用SCGE法观察砷、氟、黄绿青霉素和T-2毒素引起的SGC-7901细胞基因组DNA损伤

目的观察砷、氟、黄绿青霉素和T-2毒素对SGC-790l细胞基因组DNA的损伤作用及特点。方法染毒剂量lOμmol／L，染毒后4h应用单细胞凝胶电泳技术结合“彗星图像分析系统”检测DNA损伤。结果NaAsO2组尾长明显大于对照组；NaF组拖尾率显著高于对照组；CIT组总拖尾率、尾长和尾动量均高于对照组；而T-2毒素组各指标均高于对照组。结论NaAsO2、NaF、CIT和T-2毒素均可引起DNA损伤，但各有特点，说明它们引起DNA损伤的机制可能是不同的。     

3种骨疾病患者甲襞微循环的临床研究

目的　观察股骨头坏死、退行性骨关节炎和骨质疏松患者甲襞微循环的变化情况。方法　利用微循环仪进行甲襞微循环状况检测 ,并用田氏积分法进行积分。结果　 3种骨病患者的甲襞微循环都不同程度的发生改变 ,尤以股骨头坏死和退行性骨关节炎最为严重。结论　骨疾病患者可以发生不同程度的微循环改变 ,这种改变可能是其发病机制之一。通过改善微循环可能是治疗和预防骨疾病的有效方法     

黄绿青霉素的高效液相色谱法检测

目的摸索高效液相色谱(HPLC)检测粮食中黄绿青霉素(citreoviridin,CIT)的实用方法。方法以CIT标准品人工污染几种粮食,然后用二氯甲烷提取、过滤、自然干燥、流动相定容、上机。使用日本岛津SPD鄄10Avp液相色谱仪,紫外鄄可见检测器,Hypesil SiO2 色谱柱(4.6 mm ×150 mm,5 μm)。流动相是乙酸乙酯∶正已烷(7∶3)。流速和检测波长分设为0.5 ml/min和388 nm。结果最低检出量为10 ng/g。标准曲线小剂量R1 = 0.999,Se1 = 0.015 532;大剂量R2 = 0.999,Se2 = 0.030 24。回收率82.5%～96.1% 。日间与日内变异均< 2%。结论高效液相色谱检测法灵敏、简捷、经济,适用于地方病病区粮食黄绿青霉素污染水平的检测。     

黄绿青霉素致人胃癌细胞损伤的电镜观察

目的 电镜观察黄绿青霉素（CIT）对离体细胞损伤的超微形态变化。方法 细胞株为人胃癌细胞（SGC－7901）,常规培养。实验组分高低剂量两组,CIT在细胞培养液的终浓度分别为20,60μmol/L,37℃5%CO2孵箱中孵育24h。结果 实验两组CIT均导致细胞线粒体损伤。表现为线粒体嵴膜破坏,嵴变短、消失,线粒体肿胀、空泡变;高剂量组还伴有核浓缩、染色质边集。结论 CIT损害细胞线粒体结构。     

不同脑微血管内皮细胞条件培养液抗缺血及再灌神经元损伤的比较

目的:通过乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的检测,观察解毒通络药物干预后的脑微血管内皮细胞条件培养液(conditioned medium of cerebral microvascular endothelial cells,CMECs-CM)特征及其抗缺血及再灌皮质神经元损伤的效应,探讨脑微血管内皮细胞(cerebral microvascular endothelial cells,CMECs)调控神经元功能的机制。方法:通络救脑注射液(Tongluo Jiunao Injection,TLJNI)作用于正常、缺血和缺血再灌三种培养状态的大鼠CMECs,分别收集有药物干预及无干预的三对无血清内皮细胞条件培养液,并测定其LDH值。同步原代培养大鼠脑皮质神经元,亦分为正常、缺血、缺血再灌三组,用低(10%)、中(50%)、高(100%)三种浓度的各类CMECs-CM分别作用上述三种培养状态的神经元,测定其LDH漏出率。结果:比较TLJNI干预后的CMECs-CM与无干预的CMECs-CM中LDH漏出值,CMECs缺血组与缺血再灌组经药物干预后均明显降低(P<0.01)。对于缺血神经元,缺血内皮细胞条件培养液(conditioned medium of ischemic CMECs,Is-CM)高浓度(100%)和TLJNI干预后的缺血内皮细胞条件培养液(conditioned medium of ischemic CMECs with drug treatment,IsT-CM)高浓度(100%)作用后表现为增加LDH漏出率(P<0.01),而低浓度10%的IsT-CM则降低LDH漏出率(P<0.05);对于缺血再灌神经元,与对照组比较,各类CMECs-CM作用后均能降低神经元LDH漏出率(P<0.05或P<0.01)。比较每种条件液相邻浓度间的效应差异,均以10%或50%的CM降低损伤为佳,正常内皮细胞条件培养液(conditioned medium of normal CMECs,N-CM)及缺血再灌内皮细胞条件培养液(conditioned medium of ischemic/reperfusional CMECs,Rp-CM)组间差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);对于正常神经元,各类CMECs-CM作用后均增加了神经元LDH漏出率(P<0.05或P<0.01)。比较每种条件液相邻浓度间的效应差异,N-CM组间差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:TLJNI能够防御CMECs缺血及缺血再灌的损伤,可以通过内皮细胞介导发挥抗缺血及缺血再灌神经元损伤的效应。提示CMECs-CM及TLJNI干预后的CMECs-CM均存在着抗缺血再灌神经元损伤的活性物质。     

42例HBsAg携带者的甲襞微循环观察

本文对４２例ＨＢｓＡｇ携带者（ＡＳＣ）进行了甲襞微循环现测，以７３例健康人做对照，对ＡＳｃ甲襞微循环进行了初步观察．结果显示 ＡＳＣ甲襞微循环的管袢形态、袢内流态，禅周状态的积分值及总积分值均明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）．     

天麻素对体外模拟脑缺血损伤大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用

目的：观察中药天麻素对培养的正常及缺血大鼠脑微血管内皮细胞（BMEC）的影响，以探讨天麻素对BMEC的作用。方法：采用体外培养的BMEC，模拟脑缺血损伤，观察天麻素对其活性、生存率和一氧化氮（NO）的影响。结果：缺血损伤模型BMEC活性及生存率较正常对照组明显降低；不同剂量天麻素对正常对照组BMEC活性、生存率及NO含量有升高趋势；正常对照组不同剂量天麻素BMEC活性较缺血损伤模型组活性有明显升高（P〈0．05）；天麻素高剂量可明显提高缺血损伤BMECNO含量（P〈0．05）。结论：天麻素各实验剂量可增强缺血损伤BMEC活力，提高受损内皮细胞（EC）的生存率；促使ECNO分泌增加。提示天麻素对体外培养的大鼠BMEC缺血损伤具有一定的保护作用。     

针刺血清对培养海马神经元内质网活性的上调作用

目的:通过采用D-273内质网荧光分子探针来观察针刺血清调节内质网活性的作用,从而探讨针刺作用的细胞分子水平机理。方法:选用原代培养的9～11天的新生SD大鼠海马细胞,应用激光共聚焦显微镜动态扫描观察加入正常大鼠血清和电针"百会"、"足三里"、"曲池"、"三阴交"2周后的血清对培养的正常和模拟缺血缺氧海马神经元内质网活性的影响。结果:加入正常血清后对照和模型组海马神经元内质网荧光值均下降,而加入针刺血清后下降的荧光强度变化值减小。结论:针刺血清阻抑了神经元内质网活性的下降,显示针刺血清可能有提高海马神经元的内质网活性效应。     

大鼠脑微血管内皮细胞条件培养液对皮层神经元活性的影响以及通络救脑注射液的干预作用

目的:探讨脑微血管内皮细胞条件培养液对神经元活性的影响,以及通络救脑注射液对此过程的干预作用。方法:制备正常、正常用药、拟缺血损伤、拟缺血损伤用药4种脑微血管内皮细胞条件培养液(N-CM、NT-CM、I-CM、IT-CM),分别作用于培养的皮层正常神经元和拟缺血损伤神经元,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率检测分析各个条件培养液对神经元活性的影响特征。结果:①N-CM对正常神经元无明显影响,但对拟缺血损伤的神经元表现出一定的保护作用,尤其是NT-CM可明显提高受损的神经元活性;②I-CM可降低正常神经元活性,对已受损的神经元则进一步加重损伤,IT-CM可明显改善这种损伤状态。结论:脑微血管内皮细胞的旁分泌作用可能在中枢系统缺血性损伤中起重要作用,有可能是不能透过血脑屏障的中药成分发挥治疗作用的靶点。     

黄绿青霉素致细胞DNA损伤的单细胞电泳实验观察

目的：应用单细胞电泳技术探讨黄绿青霉素（CIT）对细胞DNA损伤的作用，探索CIT暴露的生物标志。方法：CGC－7901细胞常规培养，荧光显微镜观察CIT不同剂量对DNA的效应，用Kinetic彗星图像分析软件，对DNA的尾长和尾积积差进行分析。结果：CIT可致细胞DNA损伤，随着CIT浓度的增加，DNA的迁移长度和尾长积差都明显增加，呈显著剂量效应关系，以尾长积差指标更灵敏。结论：单细胞电泳技术检测的DNA损伤有望成为CIT暴露的生物标志。