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目的 母亲血清中微小RNA(microRNA,miRNA)的发现为无创性产前诊断开辟了新途径.但是对神经管缺陷胎儿母亲血清中妊娠相关的miRNA的研究甚少.该文旨在研究微小RNA-423(mi-croRNA-423,miR-423)在神经管缺陷胎儿孕妇血清中的异常表达及其作为潜在诊断标志物的临床价值.方法 33例产前超声检查确诊为胎儿神经管缺陷的患儿为研究对象,其中脊柱裂22例,无脑儿11例;33例胎儿健康孕妇为对照组.所有孕妇均于清晨空腹抽外周静脉血5ml离心后取血清,提取血清总RNA,用Real-time RT-PCR方法测定miR-423表达水平.并用ROC曲线分析用miR-423诊断胎儿神经管缺陷的价值.结果 神经管缺陷胎儿孕妇血清中miR-423含量(0.96±0.14)明显低于健康胎儿孕妇对照组(2.28±0.43),P<0.05.ROC分析miR-423曲线下面积为0.711(95% CI:0.566~0.856)(P<0.05).另外,对不同类型的神经管缺陷孕妇血清中的miR-423表达水平分析发现,只有在无脑儿中表达降低(0.58±0.08)差异有统计学意义.结论 孕妇血清中miR-423可作为胎儿神经管缺陷的无创性产前诊断标志物,具有潜在的临床价值,可能预示胎儿神经管缺陷严重程度. 相似文献
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目的 构建hLMO1真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法 以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO1基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中.将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞---HEK293细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测.利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-hLMO1在HEK293细胞内的定位.结果 hLMO1基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP中,酶切鉴定片段为471 bp.Western blot检测到了融合蛋白表达,分子量约为45 kDa.pEGFR-LMO1在人HEK293细胞核与细胞质均有表达.结论 成功构建了hLMO1基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-LMO1蛋白定位于HEK293细胞的细胞质和细胞核内. 相似文献
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目的探讨Ⅰ型胶原蛋白α1(COLIA1)调控神经细胞迁移活动对小鼠神经管闭合的作用。方法利用全反式维甲酸(ATRA)诱导建立神经管畸形(NTDs)小鼠模型。采用Western blotting检测COLIA1,上皮细胞间质转化(EMT)相关指标E-cadherin、 Snail、Vimentin表达情况。在C17.2神经干细胞中沉默COLIA1后,Western blotting检测COLIA1对E-cadherin、 Snail和Vimentin表达的调节作用,通过Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验观察细胞迁移生物学活动变化。结果在ATRA诱导的NTDs小鼠模型中,COLIA1表达下调,迁移相关的EMT指标Snail、Vimentin表达下调,E-cadherin表达上调。在C17.2神经干细胞中,沉默COLIA1表达后,EMT指标Snail、Vimentin表达下调,E-cadherin表达上调,细胞迁移能力降低。结论 COLIA1通过影响细胞迁移抑制NTDs的形成。 相似文献
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目的 比较羊水样品2-d电泳的不同处理方法,以建立相对简单、重复性好、检出效率高的2-d电泳方法.方法 提取孕17天正常大鼠羊水,分别采用三氯乙酸-丙酮沉淀法(方案1)、三氯乙酸-丙酮沉淀法联合白蛋白和IgG去除试剂盒(方案2)gt超滤膜浓缩法联合白蛋白和IgG去除试剂盒(方案3)三种方法处理羊水,之后进行双向电泳分离、胶体染色、软件分析和质谱检测.结果 方案1、2和3分别检测到的蛋白点为253±28、749±32和782±27个,方案1与方案2和方案3比较差异均具有统计学意义(P<0.05);方案2与方案3比较,差异具有统计学意义(P<0.05).方案1、2和3检测的相对分子质量>50000蛋白点分别为57±14,45±13和41±14个,差异无统计学意义;方案1、2和3检测的相对分子质量<50 000蛋白点分别为196±29,702±35,735±29个,方案1与方案2和方案3比较差异均具有统计学意义(P<0.05);方案2与方案3比较,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 采用超滤膜和去除高丰度蛋白预处理羊水标本可去除高丰度蛋白,提高低丰度蛋白含量,是研究羊水蛋白组的有效方法. 相似文献
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目的研究RhoGDP解离抑制因子(Rho GDP dissociation inhibitor 2,RhoGDI2)mRNA及Bcl-2mRNA的表达在缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)中的作用和机制。方法30只新生7日龄SD大鼠按照完全随机化方法分为假手术组及HIBD6h和48h组,每组10只。采用流式细胞仪检测脑细胞凋亡情况,并用Real—timeRT—PCR方法测定脑组织中RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平。结果(1)新生大鼠HIBD后48h结扎侧大脑半球脑水肿明显。(2)HIBD6h出现典型的凋亡细胞峰,细胞凋亡率为(1.40±0.12)%。HIBD48h凋亡峰更为明显,细胞凋亡率达到(15.86±0.98)%。缺氧缺血后与假手术组相比,差异有统计学意义(P〈0.01)。(3)假手术组大鼠RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平较高(4.12±0.74、2.55±0.65),在HIBD6h后二者表达开始下降(3.19±0.77、1.96±0.36),48h降低更加明显(1.04±0.18、1.06±0.17),与假手术组比较,HIBD各时间点RhoGDI2和Bcl-2mRNA的表达均明显降低,差异有统计学意义(P〈0.01)。(4)缺氧缺血后各时间点RhoGDI2mRNA的表达和Bcl-2mRNA的表达呈正相关(r=0.831,P〈0.05)。结论脑缺氧缺血后,随着凋亡的出现,RhoGDI2和Bcl-2mRNA表达水平降低,提示RhoGDI2表达失衡可能通过Bcl-2参与新生大鼠HIBD中凋亡的发生。 相似文献
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随着改革开放,人民生活水平的不断提高,卡拉OK厅、夜总会、音乐餐厅如雨后春笋般蓬勃兴起。但是一个麦克风,多人使用,含病原体的唾沫就可能污染麦克风,如果不及时处理,麦克风就可能成为传播疾病的媒介。 可是麦克风的监督监测至今尚无规定,所以长期以来一直未受到应有的重视,未列入到监测项目之中。 相似文献
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张燕秋付佳琳黄琬淇袁正伟顾卉 《发育医学电子杂志》2023,(4):241-248
目的探讨miR-92a-3p与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4,NOX4)之间的相互作用,以及两者在神经管畸形(neural tube defect,NTD)中对细胞迁移的影响。方法 实验动物采用C57BL/6J小鼠,孕鼠随机分为NTD组与对照组,每组30只,NTD组采用全反式维A酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱导NTD模型,于E9.5采集胚胎样本。实验所用细胞系为小鼠神经干细胞C17.2,转染NOX4过表达质粒、miR-92a-3p模拟物/抑制剂、模拟物对照/抑制剂对照。采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测胚胎和C17.2细胞中miR-92a-3p表达,采用蛋白质印迹法检测NOX4的表达。通过双荧光素酶报告基因实验明确miR-92a-3p对NOX4的结合及靶向调控关系。采用细胞划痕实验与Transwell实验观察miR-92a-3p和NOX4对细胞迁移活动的影响。统计学方法采用单因素方差分... 相似文献