水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中CCR6和CCR7的表达水平。结果 COPD组大鼠肺组织HE染色符合COPD典型病理表现,OX62和CD83的阳性染色均主要表达于细胞的胞质,呈棕黄色。COPD组OX+62DC表达水平高于健康对照组,CD+83DC表达水平低于健康对照组,差异均有统计学意义（P＜0.01）。COPD组BALF中CCR6表达水平高于健康对照组,CCR7表达水平低于健康对照组,差异均有统计学意义（P＜0.01）。结论 DC及其趋化因子受体CCR6在COPD大鼠肺部增多,而成熟DC及其趋化因子受体CCR7在COPD大鼠肺部减少。     

NSCLC患者血清中PTBP1、CDCP1的表达及临床预后意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中多聚嘧啶束结合蛋白1(PTBP1)、含CUB结构域的蛋白质1(CDCP1)的表达及临床预后意义。方法 选取于贵州航天医院就诊的90例NSCLC患者为NSCLC组,以同期诊治的40例肺部良性疾病患者为良性疾病组,40例体检健康者为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测各组血清PTBP1、CDCP1水平,并比较各组血清PTBP1、CDCP1水平差异,比较不同临床病理特征患者血清PTBP1、CDCP1水平差异。采用Pearson相关分析NSCLC组血清PTBP1与CDCP1水平的相关性,采用Kaplan-Meier生存曲线分析血清PTBP1、CDCP1水平对NSCLC患者生存预后的影响,采用单因素及多因素Cox回归分析影响NSCLC患者生存预后的因素。结果 NSCLC组血清PTBP1、CDCP1水平明显高于良性疾病组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。NSCLC组患者血清PTBP1与CDCP1水平呈正相关(r=0.721,P<0.001)。不同肿瘤分期、淋巴结转移患者血清PTBP1、CDCP1水平差异有统计学意义(P<0.0...     

烟熏联合脂多糖制备大鼠慢性阻塞性肺疾病动物模型

目的通过动态观察大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)动物模型制备过程中肺组织及小支气管的病理改变,以期进一步了解COPD疾病的发展过程。方法采用2次气道内注入细菌内毒素脂多糖和连续被动吸烟4周的方法建立COPD大鼠模型。造模过程中取第7、14、21、28、42天大鼠肺组织进行病理HE染色。结果造模28dCOPD大鼠模型均符合人类COPD的病理形态学特点,模型组大鼠在造模过程中逐渐出现肺气肿表现。结论气道内注入脂多糖与烟熏的复合方法能成功制备较稳定大鼠COPD动物模型。     

慢阻肺大鼠肺组织中树突状细胞表面因子的表达变化及CCL20抗体的干预作用

目的了解树突状细胞表面因子OX62、CD83在慢阻肺大鼠肺部的表达变化,并探讨CCL20抗体的干预作用。方法选用30只健康Wistar大鼠,随机分为健康对照组(10只)、慢阻肺模型组(10只)、CCL20单抗组(10只),用气道内注入脂多糖(共2次)联合烟雾刺激(约28 d)的方法诱导慢阻肺模型。在实验初始对单抗组大鼠以CCL20单克隆抗体腹腔注射一次。在第29天取大鼠的肺组织观察其病理学改变,用免疫组织化学技术检测肺部树突状细胞(DC)的表面因子OX62、CD83的表达变化。结果模型组大鼠肺组织HE染色符合气道炎症和肺气肿的表现,CCL20单抗组大鼠肺部病理表现比慢阻肺组明显减轻。与健康对照组相比,慢阻肺模型组大鼠的肺组织中OX62的表达比对照组明显增多(P0.05),而在CCL20单抗组低于慢阻肺组(P0.05)。慢阻肺模型组大鼠肺组织中CD83的表达比对照组少(P0.05),而在慢阻肺组与CCL20单抗组之间则没有明显的差异(P0.05)。结论慢阻肺的发病可能与肺部OX62的表达增多及CD83的表达减少有关,使用CCL20单抗能部分地抑制这一效应。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠外周血及支气管肺泡灌洗液中CCR6、CCR7的变化及意义

目的:了解树突状细胞的趋化因子受体CCR6、CCR7在COPD大鼠外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中的变化。方法:选用20只健康Wistar大鼠,随机分为正常对照组(10只)、COPD模型组(10只),采用两次气道内注入细菌内毒素脂多糖(LPS)和连续被动吸烟4周的方法建立COPD大鼠模型。第28天处死两组大鼠。取大鼠肺脏组织用石蜡包埋HE染色以观察肺组织病理学改变,酶联免疫法(ELISA)检测BALF及外周血中CCR6、CCR7的含量。结果:COPD模型组大鼠一般状况较正常对照组大鼠差,体重显著减轻模型组(242.31±14.71)g,对照组(324.18±12.89)g,差异具有统计学意义P0.05),HE染色提示慢性阻塞性肺疾病的特征性病理改变。BALF中CCR6含量在COPD模型组(105.81±2.73)ng/L明显高于正常对照组(43.57±5.51)ng/L,差异具有高度统计学意义(P0.01),CCR7的含量在COPD模型组(10.40±3.07)ng/L低于正常对照组(41.73±7.40)ng/L,差异具有高度统计学意义(P0.01)。两组大鼠外周血中CCR6含量模型组(264.89±45.34)ng/L,对照组(311.12±29.78)ng/L、CCR7含量模型组(73.77±29.71)ng/L,对照组(56.42±15.30)ng/L均无统计学差异(P0.05)。结论:COPD大鼠肺组织病理符合人COPD特征性病理改变,提示COPD大鼠模型建立成功。树突状细胞趋化因子受体CCR6在COPD大鼠肺部明显增多,而成熟树突状细胞趋化因子受体CCR7在COPD大鼠肺部减少。     

CCL20抗体对慢性阻塞性肺疾病大鼠外周血和肺泡灌洗液中树突状细胞表面因子表达的影响

目的：研究CC亚族趋化因子配体20（CCL20）和树突状细胞（DCs）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）发病过程中的作用及抗CCL20抗体治疗对COPD外周血和肺泡灌洗液（BALF）中DCs表面因子表达的影响。方法：选取雄性SPF级Wistar大鼠48只,随机分为正常对照组、COPD模型组和CCL20抑制组,每组16只。用烟熏及气道内滴注脂多糖（LPS）方法制备COPD大鼠模型。HE染色观察3组大鼠肺组织病理学改变。采用酶联免疫法(ELISA）检测3组大鼠BALF及外周血中CCL20的含量,流式细胞术（FCM）检测3组大鼠外周血和BALF中DCs各细胞因子（CD80、CD86、MHC-Ⅱ和OX-62）的百分比。结果：COPD组和CCL20抑制组大鼠肺组织HE染色均显示气道炎症和肺气肿表现,但后者气道炎症和肺气肿表现较前者减轻。与正常对照组比较,COPD组和CCL20抑制组大鼠外周血及BALF 中CCL20含量增加（P<0.05）;与COPD组比较,CCL20抑制组大鼠外周血中CCL20含量未见改变,但BALF中CCL20含量降低（P<0.05）。与正常对照组比较,COPD组大鼠外周血中CD80、CD86和OX-62百分比均升高（P<0.05）;与COPD组比较,CCL20抑制组大鼠外周血中CD86和OX-62百分比均降低（P<0.05）。与正常对照组比较,COPD组及CCL20抑制组大鼠BALF中CD80和CD86百分比均升高（P<0.05）;与COPD组比较,CCL20抑制组大鼠BALF中CD80百分比降低（P<0.05）。结论：CCL20参与了COPD的发病过程,CCL20抗体对该过程有一定的抑制作用。CCL20抗体可以减轻DCs在外周血中的增加和气道内的募集,从而延缓气道炎症或肺气肿的产生。     

三种培养原代支气管成纤维细胞方法的比较

目的 探讨建立适用于SD大鼠支气管成纤维细胞原代培养的方法.方法 取重量为150~180 g的SD雄性大鼠的支气管组织,采用Ⅰ型胶原酶、木瓜蛋白酶联合消化+组织块黏附法、胰酶+胶原酶联合消化(双酶消化法)+组织块黏附法、组织块黏附法进行原代支气管成纤维细胞的培养.利用镜下观察细胞的生长特点;免疫荧光染色法鉴定细胞的类型及纯度;细胞的增殖活性用CCK-8检测并绘制生长曲线.结果 酶消化+组织块黏附法培养使细胞游出速度更快、细胞数量产生更多.组织块黏附法培养的细胞爬出相对缓慢、培养周期更长、获得的细胞数量相对较少.CCK8增殖曲线呈S形.培养48 h,经酶消化法分离得到的成纤维细胞已经游出,约有60%以上细胞已经贴壁,培养6~7 d可传代.组织块贴壁法培养5 d时,细胞开始从组织块边缘缓慢爬出,随后从组织块周围延伸长,14 d左右可传代.使用酶消化法培养的支气管成纤维细胞中可混有杂细胞团,为提高成纤维细胞的纯度可通过差速贴壁法纯化.结论 双酶消化法+组织块黏附法可以更高效、快速的分离和获取支气管成纤维细胞,为研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道重塑提供了充足的种子细胞.