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目的 探究Musashi-2 (MSI2)过表达对二氢睾酮(DHT)诱导的人卵巢颗粒细胞系(KGN)细胞增殖和凋亡失衡的影响。方法 对人卵巢颗粒细胞(GCs)原代培养进程中的基因表达谱进行统计分析,筛选其中的差异表达基因。构建pc DNA3.1-MSI2真核表达质粒,瞬时转染至KGN细胞中,并利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot技术检测MSI2的过表达效果。在DHT诱导的KGN细胞中过表达MSI2后,然后分别利用四唑盐(MTT)比色法和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)染色法检测各组细胞的增殖情况,并进一步利用流式细胞术(FCM)检测各组细胞的凋亡情况。结果 MSI2的mRNA表达水平在人卵巢GCs原代培养过程中逐渐下降。成功构建pc DNA3.1-MSI2真核表达质粒,转染至KGN细胞中能够提高MSI2的mRNA和蛋白表达水平。MTT、Ed U和FCM结果显示与空白组相比,DHT诱导能够明显降低KGN细胞的增殖率,同时提高其凋亡率(P <0.05),而在MSI2过表达后,KGN细胞增殖率又有所提高,且凋亡率也有所降低(P <0.05)... 相似文献
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