气相色谱法测定头孢噻肟钠中残留溶媒含量

目的:建立一种方便快捷的方法测定头孢噻肟钠原料粉中的残留溶媒乙酸乙酯及四氢呋喃的含量。方法:采用岛津 GC—17A 气相色谱仪,氮气为载体气体,以异丙醇为内标,程序升温进行测定。结果:该方法测定乙酸乙酯和四氢呋喃的精密度分别为(0.70%～1.87%)和(1.34%～1.91%)。方法回收率分别为100.2±2.7%和101.1±3.6%。结论:本方法适用于头孢噻肟钠的残留溶媒测定,方法简便快捷。     

急诊经皮冠状动脉介入术治疗急性心肌梗死合并低血压的临床观察

目的探讨优化应用升压药物(静脉注射多巴胺配合动脉注射生理盐水)和主动脉内球囊反搏(IABP)支持下急诊经皮冠状动脉介入术(PCI)治疗急性心肌梗死(AMI)合并低血压的临床疗效。方法观察44例AMI合并低血压患者分别在优化应用升压药及IABP支持下急诊行PCI 32例(手术组)和非手术12例的疗效。结果优化应用升压药及IABP支持下急诊PCI明显较非手术患者降低了院内病死率(15.6%vs 50.0%,P<0.05)。手术组优化应用升压药患者,稳定血压所需时间和出现恶心、呕吐者减少。结论 AMI合并低血压早期行优化应用升压药或IABP支持下急诊PCI可明显降低其院内病死率,应用优化升压药方案配合急诊PCI治疗AMI合并低血压具有方便、快捷、高效的特点。     

人牙胚釉原蛋白成熟肽基因的克隆

目的:克隆人釉原蛋白成熟肽编码区基因片断,并构建含有该基因的重组表达质粒。方法:从引产胎儿牙胚组织中抽提总RNA,以Oligo(dt)为引物,逆转录合成牙胚cDNA利用PCR,从cDNA中扩增出人釉原蛋白成熟肽编码序列(约540bp),所得目的基因片断插入表达载体质粒PQE30,转化到大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆,抽提重组质粒DNA,通过PCR、酶切和核苷酸序列分析,鉴定阳性克隆。结果:样品质粒测序证实,质粒PQE30中插入的基因片段与人釉原蛋白成熟肽基因序列完全相同。结论:从人胚胎的牙胚组织中克隆到釉原蛋白成熟肽编码序列,成功构建含有人釉原蛋白成熟肽基因的重组表达质粒。     

布氏杆菌分子亚型分析方法的建立与应用研究

目的应用高变八聚体寡核苷酸指纹(hypervariable octameric oligonucleotide finger_prints,HOOF_Prints)分析法对我国的布氏杆菌进行亚型和分子流行病学的研究。方法根据布氏杆菌8个数目可变串联重复单元(variable number of tandem repeats,VNTR)位点序列设计8对特异性的引物,用PCR方法扩增两株临床分离株并测序,得到8个位点的重复次数,进一步与国际上已公布的布氏杆菌VNTR数据进行比对及构建基因树,从而建立布氏杆菌亚型的分型方法。结果通过基因树得到我院两例布氏杆菌,均属猪二型,与我国流行的牛种与羊种布氏杆菌菌型存在基因型上的差异。结论HOOF_Prints分析法可在分子水平分析我国布氏杆菌的流行特点。     

人乳头状瘤假病毒中和抗体滴度和ELISA法测定的小鼠血清抗体滴度的相关性研究

目的 探讨两种不同的报告基因纽扣珊瑚绿色荧光蛋白(Zoanthus sp.green fluorescent protein,ZsGreen)和分泌性碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase,SEAP)测量的人乳头状瘤假病毒中和滴度之间的相关性,以及中和滴度和抗体滴度的相关性.方法 将密码子优化的人乳头状瘤病毒(HPV)衣壳蛋白L1、L2基因表达质粒和报告基因质粒共转染293FT细胞,48 h后收集细胞裂解上清,柱层析纯化假病毒,对假病毒滴度进行测定.采集免疫过候选HPV疫苗和Gardasil疫苗的小鼠血清,测量血清的中和滴度和抗体滴度.结果 经统计分析,这两种报告基因系统的假病毒检测的中和滴度结果高度相关(Spearman相关系数r=0.760),而且中和滴度和抗体滴度的相关度很高(Spearman相关系数r=0.577和0.741).结论 两种不同的报告基因ZsGreen和SEAP测量的HPV假病毒中和滴度之间,以及中和滴度和ELISA测定的抗体滴度之间高度相关,揭示了部分HPV疫苗预防病毒入侵的机制,为快速准确鉴定HPV-16和HPV-18候选疫苗的免疫保护效果奠定了基础.     

侵袭性牙周炎与FMLP受体单核苷酸多态性

目的：研究FMLP受体作为遗传标志与局限型侵袭性牙周炎之间的关系。方法：提取目标人群（局限型侵袭性牙周炎L－AgP患者、慢性牙周炎CP患者及正常人群）的DNA，PCR扩增后，进行DNA基因测序。结果：在259－332位点中存在单核苷酸多态（SNPs),L-AgP组与其它两组之间有显著差异。结论：在汉族人群中，L－AgP患者FMLP受体分子细胞外第一环及其邻近的跨膜区氨基酸残基的改变可能是引起患者趋化功能缺陷的分子基础，由此导致的受体不能识别细菌趋化物亦可能是引起L－AgP患者外周血PMN趋化功能低下的主要原因。     

巨噬细胞摄取结核分支杆菌相关的受体

结核分支杆菌是典型的胞内致病菌 ,它在机体内的主要宿主细胞是巨噬细胞[1] 。结核分支杆菌与巨噬细胞膜表面受体结合后 ,经膜内陷形成吞噬小体进入细胞 ,除了被细胞消化清除外 ,它有一系列的措施 ,如抑制巨噬细胞的激活 ,消除氧化基团 ,抑制细胞溶酶体与吞噬体的融合并抵抗溶酶体酶的作用 ,从而在细胞内存活下来。文中综述了与巨噬细胞摄取结核分支杆菌相关的受体 ,以及结核分支杆菌利用膜受体进入巨噬细胞的机制。一、补体受体 (complementreceptors)巨噬细胞表面的补体受体 ,是参与吞噬结核分支杆菌的主要膜受体 ,包括两类典型的结构形式…     

高效液相色谱法测定头孢替安的含量

目的:建立了测定盐酸头孢替安含量的HPLC法。方法:利用高效液相色谱法。结果:盐酸头孢替安浓度在0．02-0．08g/L范围内呈线性关系,线性方程为y=8E 0．6x 341．71线性相关系数r=0．9995,测定结果的平均加标回收率为99．86％,相对标准偏差为0．52％。结论:结果表明实验方法简便、快速、结果准确,可以用于该制剂的质量控制。     

重组人乳头瘤病毒双价(16/18型)疫苗免疫原性评价方法的研究

目的:探讨重组人乳头瘤病毒双价(16/18型)候选疫苗免疫原性评价方法。方法:对以假病毒为基础的中和实验(Zs-Green法)测定血清中和滴度,以微球为基础建立的Luminex法测定中和滴度和ELISA法测定抗体滴度的3种方法进行相关性研究以及体内效价测定(ED50法)和体外相对效力测定(IVRP法)的相关性分析,同时对5种免疫原性的评价方法进行重复性验证。结果:ZsGreen法、Luminex法测定的中和滴度和ELISA法测定的抗体滴度检测结果表明:滴度值呈明显的剂量效应以及侯选疫苗具有良好的免疫原性。采用SPSS统计软件分析,对于HPV 16L1 ZsGreen法、Luminex法和ELISA法的相关系数分别为0.791,0.800,0.747(Spearman相关系数)和HPV 18L1的相关系数分别为0.734,0.625,0.634(Spearman相关系数)。并且ED50法和IVRP法具有一定的相关性。5种方法重复性验证的RSD分别为:5.3%(ZsGreen)、5.2%(Luminex)、8.0%(ELISA)、32.3%(ED50)、6.3%(IVRP)。结论:建立的HPV 16和HPV 18...     

牙龈卟啉菌和牙垢密螺旋体在不同深度牙周袋内的分布

目的:建立检测牙龈卟啉菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)和牙垢密螺旋体(Treponema denti-cola,Td)的实时荧光定量PCR方法,探讨Pg和Td的定植量与牙周状况的关系.方法:建立SYBRGreenⅠ荧光实时定量PCR法检测Pg和Td细菌数量的方法.采集43例慢性牙周炎患者的龈下菌斑并检测Pg和Td的检出率和细菌量,同时记录取样位点的牙周探诊深度.结果:在102～107范围内细菌数与Ct值有良好的线性关系,最低检测到Pg和Td的DNA模板为100拷贝.Pg和Td在慢性牙周炎患者中的阳性检出率、共同检出率和两种细菌数量均随着牙周探诊深度的增加而升高,多组探诊深度间有统计学差异.结论:慢性牙周炎的牙周状况与Pg和Td的细菌数量密切相关.