糖尿病足危险因素护理干预的效果

目的分析糖尿病足患者在治疗过程中所存在的危险因素以及相应的护理干预措施。方法选取该院2016年1月—2017年12月所接收的68例糖尿病足患者为研究对象。采用数字表分组法,将68例患者分为对照组和护理组两组,每组34例。对照组患者接受常规护理,护理组患者接受优质护理。观察并对比两种护理方法所能产生的护理效果。结果经研究发现,在护理后两组患者在血纤维蛋白原、糖化血红蛋白、高密度脂蛋白胆固醇以及BMI这几方面的指标上差异有统计学意义(P0.05)。结论在糖尿病足患者的临床护理工作中,采用优质护理能够很好的对患者各方面指标进行控制,具有较高应用价值。     

高糖暴露对小鼠脑微血管内皮细胞通透性的影响

【目的】探讨高糖暴露对脑微血管内皮细胞通透性的影响。【方法】选取小鼠脑微血管内皮细胞系(bEnd.3)作为研究模型,检测跨内皮细胞电阻值(TEER)、碱性磷酸酶(ALP)及γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)的活性,对细胞模型的血脑屏障特征进行鉴定;再通过细胞形态学、细胞活力、细胞内乳酸脱氢酶活性及ZO-1、Occludin基因相对表达量的变化评价高糖暴露对脑微血管内皮细胞通透性的影响。【结果】细胞的TEER值、ALP及γ-GT的活性随细胞培养时间的增加而逐渐升高;细胞形态学结果显示,高糖作用下细胞数目明显减少,贴壁不稳;细胞活力实验显示,经葡萄糖暴露处理后,受试细胞活力呈剂量和时间依赖性降低;随着葡萄糖暴露浓度的增高,细胞内乳酸脱氢酶活性逐渐增高,各剂量组差异均有统计学意义(P<0.05)。此外,对紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的mRNA表达水平进行检测发现,高糖暴露可抑制ZO-1、Occludin基因的表达,且表达水平呈剂量依赖性降低。【结论】体外培养的bEnd.3细胞模型具有血脑屏障的特征,高糖暴露能够抑制紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达,该结果可能与脑微血管内皮细胞通透性的改变有关。     

基于重组人角膜模型SkinEthicTM的化学品眼刺激性体外替代方法研究

目的 建立重组人角膜模型SkinEthicTM体外替代方法并探讨其用于化学品眼刺激性评价的预测能力。方法 选取11种已知刺激性分类的标准化学品（包括5种固体化学品和6种液体化学品;涵盖不同溶解度、含自身颜色反应以及与MTT发生直接还原反应的化学品）,采用重组人角膜模型SkinEthicTM评估其作为体外眼刺激性替代方法的可行性。以MTT法测定细胞活性作为检测终点,设置相对细胞存活率50%（固体）或60%（液体）为判定依据来预测刺激性和非刺激性。结果 11种已知刺激性分类的化学品经重组人角膜模型测试,其中7种被正确评价为刺激性物质（3种固体和4种液体）,4种被评价为非刺激性物质（2种固体和2种液体）。评价方法在灵敏度与特异性方面均表现良好,可区分无危险性分类和具有潜在风险性（严重眼损伤/眼刺激性）的化学品,得到的分类结果和UN GHS分类结果一致。结论 基于重组人角膜模型SkinEthicTM的眼刺激性体外替代方法可用于快速预测和评价无危险性分类和严重眼损伤/眼刺激性化学物质。     

血管紧张素Ⅱ的1型受体在肿瘤中作用的研究进展

血管紧张素Ⅱ是肾素-血管紧张素系统（renin-angiotensin system,RAS）中一种主要的多功能活性肽,不仅在调节血压、维持体液和电解质平衡等方面起着不可忽视的作用,而且在新生血管的增殖、迁移和生长因子的生长方面有重要的作用,对血管紧张素受体拮抗剂的研究将可能为恶性肿瘤的治疗提供一个新颖有效的方法.     

基质细胞衍生因子-1及其受体 CXCR4对膀胱癌细胞侵袭能力及腔内种植的影响

目的：复发和转移是膀胱癌治疗失败的主要原因。文中利用RNA干扰技术使趋化性细胞因子受体CXCR4基因沉默,探讨其沉默对膀胱癌细胞侵袭能力及腔内种植的影响。方法设计合成CXCR4的特异性短发卡状RNA （ short hairpin, shRNA）,筛选出能够稳定抑制CXCR4表达的细胞,并分为空白对照组、阴性对照质粒组、pshRNA-CXCR4-1实验组, pshRNA-CXCR4-2实验组,应用RT-PCR和免疫荧光分别检测CXCR4 mRNA和蛋白表达水平,应用Boyden小室模型检测体外侵袭能力的变化。将20只裸小鼠随机数表法分为实验裸小鼠和对照裸小鼠,各10只。向实验裸小鼠膀胱内注入100μL ShRNA-EJ-M3,向对照裸小鼠膀胱内注入100μL EJ-M3细胞,检测shRNA-CXCR4对膀胱癌细胞腔内种植能力的影响。结果稳定转染后的pshRNA-CXCR4-1实验组CXCR4 mRNA表达（62．05±1．35）较空白对照组（174．38±1．96）和阴性对照组（166．27±1．82）明显下降（P＜0．05）,pshRNA-CXCR4-2实验组CXCR4 mRNA表达水平（182．58±4．2）与空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义（P＞0．05）;免疫荧光实验中pshRNA-CXCR4-1实验组红色免疫荧光细胞数（32．24±2．23）较空白对照组（89．61±4．47）和阴性对照组（92．45±3．68）降低（P＜0．05）;pshRNA-CXCR4-2实验组红色免疫荧光细胞数（76．87±5．11）与空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。体外趋化侵袭实验结果显示,pshRNA-CXCR4-1实验组穿膜细胞数（39．67±8．45）明显少于空白对照组（135．33±9．28）及阴性对照组（123．63±6．36）,差异有统计学意义（P＜0．05）。实验裸小鼠腔内种植能力与对照裸小鼠比较,差异有统计学意义（10％ vs 70％,P＜0．01）。结论以CXCR4为靶向的特异性shRNA能有效抑制膀胱癌细胞基因CXCR4的表达,显著降低膀胱癌细胞体外侵袭能力及腔内种植能力,SDF-1/CXCR4生物轴有望成为预防和治疗膀胱癌侵袭和转移的重要靶点之一。     

血管紧张素抑制剂缬沙坦对膀胱癌细胞表达的影响

目的 探讨缬沙坦对不同侵袭能力的膀胱癌细胞株血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ） 1型受体（AT1R）抗原、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达的影响。方法 对三株不同侵袭能力的细胞株EJ-M3、EJ、BIU-87进行培养,使用10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9 mol/L缬沙坦的1640培养液作用于细胞株,采用细胞生长状态测定法检测细胞增殖状况,确定最终药物浓度。根据细胞株不同分为EJ-M3组、EJ组、BIU-87组,每组细胞分为实验亚组和对照亚组,实验亚组加入含有10-3 mol/L缬沙坦的RPMI-1640培养液,对照亚组仅加入无血清RPMI-1640培养液,培养48 h后抽提相应蛋白和mRNA。采用Western blotting法测定AT1R、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平,采用RT-PCR法检测AT1R、MMP-2和MMP-9基因的相对表达。采用细胞划痕实验、Transwell体外细胞侵袭实验检测3种膀胱癌细胞株的迁移能力和侵袭能力的改变。结果 依据MTT实验测定出的生长曲线选择浓度为10-3 mol/L的缬沙坦作为最终药物浓度。Western blotting电泳结果显示,AT1R、MMP-2、MMP-9在3个细胞株中均有表达,但均较对照亚组表达明显降低。3组细胞株对照亚组AT1R、MMP-2、MMP-9 mRNA相对表达均高于实验亚组（P＜0.05）。3组细胞株实验亚组细胞迁移距离短于对照亚组（t=7.24、6.14、4.30,P＜0.01）。3组细胞株实验亚组侵入细胞数量较对照亚组少（t=6.24、4.33、2.81,P＜0.01）。结论 缬沙坦可有效抑制膀胱癌细胞AT1R表达,进而抑制MMP-2和MMP-9表达。AT1R抑制剂有可能成为一种新的抑制膀胱癌转移和延长膀胱癌患者生存期的药物。     

人源THP - 1细胞系活化试验在化妆品皮肤致敏性评价中的应用研究

目的 建立基于人源THP - 1细胞系的皮肤致敏性体外替代测试方法（h - CLAT）,探讨其应用于化妆品体外皮肤致敏性评价的可行性。方法 参考OECD 442E测试指南,通过对10种标准化学品的致敏性预测建立h - CLAT试验方法,验证其准确性及灵敏度,再对10种特殊类化妆品产品进行皮肤致敏性评价,并与体内皮肤变态反应判定结果进行比较分析。结果 使用h - CLAT方法准确判定了10种标准化学品的皮肤致敏性,10种化妆品产品中,9种产品的预测结果与体内皮肤变态反应的判定结果具有一致性,均为无致敏性,1种产品被判定为具有潜在致敏性,与动物试验结果不一致。结论 基于有害结局路径（AOP）AOP理论,体外人源细胞系活化试验可作为化妆品皮肤致敏性评价的一种筛查方法,但针对体外替代试验的局限性,仍需整合其他测试方法进行皮肤致敏性预测。     

垃圾焚烧区周边居民血浆中细胞因子的表达水平及其影响因素

[目的]探讨垃圾焚烧区周边居民外周血中细胞色素P450 1A1（CYP1A1）基因mRNA表达水平和血浆中细胞因子白介素（IL）-6、IL-17A、IL-17F、IL-21、IL-23的表达水平。[方法]选择居住社区位于垃圾焚烧厂烟囱下风向〈10 km范围内某社区的男性居民42名为暴露组;居住区距垃圾焚烧区＞10 km且无明显环境接触垃圾焚烧污染物的44名男性居民为对照组。采用半定量逆转录-聚合酶链反应检测研究对象外周血中CYP1A1基因mRNA相对表达水平;Bio-PlexTM悬液芯片测定研究对象血浆中IL-6、IL-17A、IL-17F、IL-21、IL-23细胞因子的浓度。[结果]暴露组人群外周血CYP1A1基因mRNA相对表达水平高于对照组人群的平均水平（P〈0.05）。暴露组人群血浆中细胞因子IL-17F、IL-21、IL-23的浓度均高于对照组（P〈0.05）。细胞因子IL-17F、IL-21、IL-23的浓度经自然对数转换后分别与暴露、年龄、体质指数等因素做多元线性回归分析,发现暴露与IL-17F、IL-23表达水平的升高有关（P〈0.05）。[结论]暴露组人群外周血CYP1A1基因mRNA表达水平高于对照组人群的平均水平,且两组人群血浆中IL-17F、IL-23的表达水平亦有差异。