无血清培养基对深低温冻存复苏后的间充质干细胞免疫功能的研究

目的:探讨无血清培养基对冻存后的间充质干细胞（HUC-MSCs）免疫调节功能的影响,明确其成脂成骨生物学特性,为临床应用奠定基础。方法:（1）分离脐带中的HUC-MSCs,传代纯化后深低温冻存。（2）冻融后的HUC-MSCs分别以含10%胎牛血清的培养基（SCM）,无血清培养基两种培养条件培养。（3）观察两组细胞生长状态,革兰染色计数,计算细胞活率。（4）流式细胞术检测两组细胞的表面标志物。（5）成脂成骨诱导,茜红素染色和油红染色观察诱导情况。结果:（1）两组细胞均以漩涡状贴壁,无血清培养基培养的细胞体积略小。（2）在细胞总数及活性方面,两组细胞有些微差异,可忽略不计。（3）流式细胞术显示其对PE-CD34不表达,对PE-CD105、PE-CD90、PE-CD73、PE-CD44和PE-CD29高表达。（4）对无血清培养基（SFM）所培养得到的HUC-MSCs历经约21 d的成骨细胞和脂肪细胞专向分化诱导,发现其具有可媲美SCM培养的HUC-MSCs的分化能力。结论:无血清培养基同有血清培养基相比,对深低温冻存复苏后的间充质干细胞免疫调节功能无明显差异,可替代有血清培养基进行细胞培养。